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检测日本脑炎病毒抗体阻断ELISA的建立与评价

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
英文缩略表(Abbreviation)第12-13页
第一篇 文献综述第13-31页
    第一章 日本脑炎病毒综述第13-31页
        1 JEV的病原学特征研究第13-14页
            1.1 JEV的发现与分类地位第13页
            1.2 JEV的理化特性第13-14页
            1.3 JEV的增殖特性第14页
        2 JEV的病毒学特性第14-16页
            2.1 JEV的基因组成第14-15页
            2.2 JEV的基因型第15-16页
        3 JEV流行病学研究第16-17页
            3.1 JEV流行病学特征第16页
            3.2 JEV的流行地区第16-17页
        4 JE的感染与发生第17-19页
            4.1 JEV的复制周期第17-18页
            4.2 JEV的发病机制第18-19页
            4.3 临床表现第19页
        5 JEV感染的诊断技术第19-20页
        6 JE的综合防控研究第20-21页
        参考文献第21-31页
第二篇 试验部分第31-67页
    第二章 日木脑炎病毒囊膜蛋白单克隆抗体的制备及特性分析第31-45页
        1 材料与方法第33-35页
            1.1 病毒株、菌株、细胞与实验动物第33页
            1.2 主要试剂第33页
            1.3 单克隆抗体的制备第33-34页
            1.4 单克隆抗体特性的鉴定第34-35页
            1.5 单抗的ELISA相加试验第35页
        2 结果第35-41页
            2.1 免疫抗原JEV Cap-ED3蛋白的表达与纯化第35-36页
            2.2 JEV囊膜蛋白单克隆抗体的制备第36-37页
            2.3 Western-blotting鉴定4株单抗均可识别JEV囊膜蛋白第37-38页
            2.4 4株单克隆抗体在IFA中均识别JEV第38页
            2.5 空斑减少中和试验(PRNT)测定4株单克隆抗体均无JEV中和活性第38-40页
            2.6 相加ELISA测定4株单抗识别的抗原表位的差异第40-41页
        3 讨论第41-42页
        参考文献第42-45页
    第三章 检测日本脑炎病毒抗体阻断ELISA的建立与评估第45-67页
        1 材料与方法第47-50页
            1.1 病毒、菌株、抗体、细胞及试剂第47页
            1.2 抗原蛋白的制备第47页
            1.3 单克隆抗体的纯化及辣根过氧化物酶标记第47-48页
            1.4 阻断ELISA步骤第48页
            1.5 阻断ELISA最佳反应条件的选择第48页
            1.6 阻断ELISA临界值的确定第48-49页
            1.7 阻断ELISA与间接ELISA的对比试验第49页
            1.8 阻断ELISA重复性试验第49页
            1.9 临床血清样品的检测第49页
            1.10 血清中和试验第49页
            1.11 JEV单抗与DTMUV的交叉反应第49-50页
        2 结果第50-62页
            2.1 单克隆抗体的纯化和辣根过氧化物酶标记第50页
            2.2 阻断ELISA反应条件的确定第50页
            2.3 阻断ELISA临界值的确定第50页
            2.4 间接ELISA与阻断ELISA的符合性试验第50-51页
            2.5 重复性试验第51页
            2.6 临床血清样品的检测第51-53页
            2.7 对JEV的血清中和试验第53-56页
            2.8 对DTMUV的血清中和试验第56-59页
            2.9 JEV ED3蛋白与DTMUV ED3蛋白氨基酸序列分析第59-61页
            2.10 单抗5F9识别的JEV抗原表位与DTMUV有交叉反应第61-62页
        3 讨论第62-64页
        参考文献第64-67页
全文总结第67-69页
附录 常用试剂的配制第69-71页
致谢第71页

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