| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1.1 研究背景 | 第13-14页 |
| 1.2 ACSL1基因研究进展 | 第14-20页 |
| 1.2.1 ACSL促进脂肪酸跨膜转运 | 第14-15页 |
| 1.2.2 ACSL1参与脂肪组织中脂肪酸的代谢 | 第15-16页 |
| 1.2.3 ACSL1参与骨骼肌中脂肪酸的代谢 | 第16页 |
| 1.2.4 ACSL1基因转录调控研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.5 ACSL1基因的QTL分析及鉴定 | 第17-18页 |
| 1.2.6 ACSL1基因影响牛骨骼肌中脂肪酸的组成 | 第18-19页 |
| 1.2.7 FATP1基因影响牛骨骼肌中脂肪酸的组成 | 第19-20页 |
| 1.3 脂肪细胞分化的生物学规律 | 第20-22页 |
| 1.3.1 前脂肪细胞分化早期脂肪生成转录因子聚集 | 第20-22页 |
| 1.4 脂肪分化相关转录因子 | 第22-29页 |
| 1.4.1 KLFs | 第22-25页 |
| 1.4.2 C/EBPβ | 第25页 |
| 1.4.3 E2Fs | 第25-27页 |
| 1.4.4 Sps | 第27-28页 |
| 1.4.5 DNA甲基化对转录调控的作用 | 第28-29页 |
| 1.5 真核生物转录调控及其启动子技术研究进展 | 第29-32页 |
| 1.5.1 真核生物转录水平调控 | 第29-30页 |
| 1.5.2 启动子转录起始位点确定 | 第30-31页 |
| 1.5.3 启动子活性分析 | 第31-32页 |
| 1.6 本研究目的和意义 | 第32-33页 |
| 第二章 ACSL1基因转录起始位点确定及组织表达分析 | 第33-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-40页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第33页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第33-36页 |
| 2.1.3 ACSL1基因转录起始位点确定 | 第36-40页 |
| 2.2 试验结果 | 第40-43页 |
| 2.2.1 组织样总RNA电泳检测 | 第40页 |
| 2.2.2 Real-time PCR引物检测 | 第40-41页 |
| 2.2.3 ACSL1基因组织表达谱分析 | 第41页 |
| 2.2.4 ACSL1基因 5'末端克隆及测序 | 第41-43页 |
| 2.3 讨论 | 第43-44页 |
| 2.4 小结 | 第44-45页 |
| 第三章 ACSL1基因启动子克隆分析 | 第45-60页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-52页 |
| 3.1.1 菌种、载体和细胞系 | 第45页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第45-46页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第46页 |
| 3.1.4 ACSL1基因启动子克隆 | 第46-52页 |
| 3.2 结果 | 第52-57页 |
| 3.2.1 ACSL1基因启动子扩增 | 第52-53页 |
| 3.2.2 ACSL1基因启动子生物信息学分析 | 第53页 |
| 3.2.3 ACSL1基因启动子缺失体报告载体构建 | 第53-54页 |
| 3.2.4 细胞转染条件优化 | 第54-55页 |
| 3.2.5 ACSL1缺失片段启动子活性检测 | 第55-56页 |
| 3.2.6 ACSL1基因序列同源性分析 | 第56页 |
| 3.2.7 ACSL1基因系统进化树 | 第56页 |
| 3.2.8 ACSL1跨膜螺旋拓扑结构及三级结构 | 第56-57页 |
| 3.3 讨论 | 第57-59页 |
| 3.4 小结 | 第59-60页 |
| 第四章 E2F1、SP1、KLF15和E2F4转录因子鉴定 | 第60-79页 |
| 4.1 材料与方法 | 第60-68页 |
| 4.1.1 菌种、载体和细胞系 | 第60页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第60页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第60页 |
| 4.1.4 ACSL1基因启动子转录因子预测 | 第60页 |
| 4.1.5 定点突变及报告基因载体构建 | 第60-63页 |
| 4.1.6 荧光素酶活性分析 | 第63页 |
| 4.1.7 凝胶阻滞实验 | 第63-68页 |
| 4.1.8 RNA干扰实验 | 第68页 |
| 4.2 结果 | 第68-76页 |
| 4.2.1 ACSL1基因启动子转录因子预测结果 | 第68-69页 |
| 4.2.2 E2F1、SP1、KLF15和E2F4维持ACSL1启动子基本转录活性 | 第69-70页 |
| 4.2.3 ACSL1启动子区不同物种间序列同源性比对分析 | 第70-71页 |
| 4.2.4 敲低E2F1、SP1、KLF15和E2F4表达抑制ACSL1基因启动子活性 | 第71-73页 |
| 4.2.5 E2F1、SP1、KLF15和E2F4特异结ACSL1基因启动子 | 第73-76页 |
| 4.3 讨论 | 第76-78页 |
| 4.4 小结 | 第78-79页 |
| 第五章 研究结论与创新点 | 第79-80页 |
| 5.1 试验结论 | 第79页 |
| 5.2 创新点 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 作者简介 | 第92-93页 |
