| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第8-11页 |
| 1 绪论 | 第11-15页 |
| 1.1 杆状病毒简介 | 第11页 |
| 1.2 抗家蚕核型多角体病毒（BmNPV）研究现状及策略 | 第11-12页 |
| 1.3 胸腺素与抗病毒 | 第12-13页 |
| 1.4 研究依据 | 第13-15页 |
| 2 研究内容和方案设计 | 第15-17页 |
| 2.1 实验目的和意义 | 第15页 |
| 2.2 研究内容 | 第15-16页 |
| 2.3 技术路线 | 第16-17页 |
| 3 实验材料 | 第17-21页 |
| 3.1 细胞、质粒和菌株 | 第17页 |
| 3.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 3.3 主要仪器和耗材 | 第18页 |
| 3.4 主要溶液的配置 | 第18-20页 |
| 3.5 引物设计与合成 | 第20-21页 |
| 3.5.1 PCR引物设计与合成 | 第20页 |
| 3.5.2 qRT-PCR引物设计与合成 | 第20-21页 |
| 4 实验方法 | 第21-35页 |
| 4.1 质粒和重组杆状病毒的构建 | 第21-27页 |
| 4.1.1 过表达BmTHY质粒（p IEx1BmTHY）的构建 | 第21-23页 |
| 4.1.2 重组家蚕杆状病毒的构建 | 第23-27页 |
| 4.2 细胞培养 | 第27-28页 |
| 4.2.1 家蚕卵巢细胞的复苏 | 第27页 |
| 4.2.2 家蚕卵巢细胞的传代培养 | 第27页 |
| 4.2.3 细胞的冻存 | 第27-28页 |
| 4.3 细胞转染 | 第28页 |
| 4.3.1 重组载体p IEx1BmTHY的转染 | 第28页 |
| 4.3.2 BmTHY抑制siRNA的转染 | 第28页 |
| 4.4 MTT法测定细胞活力 | 第28-29页 |
| 4.5 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）测定基因表达量 | 第29-30页 |
| 4.5.1 细胞基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 4.5.2 qRT-PCR反应 | 第29-30页 |
| 4.5.3 荧光定量PCR数据分析 | 第30页 |
| 4.6 Western blotting测定蛋白表达量 | 第30-32页 |
| 4.6.1 制备样品 | 第30-31页 |
| 4.6.2 蛋白定量（BCA方法） | 第31页 |
| 4.6.3 SDS-PAGE电泳 | 第31-32页 |
| 4.6.4 转膜以及免疫反应 | 第32页 |
| 4.7 病毒感染以及病毒滴度测定 | 第32-33页 |
| 4.7.1 病毒感染 | 第32-33页 |
| 4.7.2 病毒滴度测定 | 第33页 |
| 4.8 免疫共沉淀（Co-IP） | 第33页 |
| 4.9 G-actin和F-actin的分离 | 第33-34页 |
| 4.10 F-actin的染色 | 第34页 |
| 4.11 数据处理及分析 | 第34-35页 |
| 5 实验结果与分析 | 第35-51页 |
| 5.1 BmTHY过表达体系的构建 | 第35-37页 |
| 5.1.1 重组载体p IEx1BmTHY的鉴定 | 第35-36页 |
| 5.1.2 BmTHY在BmN细胞中过表达的鉴定 | 第36-37页 |
| 5.2 BmTHY抑制表达体系的构建 | 第37-39页 |
| 5.2.1 最佳抑制效果siRNA的筛选 | 第37-38页 |
| 5.2.2 si-BmTHY抑制效果鉴定 | 第38-39页 |
| 5.3 重组病毒构建 | 第39-42页 |
| 5.3.1 重组载体pFastbac-RFP-VP39的鉴定 | 第39-40页 |
| 5.3.2 重组载体BmBacmid鉴定 | 第40-41页 |
| 5.3.3 细胞病变以及荧光观察 | 第41-42页 |
| 5.4 过表达和抑制表达BmTHY后对BmNPV增殖的影响 | 第42-43页 |
| 5.5 过表达和抑制表达BmTHY后对BmNPV病毒复制的影响 | 第43-45页 |
| 5.6 CO-IP分析BmTHY和actin在细胞内的互作关系 | 第45-46页 |
| 5.7 CO-IP分析BmTHY和 actin 在细胞内的互作关系 | 第46-47页 |
| 5.8 BmTHY 在感染 BmNPV 的细胞中对 F-actin 聚合的影响 | 第47-51页 |
| 6 讨论 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 研究生期间发表论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
