| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| 引言 | 第9页 |
| 1.1 病原学特征 | 第9-10页 |
| 1.2 生活史 | 第10-12页 |
| 1.3 危害 | 第12-13页 |
| 1.4 蜱耐药基因的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.5 蜱耐药性诊断方法研究进展 | 第14-16页 |
| 1.5.1 病原学诊断 | 第14-15页 |
| 1.5.2 聚合酶链式反应 | 第15页 |
| 1.5.3 反向线性印迹技术 | 第15页 |
| 1.5.4 环介导等温扩增技术 | 第15页 |
| 1.5.5 实时荧光定量PCR技术 | 第15-16页 |
| 1.6 研究内容与目的 | 第16-18页 |
| 第二章 靶基因的测序分析、引物和探针设计及质粒标准品的构建 | 第18-31页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 蜱种和参考序列信息 | 第18-19页 |
| 2.1.2 主要试剂和耗材 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-28页 |
| 2.2.1 蜱耐药基因D6的序列比对及同源性分析 | 第19-23页 |
| 2.2.2 引物及探针的设计合成 | 第23页 |
| 2.2.3 全蜱基因组的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.4 质粒标准品的制备 | 第24-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-30页 |
| 2.3.1 蜱虫D6耐药基因序列比对 | 第28-29页 |
| 2.3.2 基因的扩增、克隆及测序 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 实时荧光定量PCR方法的建立及评价 | 第31-39页 |
| 3.1 试剂材料 | 第31页 |
| 3.2 方法 | 第31-34页 |
| 3.2.1 实时荧光定量PCR扩增 | 第31-32页 |
| 3.2.2 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第32-33页 |
| 3.2.3 Taq Man探针荧光定量PCR方法的评价 | 第33-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-37页 |
| 3.3.1 标准曲线的建立 | 第34页 |
| 3.3.2 特异性实验 | 第34-35页 |
| 3.3.3 敏感性实验 | 第35-36页 |
| 3.3.4 重复性实验 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 我国部分地区蜱虫耐药基因D6荧光定量PCR检测 | 第39-43页 |
| 4.1 材料 | 第39页 |
| 4.1.1 样品来源 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂与仪器 | 第39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 4.2.1 全蜱基因组提取 | 第39页 |
| 4.2.2 探针及引物的合成 | 第39-40页 |
| 4.2.3 普通PCR检测体系与程序 | 第40页 |
| 4.2.4 荧光定量PCR检测体系与程序 | 第40-41页 |
| 4.3 结果 | 第41-42页 |
| 4.3.1 蜱耐药基因D6普通PCR检测结果 | 第41页 |
| 4.3.2 蜱耐药基因D6荧光定量PCR检测结果 | 第41-42页 |
| 4.4 普通PCR结果和实时荧光PCR检测结果比较 | 第42页 |
| 4.5 讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 全文结论 | 第43-44页 |
| Abstract | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 作者简历 | 第51页 |
