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IL23/Th17通路基因miR-SNPs与胃癌易感性关联分析及初步功能验证

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
英文缩略词表第17-18页
1 前言第18-21页
2 材料与方法第21-42页
    2.1 常用实验试剂第21-23页
    2.2 常用实验器材第23-24页
    2.3 所需实验试剂的配制第24-25页
    2.4 研究方法第25-42页
        2.4.1 研究对象第25-26页
        2.4.2 资料收集第26页
        2.4.3 血样采集第26页
        2.4.4 全血基因组DNA提取第26-27页
        2.4.5 SNP及micro RNA的选定第27-28页
        2.4.6 基因分型方法第28页
        2.4.7 SNPs引物设计和限制性内切酶的选择第28-29页
        2.4.8 PCR扩增和酶切反应的条件及基因型判定第29页
        2.4.9 细胞转染第29-31页
        2.4.10 RNA提取第31-32页
            2.4.10.1 细胞收集第31页
            2.4.10.2 RNA提取第31-32页
        2.4.11 蛋白提取第32页
        2.4.12 mi R-10a-3p及mi R-21 相对表达量的检测第32-35页
        2.4.13 IL17A及PTEN相对表达量的检测第35-37页
        2.4.14 Western-blot第37-38页
        2.4.15 双荧光素酶验证实验第38-39页
        2.4.16 质量控制第39-40页
        2.4.17 统计学分析第40-42页
3 结果第42-69页
    3.1 胃癌病例组和对照组的一般特征第42页
    3.2 基因型判定第42-50页
        3.2.1 电泳图谱结果第42-45页
        3.2.2 基因分型结果的质量控制第45-50页
    3.3 四个位点与胃癌遗传易感性关联分析第50-52页
    3.4 四个位点与胃癌遗传易感性关联的分层分析第52-54页
    3.5 IL17RA基因rs1468488和rs887796位点的单体型分析第54页
    3.6 突变位点数量分析第54-55页
    3.7 基因-环境的交互作用分析第55页
    3.8 细胞总RNA提取第55-56页
    3.9 mi R-21 相对表达量的检测第56-58页
    3.10 PTEN相对表达量的检测第58-59页
    3.11 mi R-10a-3p相对表达量的检测第59-61页
    3.12 IL17A相对表达量的检测第61-62页
    3.13 Western-blot检测SGC-7901 和BGC-823 细胞中PTEN蛋白的表达第62-64页
    3.14 Western-blot检测SGC-7901 和BGC-823 细胞中IL17A蛋白的表达第64-66页
    3.15 hsa-mi R-10a-3p靶基因的双荧光素酶验证实验第66-69页
        3.15.1 RT-PCR检测mi R-10a-3p本底表达情况第66-67页
        3.15.2 mi R-10a-3p靶基因的双荧光素酶验证第67-69页
4 讨论第69-74页
    4.1 IL23/Th17通路与胃癌第69页
    4.2 IL23/Th17通路相关基因mi R-SNPs与胃癌的关系第69-70页
    4.3 mi R-10a-3p靶基因IL17A的验证第70-73页
    4.4 本研究的优缺点第73-74页
5 结论第74-75页
6 参考文献第75-81页
综述 新型非编码RNA在肿瘤中作用的研究进展第81-95页
    参考文献第90-95页
个人简历及学术论文发表情况第95-96页
致谢第96页

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