摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-20页 |
1.1 引言 | 第13-14页 |
1.2 低温对植物的影响 | 第14页 |
1.3 热激蛋白的研究概述 | 第14-18页 |
1.3.1 热激蛋白简介 | 第14-15页 |
1.3.2 热激蛋白的功能 | 第15-16页 |
1.3.3 小分子热激蛋白(sHSPs)的结构 | 第16-17页 |
1.3.4 小分子热激蛋白(sHSP)的分类 | 第17页 |
1.3.5 小分子热激蛋白(sHSP)简介与功能 | 第17-18页 |
1.4 本研究的目的、意义 | 第18-19页 |
1.5 本研究的内容及技术路线 | 第19-20页 |
第二章 核桃sHSP家族基因筛选及确认 | 第20-39页 |
2.1 试验材料 | 第20页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 菌种与载体 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
2.1.4 溶液配制 | 第20页 |
2.2 试验方法 | 第20-24页 |
2.2.1 核桃sHSP家族基因的筛选 | 第20-21页 |
2.2.2 JrsHSP17.3 和JrsHSP20-1 基因的克隆 | 第21-24页 |
2.2.3 实时定量PCR | 第24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-37页 |
2.3.1 sHSP家族基因的序列特征 | 第24-25页 |
2.3.2 核桃sHSP家族基因的跨膜区预测 | 第25-26页 |
2.3.3 核桃sHSP家族蛋白序列分析 | 第26-29页 |
2.3.4 核桃sHSP家族基因的进化分析 | 第29页 |
2.3.5 核桃sHSP家族基因蛋白结构预测 | 第29-32页 |
2.3.6 核桃sHSP家族基因的表达特征 | 第32页 |
2.3.7 JrsHSP17.3 基因和JrsHSP20-1 基因的定量表达分析 | 第32-37页 |
2.4 讨论 | 第37页 |
2.5 本章小结 | 第37-39页 |
第三章 转JrsHSP17.3 和JrsHSP20-1 的酵母抗逆性分析 | 第39-51页 |
3.1 试验材料 | 第39页 |
3.1.1 菌株和载体 | 第39页 |
3.1.2 主要试剂 | 第39页 |
3.2 试验方法 | 第39-42页 |
3.2.1 酵母表达载体的构建 | 第39-41页 |
3.2.2 重组质粒和pYES2质粒的酵母转化及鉴定 | 第41页 |
3.2.3 重组酵母的胁迫实验 | 第41-42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-49页 |
3.3.1 表达载体及酵母重组子的获得 | 第42-45页 |
3.3.2 重组酵母的抗性分析 | 第45-49页 |
3.4 讨论 | 第49-50页 |
3.5 本章小结 | 第50-51页 |
第四章 JrsHSP17.3 基因在核桃中的瞬时表达分析 | 第51-70页 |
4.1 试验材料 | 第51-52页 |
4.1.1 植物材料 | 第51页 |
4.1.2 菌种与载体 | 第51页 |
4.1.3 主要试剂 | 第51页 |
4.1.4 培养基和溶液的配制 | 第51-52页 |
4.2 试验方法 | 第52-60页 |
4.2.1 核桃JrsHSP17.3 基因的过表达载体的构建 | 第52-55页 |
4.2.2 瞬时侵染核桃叶 | 第55-56页 |
4.2.3 瞬时转化核桃JrsHSP17.3 基因的表达分析 | 第56页 |
4.2.4 瞬时转化核桃的Southern杂交鉴定 | 第56-57页 |
4.2.5 Evans blue染色 | 第57页 |
4.2.6 瞬时转化核桃JrsHSP17.3 基因的生理指标测定 | 第57-60页 |
4.3 结果与分析 | 第60-68页 |
4.3.1 核桃过表达载体的构建 | 第60-61页 |
4.3.2 转JrsHSP17.3 核桃的southern杂交分析 | 第61页 |
4.3.3 JrsHSP17.3 基因的瞬时表达分析 | 第61-62页 |
4.3.4 利用Evans blue研究瞬时侵染核桃幼苗细胞受损情况 | 第62-63页 |
4.3.5 转JrsHSP17.3 基因核桃的生理指标分析 | 第63-68页 |
4.6 讨论 | 第68-69页 |
4.7 本章小结 | 第69-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
作者简介 | 第77页 |