摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
英文缩略表(Abbreviation) | 第12-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-31页 |
第一章 日本脑炎病毒综述 | 第13-31页 |
1 JEV的病原学特征研究 | 第13-14页 |
1.1 JEV的发现与分类地位 | 第13页 |
1.2 JEV的理化特性 | 第13-14页 |
1.3 JEV的增殖特性 | 第14页 |
2 JEV的病毒学特性 | 第14-16页 |
2.1 JEV的基因组成 | 第14-15页 |
2.2 JEV的基因型 | 第15-16页 |
3 JEV流行病学研究 | 第16-17页 |
3.1 JEV流行病学特征 | 第16页 |
3.2 JEV的流行地区 | 第16-17页 |
4 JE的感染与发生 | 第17-19页 |
4.1 JEV的复制周期 | 第17-18页 |
4.2 JEV的发病机制 | 第18-19页 |
4.3 临床表现 | 第19页 |
5 JEV感染的诊断技术 | 第19-20页 |
6 JE的综合防控研究 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-31页 |
第二篇 试验部分 | 第31-67页 |
第二章 日木脑炎病毒囊膜蛋白单克隆抗体的制备及特性分析 | 第31-45页 |
1 材料与方法 | 第33-35页 |
1.1 病毒株、菌株、细胞与实验动物 | 第33页 |
1.2 主要试剂 | 第33页 |
1.3 单克隆抗体的制备 | 第33-34页 |
1.4 单克隆抗体特性的鉴定 | 第34-35页 |
1.5 单抗的ELISA相加试验 | 第35页 |
2 结果 | 第35-41页 |
2.1 免疫抗原JEV Cap-ED3蛋白的表达与纯化 | 第35-36页 |
2.2 JEV囊膜蛋白单克隆抗体的制备 | 第36-37页 |
2.3 Western-blotting鉴定4株单抗均可识别JEV囊膜蛋白 | 第37-38页 |
2.4 4株单克隆抗体在IFA中均识别JEV | 第38页 |
2.5 空斑减少中和试验(PRNT)测定4株单克隆抗体均无JEV中和活性 | 第38-40页 |
2.6 相加ELISA测定4株单抗识别的抗原表位的差异 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
第三章 检测日本脑炎病毒抗体阻断ELISA的建立与评估 | 第45-67页 |
1 材料与方法 | 第47-50页 |
1.1 病毒、菌株、抗体、细胞及试剂 | 第47页 |
1.2 抗原蛋白的制备 | 第47页 |
1.3 单克隆抗体的纯化及辣根过氧化物酶标记 | 第47-48页 |
1.4 阻断ELISA步骤 | 第48页 |
1.5 阻断ELISA最佳反应条件的选择 | 第48页 |
1.6 阻断ELISA临界值的确定 | 第48-49页 |
1.7 阻断ELISA与间接ELISA的对比试验 | 第49页 |
1.8 阻断ELISA重复性试验 | 第49页 |
1.9 临床血清样品的检测 | 第49页 |
1.10 血清中和试验 | 第49页 |
1.11 JEV单抗与DTMUV的交叉反应 | 第49-50页 |
2 结果 | 第50-62页 |
2.1 单克隆抗体的纯化和辣根过氧化物酶标记 | 第50页 |
2.2 阻断ELISA反应条件的确定 | 第50页 |
2.3 阻断ELISA临界值的确定 | 第50页 |
2.4 间接ELISA与阻断ELISA的符合性试验 | 第50-51页 |
2.5 重复性试验 | 第51页 |
2.6 临床血清样品的检测 | 第51-53页 |
2.7 对JEV的血清中和试验 | 第53-56页 |
2.8 对DTMUV的血清中和试验 | 第56-59页 |
2.9 JEV ED3蛋白与DTMUV ED3蛋白氨基酸序列分析 | 第59-61页 |
2.10 单抗5F9识别的JEV抗原表位与DTMUV有交叉反应 | 第61-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-67页 |
全文总结 | 第67-69页 |
附录 常用试剂的配制 | 第69-71页 |
致谢 | 第71页 |