| 论文创新点 | 第5-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第13-53页 |
| 1.1 引言 | 第13-14页 |
| 1.2 纳米材料的生物合成 | 第14-35页 |
| 1.2.1 自然界进化产生的纳米材料生物合成体系 | 第14-19页 |
| 1.2.1.1 硅藻中的生物硅化 | 第15-17页 |
| 1.2.1.2 趋磁细菌中的磁小体 | 第17-19页 |
| 1.2.2 基于噬菌体展示技术的纳米材料合成及自组装体系 | 第19-22页 |
| 1.2.3 利用单一代谢途径实现的活细胞合成纳米材料 | 第22-28页 |
| 1.2.3.1 单一代谢途径实现的贵金属纳米颗粒生物合成 | 第22-25页 |
| 1.2.3.2 单一代谢途径实现的半导体纳米颗粒生物合成 | 第25-28页 |
| 1.2.4 以“时-空耦合策略”为指导的活细胞合成CdSe量子点 | 第28-31页 |
| 1.2.5 不同纳米材料生物合成体系的优势和问题 | 第31-35页 |
| 1.2.5.1 生物矿化的优势和问题 | 第32-33页 |
| 1.2.5.2 基于噬菌体展示技术的纳米材料合成及自组装体系的优势和问题 | 第33-34页 |
| 1.2.5.3 单一代谢途径实现的纳米材料合成体系的优势和问题 | 第34-35页 |
| 1.2.5.4 酿酒酵母细胞合成荧光CdSe量子点的优势和问题 | 第35页 |
| 1.3 酵母细胞合成CdSe量子点机理研究的意义 | 第35-38页 |
| 1.4 酿酒酵母的研究技术 | 第38-42页 |
| 1.4.1 酿酒酵母研究中的基因敲除和修饰技术 | 第38-40页 |
| 1.4.2 酿酒酵母研究中的高通量技术 | 第40-41页 |
| 1.4.3 为酿酒酵母研究服务的生物信息学方法 | 第41-42页 |
| 1.5 本论文的出发点和主要工作 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-53页 |
| 第2章 CdSe量子点生物合成机理研究方法的建立 | 第53-69页 |
| 2.1 引言 | 第53-54页 |
| 2.2 实验部分 | 第54-57页 |
| 2.2.1 实验菌株和培养基 | 第54页 |
| 2.2.2 试剂与仪器 | 第54-55页 |
| 2.2.3 生长曲线的测定 | 第55页 |
| 2.2.4 CdSe量子点的生物合成 | 第55页 |
| 2.2.5 酵母原生质体的制备 | 第55-56页 |
| 2.2.6 细胞内CdSe量子点荧光强度的测定和荧光显微镜观察 | 第56页 |
| 2.2.7 总蛋白含量的测定 | 第56页 |
| 2.2.8 透射电子显微镜和动态光散射表征 | 第56-57页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第57-66页 |
| 2.3.1 培养基对CdSe量子点生物合成的影响 | 第57-58页 |
| 2.3.2 酵母生长时期对CdSe量子点生物合成的影响 | 第58-60页 |
| 2.3.3 生物合成合成CdSe量子点的提取和纯化方法 | 第60-66页 |
| 2.3.3.1 细胞裂解方法的优化 | 第60-63页 |
| 2.3.3.2 细胞裂解液中CdSe量子点的分散和稳定 | 第63-65页 |
| 2.3.3.3 优化后的生物合成CdSe量子点的提取和纯化方法 | 第65-66页 |
| 2.4 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 第3章 细胞内CdSe量子点的稳定化及其生物合成的能量基础 | 第69-94页 |
| 3.1 引言 | 第69页 |
| 3.2 实验部分 | 第69-75页 |
| 3.2.1 实验菌株和培养基 | 第69-70页 |
| 3.2.2 质粒DNA和引物序列 | 第70-71页 |
| 3.2.3 试剂与仪器 | 第71页 |
| 3.2.4 菌株构建 | 第71-72页 |
| 3.2.5 CdSe量子点的生物合成 | 第72-73页 |
| 3.2.6 生物合成CdSe量子点的提取、纯化和表征 | 第73页 |
| 3.2.7 生物合成CdSe量子点的酶处理 | 第73页 |
| 3.2.8 细胞内CdSe量子点荧光强度的测定和荧光显微镜观察 | 第73页 |
| 3.2.9 蛋白质电泳,Western blot和免疫共沉淀实验 | 第73-74页 |
| 3.2.10 硒代氨基酸的检测 | 第74-75页 |
| 3.2.11 细胞内ATP含量的检测 | 第75页 |
| 3.2.12 质谱实验及其生物信息学分析 | 第75页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第75-90页 |
| 3.3.1 生物合成CdSe量子点的表征 | 第75-79页 |
| 3.3.2 生物合成CdSe量子点的表面蛋白质组成 | 第79-80页 |
| 3.3.3 核糖体蛋白在CdSe量子点生物合成中的作用 | 第80-84页 |
| 3.3.4 CdSe量子点生物合成中的能量基础 | 第84-85页 |
| 3.3.5 生物能在“时-空耦合策略”中的作用机制 | 第85-90页 |
| 3.4 结论 | 第90页 |
| 参考文献 | 第90-94页 |
| 第4章 机理导向的细胞内CdSe量子点合成的调控 | 第94-128页 |
| 4.1 引言 | 第94-95页 |
| 4.2 实验部分 | 第95-106页 |
| 4.2.1 实验菌株和培养基 | 第95-96页 |
| 4.2.2 质粒DNA和引物序列 | 第96-98页 |
| 4.2.3 试剂与仪器 | 第98-99页 |
| 4.2.4 菌株构建 | 第99-102页 |
| 4.2.4.1 △gsh1gsh2双敲除菌株的构建 | 第99-101页 |
| 4.2.4.2 过表达菌株的构建 | 第101-102页 |
| 4.2.5 CdSe量子点的生物合成 | 第102页 |
| 4.2.6 细胞内CdSe量子点荧光强度的测定和荧光显微镜观察 | 第102页 |
| 4.2.7 细胞内CdSe量子点的提取和纯化 | 第102页 |
| 4.2.8 酵母细胞CdSe量子点合成产量的测定 | 第102-103页 |
| 4.2.9 酵母总RNA的提取,反转录和芯片实验 | 第103-104页 |
| 4.2.10 荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第104-105页 |
| 4.2.11 谷胱甘肽的检测 | 第105-106页 |
| 4.2.12 硒代氨基酸的检测 | 第106页 |
| 4.2.13 透射电子显微镜、高分辨透射电子显微镜和动态光散射表征 | 第106页 |
| 4.2.14 流式细胞检测 | 第106页 |
| 4.2.15 实验数据分析 | 第106页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第106-124页 |
| 4.3.1 CdSe量子点生物合成过程中的基因表达变化 | 第106-107页 |
| 4.3.2 CdSe量子点生物合成产率的代谢基础 | 第107-114页 |
| 4.3.3 谷胱甘肽代谢与“时-空耦合策略”的联系 | 第114-117页 |
| 4.3.4 谷胱甘肽代谢在“时-空耦合策略”中的调控机制 | 第117-118页 |
| 4.3.5 机理导向的胞内CdSe量子点合成的调控 | 第118-124页 |
| 4.4 结论 | 第124页 |
| 参考文献 | 第124-128页 |
| 研究总结与展望 | 第128-133页 |
| 一 研究总结 | 第128-130页 |
| 二 展望 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-133页 |
| 附录 攻读博士学位期间的研究成果 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
