| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-33页 |
| 第一节 鱼类免疫系统研究概述 | 第16-17页 |
| 第二节 鱼类抗氧化机制研究概述 | 第17-21页 |
| 第三节 硫氧还蛋白基因研究进展 | 第21-26页 |
| 1.3.1 硫氧还蛋白的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.3.2 硫氧还蛋白基因家族的生物学功能 | 第24-26页 |
| 第四节 硫氧还蛋白相关蛋白TRP14的研究进展 | 第26-27页 |
| 第五节 硫氧还蛋白过氧化物酶Prx的研究进展 | 第27-29页 |
| 第六节 鱼类细胞培养研究进展 | 第29-31页 |
| 第七节 本论文研究的方法、意义 | 第31-33页 |
| 1.7.1 本研究的方法 | 第31-32页 |
| 1.7.2 本研究的意义 | 第32-33页 |
| 第二章 PoTrx1和PoTRP14基因的克隆 | 第33-57页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 材料方法 | 第33-47页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第33-36页 |
| 2.2.1.1 实验动物和取材 | 第33-34页 |
| 2.2.1.2 实验试剂和药品 | 第34页 |
| 2.2.1.3 实验仪器设备 | 第34-35页 |
| 2.2.1.4 主要试剂及配置方法 | 第35-36页 |
| 2.2.2 实验中的引物 | 第36-37页 |
| 2.2.3 总RNA的提取和纯化 | 第37-39页 |
| 2.2.3.1 总RNA的提取 | 第37-38页 |
| 2.2.3.2 总RNA的纯化 | 第38-39页 |
| 2.2.4 cDNA第一链的合成 | 第39-40页 |
| 2.2.5 PoTrx1基因和PoTRP14基因核心片段的获得 | 第40-42页 |
| 2.2.5.1 PoTrx1基因和PoTRP14基因核心片段的克隆 | 第40页 |
| 2.2.5.2 PCR产物的回收和纯化 | 第40-41页 |
| 2.2.5.3 连接反应 | 第41页 |
| 2.2.5.4 感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第41-42页 |
| 2.2.5.5 连接产物的转化和阳性克隆的筛选 | 第42页 |
| 2.2.6 PoTrx1基因和PoTRP14基因3’UTR片段的获得 | 第42-45页 |
| 2.2.6.1 3’cDNA的合成 | 第44页 |
| 2.2.6.2 3’RACE半巢式PCR | 第44-45页 |
| 2.2.7 PoTrx1基因和PoTRPl4基因5'UTR片段的获得 | 第45-47页 |
| 2.2.7.1 5’cDNA的合成 | 第46页 |
| 2.2.7.2 5’RACE半巢式PCR | 第46-47页 |
| 2.2.8 PoTrx1基因和PoTRP14基因的序列分析、同源比对和进化树构建 | 第47页 |
| 2.3 实验结果 | 第47-55页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第47-48页 |
| 2.3.2 PoTrx1和PoTRP14基因全长cDNA序列的获得 | 第48-50页 |
| 2.3.3 PoTrx1和PoTRP14基因同源性分析 | 第50-53页 |
| 2.3.4 PoTrx1和PoTRP14基因进化树的构建 | 第53-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-57页 |
| 第三章 PoTrx1和PoTRP14基因表达分析 | 第57-71页 |
| 3.1 引言 | 第57页 |
| 3.2 实验方法 | 第57-62页 |
| 3.2.1 cDNA制备 | 第57-58页 |
| 3.2.2 实时荧光定量Real-time PCR | 第58-60页 |
| 3.2.2.1 RT-PCR实验简介 | 第58-59页 |
| 3.2.2.2 RT-PCR反应步骤 | 第59-60页 |
| 3.2.2.3 数据处理 | 第60页 |
| 3.2.3 免疫刺激后PoTrx1基因和PoTRP14基因的表达模式 | 第60-62页 |
| 3.2.3.1 褐牙鲆肝脏原代细胞培养系统的建立(酶消化法) | 第60-61页 |
| 3.2.3.2 LPS、CuSO_4和H_2O_2刺激褐牙鲆肝细胞 | 第61页 |
| 3.2.3.3 mRNA的提取和反转录 | 第61页 |
| 3.2.3.4 LPS、CuSO_4和H_2O_2刺激褐牙鲆肝脏细胞后PoTrx1基因和PoTRP14基因的表达模式 | 第61-62页 |
| 3.3 实验结果 | 第62-67页 |
| 3.3.1 PoTrx1的组织差异性表达 | 第62-63页 |
| 3.3.2 PoTRP14的组织差异性表达 | 第63页 |
| 3.3.3 PoTrx1不同发育时期表达差异 | 第63-64页 |
| 3.3.4 PoTRP14不同发育时期表达差异 | 第64-65页 |
| 3.3.5 免疫刺激前后PoTrx1基因的表达模式 | 第65-66页 |
| 3.3.6 免疫刺激前后PoTRP14基因的表达模式 | 第66-67页 |
| 3.4 讨论 | 第67-71页 |
| 第四章 PoPrx1基因免疫刺激后表达模式 | 第71-74页 |
| 4.1 引言 | 第71页 |
| 4.2 实验方法 | 第71-72页 |
| 4.2.1 mRNA的提取和反转录 | 第71页 |
| 4.2.2 LPS、CuSO_4和H_2O_2刺激褐牙鲆肝脏细胞后PoPrx1基因表达模式 | 第71-72页 |
| 4.3 实验结果 | 第72-73页 |
| 4.4 讨论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 个人简历 | 第84-85页 |
| 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第85页 |
