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c-Abl通过磷酸化STAT1调控IFNγ应答途径

缩略词表第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
前言第11-19页
 1 IFNγ信号转导及其在免疫调控中的作用第11-15页
 2 非受体酪氨酸激酶 Abl 与病原微生物感染第15-17页
 3 本课题研究的立题依据和拟解决的科学问题第17-19页
材料与方法第19-31页
 1 细胞株、菌株、病毒株和质粒第19页
 2 分子生物学试剂第19页
 3 质粒构建、引物合成及序列测定第19-21页
 4 细胞培养、冻存及转染第21-22页
 5 GST -STAT1 和 His-STAT1 融合蛋白的原核表达及纯化第22-23页
 6 免疫沉淀和免疫印迹第23-24页
 7 GST-Pull down 试验第24页
 8 Far Western 试验第24页
 9 体外激酶分析第24页
 10 细胞裂解上清中蛋白质平衡第24页
 11 荧光素酶活性检测第24-25页
 12 树突细胞抗原提呈试验第25页
 13 细胞免疫荧光试验第25-26页
 14 真核细胞总 RNA 提取、逆转录合成 cDNA 及荧光定量 PCR第26-28页
 15 Duo-Link 试验第28页
 16 病毒培养及感染第28-31页
结果第31-57页
 1 荧光定量 PCR 验证转录组数据第31页
 2 c-Abl 调控 Lmp2 和 Tap1 基因转录第31-33页
   ·c-Abl 调控 Lmp2 和 Tap1 基因 mRNA 表达水平第32页
   ·c-Abl 调控 Lmp2 基因启动子转录活性第32-33页
 3 c-Abl 与 STAT1 相互作用第33-39页
   ·c-Abl 与 STAT1 在细胞内形成免疫复合物第33-35页
   ·c-Abl 与 STAT1 直接结合第35-36页
   ·c-Abl 通过 SH2 结构域与 STAT1 C 端结合第36-37页
   ·c-Abl 与 STAT1 在细胞内相互作用,并且受 IFNγ调控第37-39页
 4 c-Abl 磷酸化 STAT1第39-46页
   ·c-Abl 调控 STAT1 关键位点的磷酸化第39-40页
   ·c-Abl 和 Arg 磷酸化 STAT1第40-41页
   ·c-Abl 磷酸化 STAT1 Tyr701第41-42页
   ·c-Abl 磷酸化 STAT1 不依赖于 JAK 激酶第42-46页
 5 c-Abl 促进 STAT1 蛋白表达第46页
 6 c-Abl 调控 STAT1 活性第46-52页
   ·c-Abl 促进 STAT1 同源二聚体形成第46-47页
   ·c-Abl 促进 STAT1 进入细胞核第47-50页
   ·c-Abl/Arg 调控 STAT1 转录激活活性第50-52页
 7 c-Abl 调控小鼠树突细胞 JawsII MHC-I 类抗原提呈能力第52-53页
 8 c-Abl 调控 IFNγ抗病毒生物学活性及病毒增殖能力第53-57页
   ·c-Abl 调控 IFNγ诱导细胞抗水疱口炎性病毒 VSV 感染活性第53-54页
   ·c-Abl 调控新城疫病毒 NDV-GFP 在 A549 细胞的增殖能力第54-57页
讨论第57-63页
 1 非受体酪氨酸激酶 c-Abl 参与机体免疫反应第57-58页
 2 c-Abl 对 IFNγ信号转导调控机制的研究第58-59页
 3 c-Abl 磷酸化 STAT1第59-60页
 4 细胞原位检测 c-Abl 与 STAT1 相互作用第60页
 5 针对 c-Abl 通过磷酸化 STAT1 调控 IFNγ信号转导其他问题的思考第60-63页
结论第63-65页
参考文献第65-71页
附录第71-73页
文献综述第73-83页
 参考文献第78-83页
个人简历第83-85页
致谢第85页

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