| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第11-27页 |
| 1.1 细胞穿膜肽 | 第11-15页 |
| 1.1.1 细胞穿膜肽的发现及研究现状 | 第11页 |
| 1.1.2 细胞穿膜肽的种类 | 第11-13页 |
| 1.1.3 CPPs的穿膜机理研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.4 人源性穿膜肽的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.2 CPP在抗肿瘤治疗中的应用 | 第15-18页 |
| 1.2.1 凋亡蛋白 | 第15-16页 |
| 1.2.2 p53肿瘤抑制因子 | 第16-17页 |
| 1.2.3 Bcl-2 | 第17页 |
| 1.2.4 反义RNA | 第17-18页 |
| 1.3 肿瘤靶向治疗的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.1 抗癌靶向疗法的分类 | 第18-19页 |
| 1.3.2 肿瘤靶向片段与穿膜肽的连接方式 | 第19页 |
| 1.4 前体药物靶向治疗策略 | 第19-22页 |
| 1.4.1 ATTEMPTS | 第20-21页 |
| 1.4.2 借助于pH敏感的多聚阴离子CPP封闭片段 | 第21页 |
| 1.4.3 光敏性前体药物策略 | 第21页 |
| 1.4.4 空间位阻效应在肿瘤靶向治疗上的应用 | 第21-22页 |
| 1.5 受体依赖肿瘤靶向治疗研究现状 | 第22-24页 |
| 1.5.1 靶向EGFR型单抗药物 | 第22-23页 |
| 1.5.2 靶向Her-2型单抗药物 | 第23页 |
| 1.5.3 抗体药物偶联物 | 第23-24页 |
| 1.6 新型EGFR靶向片段SX3 | 第24-25页 |
| 1.7 绿色荧光蛋白 | 第25页 |
| 1.8 课题研究背景及意义 | 第25-27页 |
| 第2章 材料与方法 | 第27-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-32页 |
| 2.1.1 生化学试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.2 原核培养基培养基及配方 | 第28页 |
| 2.1.3 动物细胞培养基及培养基 | 第28-29页 |
| 2.1.4 缓冲液 | 第29-30页 |
| 2.1.5 大肠杆菌菌种 | 第30页 |
| 2.1.6 质粒载体 | 第30-31页 |
| 2.1.7 仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 HBDN端融合蛋白的转导活性研究 | 第32-34页 |
| 2.2.2 融合蛋白EGFP-SX3-HBD和EGFP-SX3的构建表达及纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.3 融合蛋白EGFP-SX3-HBD的穿膜活性检测 | 第35页 |
| 2.2.4 EGFP-SX3-HBD的穿膜性质研究 | 第35-37页 |
| 2.2.5 靶向肿瘤细胞穿膜肽与-凋亡素融合蛋白的性质研究 | 第37-39页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第39-62页 |
| 3.1 HBD位于融合蛋白不同位置对其穿膜能力的影响 | 第39-45页 |
| 3.1.1 重组质粒HBD-EGFP-Histag的构建 | 第39-40页 |
| 3.1.2 融合蛋白HBD-EGFP的表达纯化 | 第40-41页 |
| 3.1.3 融合蛋白HBD-EGFP穿膜活的共聚焦性检测 | 第41-42页 |
| 3.1.4 HBD-EGFP与EGFP-HBD转导活性的流式细胞检测 | 第42-43页 |
| 3.1.5 HBD-EGFP及EGFP-HBD的细胞谱专一性分析 | 第43-44页 |
| 3.1.6 实验小结 | 第44-45页 |
| 3.2 靶向肿瘤细胞穿膜肽的构建、表达和纯化 | 第45-49页 |
| 3.2.1 融合蛋白EGFP-SX3-HBD和EGFP-SX3的构建 | 第45-46页 |
| 3.2.2 融合蛋白EGFP-SX3-HBD的表达及纯化 | 第46-48页 |
| 3.2.3 融合蛋白EGFP-SX3的表达及纯化 | 第48-49页 |
| 3.2.4 实验小结 | 第49页 |
| 3.3 融合蛋白EGFP-SX3-HBD的穿膜活性检测 | 第49-53页 |
| 3.4 EGFP-SX3-HBD的穿膜性质研究 | 第53-60页 |
| 3.4.1 EGFP-SX3-HBD的浓度依赖性研究 | 第53-55页 |
| 3.4.2 EGFP-SX3-HBD的时间依赖性研究 | 第55页 |
| 3.4.3 EGFP-SX3-HBD的细胞专一性研究 | 第55-57页 |
| 3.4.4 EGFP-SX3-HBD的内化途径研究 | 第57-59页 |
| 3.4.5 实验小结 | 第59-60页 |
| 3.5 靶向肿瘤细胞穿膜肽与-凋亡素融合蛋白的活性研究 | 第60-62页 |
| 3.5.1 融合蛋白VP3-SX3-HBD的构建表达及纯化 | 第60-61页 |
| 3.5.2 新型靶向穿膜肽-凋亡蛋白活性的MTT检测 | 第61-62页 |
| 第4章 结论与展望 | 第62-64页 |
| 4.1 结论 | 第62-63页 |
| 4.1.1 HBD位置效应对HBD融合蛋白穿膜活性的影响 | 第62页 |
| 4.1.2 多种融合蛋白的构建、表达和纯化 | 第62页 |
| 4.1.3 SX3-HBD的靶向穿膜活性研究 | 第62-63页 |
| 4.1.4 靶向肿瘤细胞穿膜肽与-凋亡素融合蛋白的活性研究 | 第63页 |
| 4.2 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
