缩略词表 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
前言 | 第11-27页 |
1. RLRs 介导的 I 型干扰素抗病毒信号通路 | 第11-17页 |
·RIG-I 样受体(RLRs) | 第12页 |
·MAVS 是 RLR 通路中关键的接头蛋白 | 第12-17页 |
2. NLRs 介导的炎症小体信号通路 | 第17-25页 |
·炎症小体简介 | 第17-19页 |
·ASC 是炎症小体信号通路中重要的接头蛋白 | 第19-22页 |
·炎症小体的激活 | 第22-25页 |
·炎症小体与疾病 | 第25页 |
3. 本课题研究的科学问题 | 第25-27页 |
材料与方法 | 第27-37页 |
1. 材料 | 第27-28页 |
·细胞株 | 第27页 |
·菌株与质粒 | 第27页 |
·常用试剂盒 | 第27页 |
·分子生物学及细胞生物学试剂 | 第27页 |
·抗体 | 第27-28页 |
·其它化学试剂 | 第28页 |
·主要实验仪器 | 第28页 |
2. 实验方法 | 第28-37页 |
·细胞总 RNA 的提取 | 第28-29页 |
·反转录 PCR | 第29页 |
·载体构建、引物合成及测序 | 第29页 |
·细胞培养、冻存和复苏 | 第29-30页 |
·真核细胞的转染 | 第30页 |
·GST-pull down | 第30-31页 |
·免疫印迹 | 第31页 |
·免疫沉淀 | 第31-32页 |
·免疫荧光 | 第32页 |
·核质分离 | 第32页 |
·线粒体分离 | 第32-33页 |
·ELISA | 第33页 |
·分子筛渗透层析 | 第33-34页 |
·小鼠 BMDC 的分离 | 第34页 |
·Caspase-1 活性检测 | 第34-37页 |
结果 | 第37-63页 |
1. MAVS 与 ASC 相互作用 | 第37-41页 |
·MAVS 与 ASC 在体内外相互作用 | 第37-39页 |
·MAVS 与 ASC 相互作用的结构域 | 第39-41页 |
2. MAVS 增强 ASC 的蛋白稳定性及其介导的 IL-1 水平 | 第41-45页 |
·MAVS 增强 ASC 介导的 IL-1 水平 | 第41-42页 |
·MAVS 增强 ASC 的蛋白稳定性 | 第42-45页 |
3. MAVS 通过 TRAF3 调控 ASC | 第45-51页 |
·TRAF3 增强 ASC 介导的 IL-1 水平 | 第45-46页 |
·TRAF3 催化 ASC 发生泛素化 | 第46-47页 |
·TRAF3 与 ASC 相互作用 | 第47-48页 |
·TRAF3 增强 ASC 的蛋白表达水平 | 第48页 |
·TRAF3 影响 ASC 的半衰期 | 第48-49页 |
·MAVS 对 ASC 的调控依赖于 TRAF3 | 第49-51页 |
4. TRAF3 催化 ASC K174 位发生 K63-连接的泛素化 | 第51-54页 |
·TRAF3 催化 ASC 发生 K63-连接的泛素化 | 第51-52页 |
·TRAF3 催化 ASC K174 位发生泛素化 | 第52-54页 |
5. 病毒感染后 TRAF3 对 ASC 的泛素化介导其核质穿梭 | 第54-59页 |
·病毒感染后 ASC 发生泛素化 | 第54-55页 |
·MAVS 与 TRAF3 参与病毒感染后 ASC 的泛素化过程 | 第55-56页 |
·病毒感染后 TRAF3 促进 ASC 由细胞核向细胞质转移 | 第56-58页 |
·病毒感染后 ASC(K174R)无明显核质穿梭 | 第58-59页 |
6. 病毒感染后 MAVS 与 TRAF3 促进炎症小体激活 | 第59-63页 |
·病毒感染后 MAVS 与 TRAF3 促进 pro-caspase-1 切割和 IL-1β 产生 | 第59-61页 |
·病毒感染后 TRAF3 与 ASC 形成大分子复合物 | 第61-63页 |
讨论 | 第63-69页 |
1. MAVS 与 ASC 形成复合物 | 第63-64页 |
2. MAVS 增强 ASC 的蛋白稳定性及其介导的 IL-1 水平 | 第64-65页 |
3. MAVS 通过 TRAF3 对 ASC 的泛素化调控炎症小体信号通路 | 第65-66页 |
4. MAVS 与 TRAF3 参与病毒感染后炎症小体的激活 | 第66-69页 |
结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-81页 |
文献综述 | 第81-89页 |
参考文献 | 第84-89页 |
个人简历 | 第89-91页 |
发表文章 | 第91-92页 |
附录 | 第92-99页 |
致谢 | 第99页 |