缩略词表 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第11-19页 |
1 IFNγ信号转导及其在免疫调控中的作用 | 第11-15页 |
2 非受体酪氨酸激酶 Abl 与病原微生物感染 | 第15-17页 |
3 本课题研究的立题依据和拟解决的科学问题 | 第17-19页 |
材料与方法 | 第19-31页 |
1 细胞株、菌株、病毒株和质粒 | 第19页 |
2 分子生物学试剂 | 第19页 |
3 质粒构建、引物合成及序列测定 | 第19-21页 |
4 细胞培养、冻存及转染 | 第21-22页 |
5 GST -STAT1 和 His-STAT1 融合蛋白的原核表达及纯化 | 第22-23页 |
6 免疫沉淀和免疫印迹 | 第23-24页 |
7 GST-Pull down 试验 | 第24页 |
8 Far Western 试验 | 第24页 |
9 体外激酶分析 | 第24页 |
10 细胞裂解上清中蛋白质平衡 | 第24页 |
11 荧光素酶活性检测 | 第24-25页 |
12 树突细胞抗原提呈试验 | 第25页 |
13 细胞免疫荧光试验 | 第25-26页 |
14 真核细胞总 RNA 提取、逆转录合成 cDNA 及荧光定量 PCR | 第26-28页 |
15 Duo-Link 试验 | 第28页 |
16 病毒培养及感染 | 第28-31页 |
结果 | 第31-57页 |
1 荧光定量 PCR 验证转录组数据 | 第31页 |
2 c-Abl 调控 Lmp2 和 Tap1 基因转录 | 第31-33页 |
·c-Abl 调控 Lmp2 和 Tap1 基因 mRNA 表达水平 | 第32页 |
·c-Abl 调控 Lmp2 基因启动子转录活性 | 第32-33页 |
3 c-Abl 与 STAT1 相互作用 | 第33-39页 |
·c-Abl 与 STAT1 在细胞内形成免疫复合物 | 第33-35页 |
·c-Abl 与 STAT1 直接结合 | 第35-36页 |
·c-Abl 通过 SH2 结构域与 STAT1 C 端结合 | 第36-37页 |
·c-Abl 与 STAT1 在细胞内相互作用,并且受 IFNγ调控 | 第37-39页 |
4 c-Abl 磷酸化 STAT1 | 第39-46页 |
·c-Abl 调控 STAT1 关键位点的磷酸化 | 第39-40页 |
·c-Abl 和 Arg 磷酸化 STAT1 | 第40-41页 |
·c-Abl 磷酸化 STAT1 Tyr701 | 第41-42页 |
·c-Abl 磷酸化 STAT1 不依赖于 JAK 激酶 | 第42-46页 |
5 c-Abl 促进 STAT1 蛋白表达 | 第46页 |
6 c-Abl 调控 STAT1 活性 | 第46-52页 |
·c-Abl 促进 STAT1 同源二聚体形成 | 第46-47页 |
·c-Abl 促进 STAT1 进入细胞核 | 第47-50页 |
·c-Abl/Arg 调控 STAT1 转录激活活性 | 第50-52页 |
7 c-Abl 调控小鼠树突细胞 JawsII MHC-I 类抗原提呈能力 | 第52-53页 |
8 c-Abl 调控 IFNγ抗病毒生物学活性及病毒增殖能力 | 第53-57页 |
·c-Abl 调控 IFNγ诱导细胞抗水疱口炎性病毒 VSV 感染活性 | 第53-54页 |
·c-Abl 调控新城疫病毒 NDV-GFP 在 A549 细胞的增殖能力 | 第54-57页 |
讨论 | 第57-63页 |
1 非受体酪氨酸激酶 c-Abl 参与机体免疫反应 | 第57-58页 |
2 c-Abl 对 IFNγ信号转导调控机制的研究 | 第58-59页 |
3 c-Abl 磷酸化 STAT1 | 第59-60页 |
4 细胞原位检测 c-Abl 与 STAT1 相互作用 | 第60页 |
5 针对 c-Abl 通过磷酸化 STAT1 调控 IFNγ信号转导其他问题的思考 | 第60-63页 |
结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录 | 第71-73页 |
文献综述 | 第73-83页 |
参考文献 | 第78-83页 |
个人简历 | 第83-85页 |
致谢 | 第85页 |