摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一部分 文献综述 | 第12-18页 |
第一章 前言 | 第12-18页 |
1 罗非鱼简介 | 第12-13页 |
2 FAS、CAT基因的研究进展 | 第13-15页 |
2.1 FAS的研究进展 | 第13-14页 |
2.1.1 FAS基因的研究进展 | 第13页 |
2.1.2 FAS蛋白的研究进展 | 第13-14页 |
2.2 CAT的研究进展 | 第14-15页 |
2.2.1 CAT基因的研究进展 | 第14页 |
2.2.2 CAT蛋白的研究进展 | 第14-15页 |
3 各因素对脂肪代谢及抗氧化的影响 | 第15-16页 |
3.1 饲料脂肪水平对脂肪代谢及抗氧化影响的相关研究 | 第15页 |
3.2 饲料胆碱水平对脂肪代谢及抗氧化影响的相关研究 | 第15-16页 |
3.3 投饲频率、投饲水平对脂肪代谢及抗氧化影响的相关研究 | 第16页 |
4 本研究的目的及意义 | 第16-18页 |
第二部分 试验研究 | 第18-88页 |
第二章 吉富罗非鱼FAS、CAT基因cDNA全长的克隆与分析 | 第18-76页 |
1 材料与方法 | 第19-29页 |
1.1 材料 | 第19-22页 |
1.1.1 试验鱼、组织、菌株与质粒 | 第19页 |
1.1.2 实验试剂及药品 | 第19页 |
1.1.3 实验仪器 | 第19-20页 |
1.1.4 实验自备试剂及其制备 | 第20-21页 |
1.1.5 引物设计及合成 | 第21-22页 |
1.1.6 生物信息学分析所用软件及网站 | 第22页 |
1.2 方法 | 第22-29页 |
1.2.1 吉富罗非鱼肝脏组织cDNA模板的合成 | 第22-23页 |
1.2.2 FAS、CAT中间片段的扩增 | 第23-24页 |
1.2.3 目的片段的胶回收、TA克隆以及鉴定 | 第24-26页 |
1.2.4 吉富罗非鱼FAS、CAT基因的5'、3'末端cDNA的快速扩增 | 第26-29页 |
1.2.5 FAS、CAT的序列及生物信息学分析 | 第29页 |
2 结果 | 第29-72页 |
2.1 总RNA的提取 | 第29-30页 |
2.2 吉富罗非鱼FAS、CAT基因cDNA全长的扩增 | 第30-31页 |
2.2.1 吉富罗非鱼FAS、CAT cDNA中间片段的扩增 | 第30-31页 |
2.2.2 吉富罗非鱼FAS、CAT基因5'RACE、3'RACE的扩增 | 第31页 |
2.3 吉富罗非鱼FAS、CAT基因的序列分析 | 第31-72页 |
2.3.1 吉富罗非鱼FAS及CAT全长cNDA的获得与分析 | 第31-41页 |
2.3.2 吉富罗非鱼FAS、CAT基因的同源性分析 | 第41-64页 |
2.3.3 吉富罗非鱼FAS、CAT基因系统进化树的构建 | 第64-66页 |
2.3.4 吉富罗非鱼FAS、CAT基因生物信息学的分析 | 第66-72页 |
3 讨论 | 第72-76页 |
3.1 吉富罗非鱼Total RNA的提取 | 第72-73页 |
3.2 PCR引物的设计及扩增条件的优化 | 第73页 |
3.3 吉富罗非鱼FAS、CAT基因及推导蛋白的分析 | 第73-75页 |
3.3.1 吉富罗非鱼FAS基因及推导蛋白的分析 | 第73-74页 |
3.3.2 吉富罗非鱼CAT基因及推导蛋白的分析 | 第74-75页 |
3.4 系统进化分析 | 第75-76页 |
第三章 饲料脂肪和胆碱水平对吉富罗非鱼肝脏FAS基因、CAT基因表达量的影响 | 第76-82页 |
1 材料与方法 | 第76-78页 |
1.1 材料 | 第76-77页 |
1.1.1 实验鱼及肝脏 | 第76-77页 |
1.1.2 实验试剂及药品 | 第77页 |
1.1.3 试验所用仪器 | 第77页 |
1.1.4 引物的设计与合成 | 第77页 |
1.2 方法 | 第77-78页 |
1.2.1 各个组肝脏Total RNA的提取和cDNA的制备 | 第77页 |
1.2.2 qRT-PCR的反应体系 | 第77-78页 |
1.2.3 qRT-PCR的反应条件 | 第78页 |
1.2.4 数据统计及分析 | 第78页 |
2 结果 | 第78-80页 |
2.1 饲料脂肪和胆碱水平对吉富罗非鱼FAS基因表达量的影响 | 第78-79页 |
2.2 饲料脂肪和胆碱水平对吉富罗非鱼CAT基因表达量的影响 | 第79-80页 |
3 讨论 | 第80-82页 |
第四章 投喂频率和投喂水平对吉富罗非鱼肝脏FAS基因、CAT基因表达量的影响 | 第82-87页 |
1 材料与方法 | 第82-83页 |
1.1 材料 | 第82-83页 |
1.1.1 实验鱼及肝脏 | 第82-83页 |
1.1.2 实验试剂及药品 | 第83页 |
1.1.3 试验所用仪器 | 第83页 |
1.1.4 引物的设计与合成 | 第83页 |
1.2 方法 | 第83页 |
2 结果 | 第83-85页 |
2.1 投喂频率和投喂水平对吉富罗非鱼FAS基因表达量的影响 | 第83-84页 |
2.2 投喂频率和投喂水平对吉富罗非鱼CAT基因表达量的影响 | 第84-85页 |
3 讨论 | 第85-87页 |
第五章 结论 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-94页 |
附录 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第96页 |