摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一部分 登革热分子流行病学研究 | 第10-55页 |
前言 | 第10-11页 |
1 登革病毒的生物学特征 | 第11-14页 |
1.1 登革病毒的分子结构和基因组 | 第11-12页 |
1.2 登革病毒的复制和传播途径 | 第12-14页 |
1.3 世界范围内登革热的流行概况 | 第14页 |
2 中国历年登革热流行情况的回顾性研究 | 第14-27页 |
2.1 研究方法概述 | 第14-17页 |
2.2 中国历年登革热的地理分布 | 第17-20页 |
2.3 中国历年登革热的时间分布 | 第20-21页 |
2.4 中国历年登革热的人口分布 | 第21-23页 |
2.5 中国历年登革热的型别分布 | 第23页 |
2.6 中国历年登革热流行株的进化发育研究 | 第23-27页 |
3 云南省西双版纳州登革热分子流行病学研究 | 第27-50页 |
3.1 概述 | 第27-29页 |
3.2 材料与方法 | 第29-34页 |
3.3 2013年西双版纳州登革热流行病学研究 | 第34-42页 |
3.4 2015年西双版纳州登革热流行病学研究 | 第42-50页 |
讨论 | 第50-55页 |
第二部分 重症登革热临床病理观察 | 第55-71页 |
前言 | 第55-56页 |
1 研究背景及实验思路 | 第56-58页 |
2 材料与方法 | 第58-63页 |
2.1 临床研究设计及参与者招募 | 第58页 |
2.2 实验材料 | 第58-59页 |
2.3 实验方法 | 第59-63页 |
3 结果 | 第63-68页 |
3.1 登革热血清中非结构蛋白NS1含量检测 | 第63-64页 |
3.2 登革热血清样本的常规血液指标检测结果 | 第64页 |
3.3 登革热血清中登革热病毒载量检测 | 第64-66页 |
3.4 登革热血清中免疫球蛋白IgG/IgM/IgA水平检测 | 第66-67页 |
3.5 登革热血清中补体C3/C4水平检测 | 第67-68页 |
讨论 | 第68-71页 |
第三部分 补体与重症登革热的相关性研究 | 第71-84页 |
前言 | 第71-75页 |
1 材料与方法 | 第75-78页 |
1.1 白纹伊蚊细胞培养 | 第75页 |
1.2 登革病毒毒株扩增及鉴定 | 第75页 |
1.3 收获病毒液的滴度测定 | 第75-76页 |
1.4 人血清抗体依赖增强补体裂解模型的建立 | 第76页 |
1.5 人全血抗体依赖增强感染模型的建立 | 第76页 |
1.6 免疫比浊法测定补体C3 | 第76-77页 |
1.7 C3裂解产物(C3SP)C3a的定量检测 | 第77-78页 |
1.8 补体裂解产物C5a、C3bBb、C1q的定量检测 | 第78页 |
2 结果 | 第78-82页 |
2.1 登革病毒的型别鉴定 | 第78-79页 |
2.2 利用人血清建立抗体依赖增强补体裂解模型 | 第79页 |
2.3 利用人全血建立ADE模型 | 第79-80页 |
2.4 利用人全血ADE模型研究补体活化途径 | 第80-82页 |
讨论 | 第82-84页 |
第四部分 补体旁路途径过度激活导致重症登革热的病理机制研究 | 第84-103页 |
前言 | 第84页 |
1 材料与方法 | 第84-92页 |
1.1 人外周血淋巴细胞(PBMC)分离及培养 | 第84-85页 |
1.2 人外周血单核细胞初步纯化(Monocytes) | 第85页 |
1.3 美天旎MAC阴性磁珠分选人外周血单核细胞 | 第85-86页 |
1.4 阴性磁珠分选的人外周血单核细胞纯度鉴定 | 第86页 |
1.5 人外周血单核细胞培养条件摸索 | 第86-87页 |
1.6 人外周血单核细胞抗体依赖增强感染(ADE)模型的建立 | 第87页 |
1.7 C3a、C5a含量检测 | 第87页 |
1.8 ELISA法定量检测登革热血清中细胞因子IL-10含量 | 第87-88页 |
1.9 免疫共沉淀(Co-Immunopredpitation, Co-IP) | 第88-89页 |
1.10 SDS-PAGE鉴定免疫共沉淀收获液 | 第89页 |
1.11 质谱鉴定SDS-PAGE中的目标蛋白 | 第89页 |
1.12 Western Blot定性验证质谱结果 | 第89-90页 |
1.13 利用Transwell细胞培养皿进行单核细胞ADE模型-HuVEC共培养 | 第90-91页 |
1.14 免疫荧光染色检测HuVEC表面的补体膜攻击复合物C5b-9 | 第91页 |
1.15 伊红染色显示与单核细胞ADE模型共培养后HuVEC细胞骨架改变 | 第91-92页 |
2 结果 | 第92-100页 |
2.1 流式细胞术鉴定磁珠阴性分选的单核细胞纯度 | 第92页 |
2.2 单核细胞最适培养条件 | 第92-94页 |
2.3 利用人外周血单核细胞建立抗体依赖增强感染模型 | 第94-96页 |
2.4 C3a、C5a、IL-10含量检测 | 第96-97页 |
2.5 利用单核细胞ADE模型进行免疫共沉淀 | 第97-98页 |
2.6 目标蛋白的质谱鉴定 | 第98-99页 |
2.7 Western Blot验证质谱鉴定结果 | 第99页 |
2.8 免疫荧光染色检测HuVEC表面的补体膜攻击复合物C5b-9 | 第99-100页 |
2.9 伊红染色检测HuVEC的细胞骨架改变 | 第100页 |
讨论 | 第100-103页 |
全文总结 | 第103-112页 |
参考文献 | 第112-119页 |
附录 | 第119-125页 |
致谢 | 第125-126页 |
个人简历 | 第126-129页 |