| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第10-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-27页 |
| 2.1 试验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第14页 |
| 2.1.2 供试载体 | 第14页 |
| 2.1.3 供试培养基 | 第14-15页 |
| 2.1.4 供试试剂及溶液 | 第15-16页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第16页 |
| 2.2 酵母异源互补法分析 STK2 基因的功能 | 第16-22页 |
| 2.2.1 玉米大斑病菌总 RNA 提取及第一链 cDNA 的合成 | 第16页 |
| 2.2.2 STK2 基因的克隆 | 第16-18页 |
| 2.2.3 STK2 基因的生物信息学分析 | 第18页 |
| 2.2.4 酵母表达载体的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.5 酵母的遗传转化 | 第20页 |
| 2.2.6 STK2 基因酵母互补转化子的验证 | 第20-21页 |
| 2.2.7 酿酒酵母互补转化子中 STK2 基因表达水平的检测 | 第21页 |
| 2.2.8 STK2 基因对酿酒酵母 KSS1 基因的互补作用 | 第21-22页 |
| 2.2.9 STK2 基因对酿酒酵母 FUS3 基因的互补作用 | 第22页 |
| 2.2.10 酿酒酵母生长速率的测定 | 第22页 |
| 2.3 玉米大斑病菌 StMSG5 基因的克隆及功能分析 | 第22-27页 |
| 2.3.1 StMSG5 基因同源片段的获得及生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.3.2 StMSG5 基因敲除载体的构建 | 第22-24页 |
| 2.3.3 StMSG5 基因敲除突变体的创制 | 第24页 |
| 2.3.4 StMSG5 基因敲除突变体的验证 | 第24-25页 |
| 2.3.5 StMSG5 基因缺失突变体的分析 | 第25-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-43页 |
| 3.1 酵母异源互补法鉴定玉米大斑病菌 STK2 基因的功能 | 第27-33页 |
| 3.1.1 STK2 基因 cDNA 全长的扩增结果 | 第27页 |
| 3.1.2 STK2 基因的生物信息学分析 | 第27-29页 |
| 3.1.3 STK2 基因功能互补载体的构建 | 第29-30页 |
| 3.1.4 STK2 基因功能互补转化子的筛选 | 第30-31页 |
| 3.1.5 STK2 基因对酿酒酵母 KSS1 基因的互补作用 | 第31-32页 |
| 3.1.6 STK2 基因对酿酒酵母 FUS3 基因的互补作用 | 第32-33页 |
| 3.1.7 STK2 基因对酿酒酵母生长速率的影响 | 第33页 |
| 3.2 玉米大斑病菌 StMSG5 基因敲除载体的构建 | 第33-37页 |
| 3.2.1 StMSG5 基因的克隆及生物信息学分析 | 第33-36页 |
| 3.2.2 StMSG5 基因敲除载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.3 玉米大斑病菌 StMSG5 基因敲除突变体的获得 | 第37-39页 |
| 3.3.1 转化子的抗性筛选 | 第37-38页 |
| 3.3.2 转化子的特异引物 PCR 验证 | 第38页 |
| 3.3.3 突变体的 RT-PCR 验证 | 第38-39页 |
| 3.4 玉米大斑病菌 StMSG5 基因的功能分析 | 第39-43页 |
| 3.4.1 StMSG5 基因敲除突变体菌落形态的观察 | 第39页 |
| 3.4.2 StMSG5 基因对菌落生长速率的影响 | 第39-40页 |
| 3.4.3 StMSG5 基因对病菌菌丝形态的影响 | 第40页 |
| 3.4.4 StMSG5 基因对分生孢子的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.5 ΔStMSG5 突变体穿透能力的观察 | 第41-42页 |
| 3.4.6 ΔStMSG5 突变体附着胞发育及穿透能力的显微观察 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 4.1 Fus3/Kss1 MAPK 级联途径中 MAPK 激酶的功能研究 | 第43页 |
| 4.2 植物病原真菌中 MAPK 激酶磷酸酶基因的功能研究 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
| 作者简历 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
