摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第10-35页 |
1.1 拉曼光谱 | 第10-20页 |
1.1.1 拉曼光谱简介 | 第10页 |
1.1.2 拉曼散射原理 | 第10-11页 |
1.1.3 拉曼光谱仪 | 第11-13页 |
1.1.4 拉曼光谱的特征 | 第13页 |
1.1.5 拉曼光谱技术的优越性 | 第13-14页 |
1.1.6 拉曼与红外光谱 | 第14-15页 |
1.1.7 拉曼光谱的分类 | 第15-17页 |
1.1.7.1 常规拉曼光谱 | 第15页 |
1.1.7.2 共振拉曼光谱 | 第15页 |
1.1.7.3 手性拉曼光谱(ROA) | 第15页 |
1.1.7.4 表面增强拉曼光谱 | 第15-17页 |
1.1.8 拉曼光谱的应用领域 | 第17-20页 |
1.1.8.1 拉曼光谱在材料中的应用 | 第17-18页 |
1.1.8.2 拉曼光谱在生化分析中的应用 | 第18-20页 |
1.2 银纳米簇 | 第20-29页 |
1.2.1 金属纳米簇的性质 | 第20-21页 |
1.2.2 银纳米簇的合成方法 | 第21-25页 |
1.2.2.1 以无机材料为模板合成银纳米簇 | 第22页 |
1.2.2.2 以单链DNA为模板合成银纳米簇 | 第22-25页 |
1.2.3 DNA银纳米簇在生化分析中的应用 | 第25-29页 |
1.2.3.1 DNA银纳米簇作为荧光探针用于小分子检测 | 第25-27页 |
1.2.3.2 DNA银纳米簇作为荧光探针标记于细胞成像 | 第27-29页 |
1.3 DNA甲基化 | 第29-33页 |
1.3.1 DNA甲基化酶简介 | 第29页 |
1.3.2 DNA甲基化的原理 | 第29-30页 |
1.3.3 已有检测DNA甲基化酶的方法 | 第30-32页 |
1.3.4 肿瘤与DNA甲基化 | 第32-33页 |
1.3.5 DNA甲基化的前景及应用 | 第33页 |
1.4 microRNA的简介 | 第33-34页 |
1.5 课题研究的意义 | 第34-35页 |
第二章 基于目标物诱导的多重循环放大反应SERS检测DNA甲基化酶 | 第35-55页 |
2.1 前言 | 第35-36页 |
2.2 实验部分 | 第36-42页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第36-38页 |
2.2.1.1 试剂 | 第36-38页 |
2.2.1.2 仪器 | 第38页 |
2.2.2 实验方法 | 第38-42页 |
2.2.2.1 金纳米粒子的制备 | 第38页 |
2.2.2.2 拉曼探针的制备 | 第38-39页 |
2.2.2.3 发夹DNA在磁性微球(MBs)表面的固定 | 第39页 |
2.2.2.4 DNA的甲基化 | 第39页 |
2.2.2.5 等温循环放大过程 | 第39页 |
2.2.2.6 拉曼光谱的检测 | 第39-40页 |
2.2.2.7 非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳的实验步骤 | 第40页 |
2.2.2.8 甲基化酶抑制剂的筛选 | 第40页 |
2.2.2.9 药物抑制剂对DpnI内切酶活性的影响研究 | 第40-41页 |
2.2.2.10 药物抑制剂对Klenow聚合酶和NEase活性的影响研究 | 第41-42页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第42-52页 |
2.3.1 实验原理 | 第42-43页 |
2.3.2 拉曼探针的光谱表征 | 第43-44页 |
2.3.2.1 荧光光谱表征 | 第43-44页 |
2.3.2.2 紫外-可见光谱表征 | 第44页 |
2.3.3 实验可行性研究 | 第44-45页 |
2.3.4 非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(PAGE)表征 | 第45-46页 |
2.3.5 实验条件的优化 | 第46-49页 |
2.3.5.1 Klenow聚合酶浓度的优化 | 第46-47页 |
2.3.5.2 NEase浓度的优化 | 第47页 |
2.3.5.3 等温循环反应时间的优化 | 第47-48页 |
2.3.5.4 S1/S2双链底物DNA浓度的优化 | 第48-49页 |
2.3.6 甲基化酶的检测 | 第49页 |
2.3.7 实验的选择性 | 第49-50页 |
2.3.8 药物抑制剂的筛选与分析 | 第50-51页 |
2.3.9 药物抑制剂对酶活性的影响 | 第51-52页 |
2.3.9.1 药物抑制剂对Dpn I内切酶活性的影响 | 第51-52页 |
2.3.9.2 药物抑制剂对Klenow聚合酶、NEase活性的影响 | 第52页 |
2.4 与其他检测甲基化酶活性方法的比较 | 第52-53页 |
2.5 甲基化酶实际样品分析 | 第53-54页 |
2.6 本章小结 | 第54-55页 |
第三章 基于催化发夹组装银纳米簇荧光增强检测mi RNA | 第55-65页 |
3.1 前言 | 第55-56页 |
3.2 实验部分 | 第56-59页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第56-57页 |
3.2.1.1 试剂 | 第56-57页 |
3.2.1.2 仪器 | 第57页 |
3.2.2 实验方法 | 第57-59页 |
3.2.2.1 DNA银纳米簇的制备 | 第57-58页 |
3.2.2.2 目标miRNA的检测 | 第58页 |
3.2.2.3 非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳的实验步骤 | 第58-59页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第59-64页 |
3.3.1 实验原理 | 第59-60页 |
3.3.2 实验可行性研究 | 第60页 |
3.3.3 非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(PAGE)的表征 | 第60-62页 |
3.3.4 实验条件的优化 | 第62-63页 |
3.3.4.1 催化发夹反应时间的优化 | 第62页 |
3.3.4.2 催化发夹反应温度的优化 | 第62-63页 |
3.3.5 miRNA的检测 | 第63-64页 |
3.3.6 实验的选择性 | 第64页 |
3.4 本章小结 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第76-77页 |