| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩写索引 | 第16-19页 |
| 引言 | 第19-21页 |
| 第一章 重编程法制备人源肝脏细胞及其应用研究进展 | 第21-37页 |
| 1 背景概述 | 第21页 |
| 2 人源肝脏细胞的重编程方法 | 第21-28页 |
| 2.1 人源肝脏细胞重编程的细胞来源 | 第21-23页 |
| 2.1.1 ESCs来源的肝脏细胞重编程 | 第21-22页 |
| 2.1.2 iPSCs来源的肝脏细胞重编程 | 第22-23页 |
| 2.2 细胞因子/小分子化合物对肝细胞分化的影响 | 第23-26页 |
| 2.2.1 早期诱导因子 | 第23-25页 |
| 2.2.2 中期诱导因子 | 第25-26页 |
| 2.2.3 晚期促成熟因子 | 第26页 |
| 2.3 培养方式对肝细胞分化的影响 | 第26-28页 |
| 3 人源肝细胞的应用 | 第28-33页 |
| 3.1 细胞治疗 | 第28-31页 |
| 3.2 药物筛选 | 第31-32页 |
| 3.3 体外疾病模型 | 第32-33页 |
| 4 存在的问题/局限性 | 第33-36页 |
| 5 本论文研究目的及内容 | 第36-37页 |
| 5.1 目的 | 第36页 |
| 5.2 内容 | 第36-37页 |
| 第二章 非病毒纳米基因传递系统的hiPSCs重编程研究 | 第37-59页 |
| 1 磷酸钙纳米粒的制备与表征 | 第37-46页 |
| 1.1 主要试剂与仪器 | 第37-38页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第37页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第37-38页 |
| 1.2 方法与结果 | 第38-46页 |
| 1.2.1 基因选择 | 第38页 |
| 1.2.2 质粒DNA制备 | 第38-40页 |
| 1.2.3 C-pSOCK与C-pOS+miR的制备 | 第40-41页 |
| 1.2.4 C-pSOCK与C-pOS+miR的表征 | 第41-46页 |
| 2 hiPSCs重编程及鉴定 | 第46-57页 |
| 2.1 主要试剂与仪器 | 第46-48页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第46-47页 |
| 2.1.2 溶液和培养基的配制 | 第47-48页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第48页 |
| 2.2 hUMSCs体外直接重编程 | 第48-57页 |
| 2.2.1 hUMSCs培养 | 第48-50页 |
| 2.2.2 滋养层细胞制备 | 第50页 |
| 2.2.3 hiPSCs的生成 | 第50-52页 |
| 2.2.4 hiPSCs多能性鉴定 | 第52-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 4 本章小结 | 第58-59页 |
| 第三章 hiPSCs的肝细胞定向诱导分化研究 | 第59-70页 |
| 1 主要试剂与仪器 | 第59页 |
| 1.1 主要试剂 | 第59页 |
| 1.2 主要仪器 | 第59页 |
| 2 方法与结果 | 第59-68页 |
| 2.1 诱导方案优化 | 第59-64页 |
| 2.2 细胞形态观察 | 第64-65页 |
| 2.3 肝脏特征性蛋白表达 | 第65-68页 |
| 2.3.1 免疫荧光法检测肝脏特征性蛋白表达 | 第65-67页 |
| 2.3.2 Western blot检测肝脏特征性蛋白表达 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 4 本章小结 | 第69-70页 |
| 第四章 二维培养体系中肝细胞药物代谢酶表达及细胞活性研究 | 第70-78页 |
| 1 主要试剂与仪器 | 第70-71页 |
| 1.1 主要试剂 | 第70页 |
| 1.2 主要仪器 | 第70-71页 |
| 2 方法与结果 | 第71-76页 |
| 2.1 二维培养体系中肝细胞药物代谢酶表达 | 第71-72页 |
| 2.2 二维培养体系中肝细胞功能检测 | 第72-73页 |
| 2.3 二维培养体系中肝细胞代谢活性研究 | 第73-76页 |
| 2.3.1 白蛋白分泌测定 | 第73-74页 |
| 2.3.2 尿素合成测定 | 第74-75页 |
| 2.3.3 葡萄糖消耗测定 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| 4 本章小结 | 第77-78页 |
| 第五章 三维培养体系中hiPSCs定向肝细胞诱导分化 | 第78-94页 |
| 1 主要试剂与仪器 | 第78页 |
| 1.1 主要试剂 | 第78页 |
| 1.2 主要仪器 | 第78页 |
| 2 方法与结果 | 第78-92页 |
| 2.1 胶原/壳聚糖三维支架制备 | 第78-79页 |
| 2.2 胶原/壳聚糖三维支架表征 | 第79-84页 |
| 2.2.1 扫描电镜测定 | 第79-81页 |
| 2.2.2 吸水率与保水率测定 | 第81-82页 |
| 2.2.3 hUMSCs在胶原/壳聚糖三维支架上的粘附增殖 | 第82-84页 |
| 2.3 胶原/壳聚糖三维支架上hiPSCs定向肝脏诱导分化 | 第84-92页 |
| 2.3.1 hiPSCs的生成 | 第84-88页 |
| 2.3.2 三维培养体系中hiPSCs定向肝脏诱导分化 | 第88-92页 |
| 3 讨论 | 第92-93页 |
| 4 本章小结 | 第93-94页 |
| 第六章 全文总结与创新点 | 第94-97页 |
| 一 全文总结 | 第94-96页 |
| 1 非病毒纳米基因传递系统的hiPSCs重编程研究 | 第94页 |
| 2 hiPSCs的肝细胞定向诱导分化 | 第94-95页 |
| 3 二维培养体系中肝细胞药物代谢酶表达及细胞活性研究 | 第95页 |
| 4 三维培养体系中hiPSCs定向肝细胞诱导分化研究 | 第95-96页 |
| 二 创新点 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 攻读硕士期间已发表或完成的论文 | 第108页 |
