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弓形虫感染对小鼠、猪脾肝基因表达的影响

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 引言第14-25页
    1.1 弓形虫及弓形虫病概述第14-16页
    1.2 生物信息学研究进展第16-19页
    1.3 弓形虫感染后宿主转录组变化的研究进展第19-21页
    1.4 弓形虫感染后宿主miRNA变化的研究进展第21-22页
    1.5 弓形虫感染后宿主蛋白质组变化的研究进展第22-23页
    1.6 总结与展望第23-25页
第二章 弓形虫感染对小鼠脾脏转录组的影响第25-44页
    2.1 材料与方法第25-28页
        2.1.1 实验动物和虫株第25页
        2.1.2 仪器设备和试剂第25页
        2.1.3 样品处理及收集第25页
        2.1.4 脾脏DNA提取和弓形虫感染鉴定第25-26页
        2.1.5 RNA提取和质量鉴定第26页
        2.1.6 转录组测序和基因组比对第26页
        2.1.7 差异表达基因的鉴定及其生物信息学分析第26-27页
        2.1.8 高通量测序的荧光定量PCR验证第27-28页
    2.2 结果第28-37页
        2.2.1 弓形虫在昆明鼠脾脏中的感染鉴定及RNA质量检测第28页
        2.2.2 高通量测序检测及Q-PCR结果第28-29页
        2.2.3 GO和KEGG分析第29-32页
        2.2.4 脾脏细胞器组分分析第32-37页
        2.2.5 差异转录本的转录因子分析第37页
    2.3 讨论第37-44页
        2.3.1 弓形虫感染后脾脏的细胞因子及其受体变化影响第37-39页
        2.3.2 脾脏先天免疫通路在弓形虫感染中的变化第39页
        2.3.3 弓形虫感染对脾脏线粒体的影响第39-40页
        2.3.4 弓形虫感染对脾脏细胞骨架组分的影响第40-41页
        2.3.5 弓形虫感染对脾脏内吞溶酶体组分的影响第41-42页
        2.3.6 弓形虫感染对脾脏高尔基体组分的影响第42页
        2.3.7 弓形虫感染对脾脏内质网组分的影响第42-43页
        2.3.8 脾脏差异转录本的转录因子分析第43-44页
第三章 弓形虫感染对小鼠脾脏mi RNA表达的影响第44-53页
    3.1 材料与方法第44-47页
        3.1.1 实验动物和虫株第44页
        3.1.2 仪器设备和试剂第44页
        3.1.3 样品处理及收集第44页
        3.1.4 脾脏DNA提取和弓形虫感染鉴定第44-45页
        3.1.5 RNA提取和质量鉴定第45页
        3.1.6 高通量测序和生物信息学分析第45页
        3.1.7 荧光定量PCR验证第45-47页
    3.2 结果第47-50页
        3.2.1 弓形虫在昆明鼠脾脏中的感染鉴定及RNA质量检测第47页
        3.2.2 高通量测序检测及茎环定量反转录PCR结果第47-49页
        3.2.3 miRNA靶基因的生物信息学分析第49-50页
    3.3 讨论第50-53页
第四章 弓形虫感染对小鼠肝脏蛋白组的影响第53-63页
    4.1 材料与方法第53-55页
        4.1.1 实验动物和虫株第53页
        4.1.2 实验设计及样品采集第53页
        4.1.3 肝脏蛋白质提取第53-54页
        4.1.4 iTRAQ标记和SCX分馏第54页
        4.1.5 LC-ESI-MS/MS分析第54页
        4.1.6 肝脏蛋白组数据分析第54-55页
    4.2 结果第55-59页
        4.2.1 弓形虫在肝脏中的感染第55页
        4.2.2 肝脏iTRAQ检测结果第55-57页
        4.2.3 肝脏细胞器组分分析第57-58页
        4.2.4 肝脏比较毒理基因组学分析第58-59页
        4.2.5 肝脏差异蛋白的转录因子富集分析第59页
    4.3 讨论第59-63页
        4.3.1 肝脏的免疫反应分析第59-60页
        4.3.2 肝脏差异蛋白的转录因子和信号通路分析第60页
        4.3.3 弓形虫感染对肝细胞结构影响第60-61页
        4.3.4 弓形虫感染对肝解毒功能的影响第61-63页
第五章 弓形虫感染对小鼠肝脏转录组的影响第63-76页
    5.1 材料与方法第63-65页
        5.1.1 实验动物和虫株第63页
        5.1.2 肝脏转录组实验设计及样品采集第63页
        5.1.3 肝脏组织病理学分析和肝功能分析第63-64页
        5.1.4 肝脏DNA提取和弓形虫感染鉴定第64页
        5.1.5 肝脏RNA提取及RNA质量鉴定第64页
        5.1.6 肝脏转录组测序和基因组比对第64页
        5.1.7 肝脏差异转录本的鉴定第64页
        5.1.8 高通量测序的荧光定量PCR验证第64-65页
        5.1.9 差异转录本的生物信息学分析以及与蛋白组数据关联分析第65页
    5.2 结果第65-71页
        5.2.1 肝脏弓形虫感染的检测结果第65页
        5.2.2 肝脏RNA检测、转录组测序结果和验证第65-68页
        5.2.3 肝脏比较毒理基因组学分析第68页
        5.2.4 肝脏组织病理学及肝功能检测第68-70页
        5.2.5 肝脏差异转录本的转录因子分析第70页
        5.2.6 肝脏转录组和蛋白质的关联性分析第70-71页
    5.3 讨论第71-76页
        5.3.1 弓形虫感染中肝脏的炎症反应及病理学变化第71-72页
        5.3.2 弓形虫感染对肝脏胆汁合成代谢的影响第72-74页
        5.3.3 肝脏毒理基因组学分析第74页
        5.3.4 肝脏基因表达调控分析第74-76页
第六章 弓形虫感染对猪脾脏和肝脏转录组的影响第76-92页
    6.1 材料与方法第76-80页
        6.1.1 实验动物和虫株第76页
        6.1.2 仪器设备和试剂第76页
        6.1.3 卵囊制备第76-77页
        6.1.4 实验设计及样品采集第77-78页
        6.1.5 组织和卵囊DNA提取及弓形虫在肝脏和脾脏中的感染鉴定第78页
        6.1.6 RNA提取及RNA质量鉴定第78页
        6.1.7 转录组测序和基因组比对第78页
        6.1.8 差异表达转录本的鉴定第78页
        6.1.9 生物信息学分析第78页
        6.1.10 组织病理学分析第78-79页
        6.1.11 RNA-seq测序结果的荧光定量PCR验证第79-80页
    6.2 结果第80-89页
        6.2.1 弓形虫卵囊收集第80页
        6.2.2 弓形虫感染的检测及猪感染弓形虫后的体温变化第80-81页
        6.2.3 RNA检测及转录组测序结果分析第81-85页
        6.2.4 细胞因子表达变化分析第85-86页
        6.2.5 比较毒理基因组学分析第86-87页
        6.2.6 RNA-seq测序结果的荧光定量PCR验证第87页
        6.2.7 组织病理学变化第87-89页
    6.3 讨论第89-92页
        6.3.1 转录组数据的富集分析第89-90页
        6.3.2 细胞因子反应第90-91页
        6.3.3 比较毒理基因组学分析第91-92页
第七章 全文结论第92-93页
参考文献第93-106页
致谢第106-107页
作者简介第107页

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