| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-21页 |
| 1.1 RLI研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 RNase L系统 | 第12页 |
| 1.1.2 RLI基因的研究 | 第12-13页 |
| 1.1.3 RLI功能探究 | 第13-14页 |
| 1.2 HaNPV研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.1 HaNPV研究现状 | 第14页 |
| 1.2.2 HaNPV杀虫剂的研究 | 第14-15页 |
| 1.3 转基因植株的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.3.1 植物转基因技术的发展 | 第15-16页 |
| 1.3.2 转基因植株后代遗传分析 | 第16页 |
| 1.4 植物介导的昆虫RNAi | 第16-18页 |
| 1.4.1 RNAi作用机理 | 第16-17页 |
| 1.4.2 RNAi在植物保护中的作用 | 第17页 |
| 1.4.3 RNAi效率 | 第17-18页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 1.6 实验设计与技术路线 | 第19-21页 |
| 第2章 HaRLI基因的克隆及功能研究 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 pUCm-HaRLI质粒的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.2 序列的拼接与分析 | 第22页 |
| 2.2.3 HaNPV病毒处理 | 第22页 |
| 2.2.4 RT-qPCR及数据分析 | 第22-23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-30页 |
| 2.3.1 HaRLI基因的克隆及pUCm-HaRLI质粒的构建结果 | 第23-26页 |
| 2.3.2 HaRLI基因拼接和分析 | 第26-28页 |
| 2.3.3 SYBR Green I反应的优化 | 第28-30页 |
| 2.3.4 HaNPV病毒处理对HaRLI基因表达水平的影响 | 第30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-33页 |
| 第3章 植物表达载体的构建及烟草的转化 | 第33-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.2.1 pBin438-HaRLI载体的构建 | 第33-35页 |
| 3.2.2 烟草的遗传转化 | 第35-36页 |
| 3.2.3 抗性植株的鉴定 | 第36页 |
| 3.2.4 转HaRLI基因植株后代遗传规律 | 第36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-45页 |
| 3.3.1 pBin438-HaRLI质粒构建结果 | 第36-40页 |
| 3.3.2 农杆菌LBA4404的转化及植株的再生 | 第40-41页 |
| 3.3.3 抗性植株分析 | 第41-42页 |
| 3.3.4 转HaRLI基因植株后代遗传规律分析 | 第42-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 转HaRLI基因植株抗虫性分析 | 第47-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 4.2.1 dsRNA表达载体构建 | 第47-48页 |
| 4.2.2 dsRNA的诱导 | 第48页 |
| 4.2.3 RNAi实验 | 第48-49页 |
| 4.2.4 RT-qPCR检测基因沉默效率 | 第49页 |
| 4.2.5 叶片咬噬实验 | 第49页 |
| 4.3 结果与分析 | 第49-57页 |
| 4.3.1 pL4441载体构建结果 | 第49-53页 |
| 4.3.2 dsRNA诱导表达与检测 | 第53-55页 |
| 4.3.3 RNAi后靶标基因的表达情况 | 第55-57页 |
| 4.3.4 转HaRLI基因烟草叶片抗虫性分析 | 第57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第70页 |
