| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-25页 |
| 第一章 B淋巴细胞刺激因子( BAFF)的研究进展 | 第11-19页 |
| 1.1 BAFF的表达及分子结构 | 第11-12页 |
| 1.2 BAFF受体 | 第12-13页 |
| 1.3 BAFF介导的信号通路 | 第13-14页 |
| 1.4 BAFF的生物学功能 | 第14-15页 |
| 1.4.1 BAFF对B淋巴细胞的影响 | 第14-15页 |
| 1.4.2 BAFF与T细胞的关系 | 第15页 |
| 1.4.3 BAFF的细胞毒效应和Caspase激活 | 第15页 |
| 1.5 BAFF在疾病和肿瘤中的作用 | 第15-17页 |
| 1.5.1 BAFF与自身免疫疾病 | 第15-16页 |
| 1.5.2 免疫缺陷 | 第16页 |
| 1.5.3 慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL) | 第16-17页 |
| 1.6 BAFF作为靶点的应用前景 | 第17页 |
| 1.6.1 抗BAFF单克隆抗体 | 第17页 |
| 1.6.2 BAFF的可溶性受体 | 第17页 |
| 1.6.3 人可溶性BAFF结合小肽 | 第17页 |
| 1.7 结论与展望 | 第17-19页 |
| 第二章 TNFRSF13B的研究进展 | 第19-24页 |
| 2.1 TNFRSF13B来源与结构 | 第19页 |
| 2.2 TNFRSF13B的生物学功能 | 第19-21页 |
| 2.2.1 TNFRSF13B调节B细胞作用 | 第19-20页 |
| 2.2.2 TNFRSF13B选择性激活Syndecan-2途径 | 第20页 |
| 2.2.3 TNFRSF13B诱导同型转换 | 第20-21页 |
| 2.3 TNFRSF13B相关的疾病 | 第21-22页 |
| 2.3.1 非霍奇金淋巴瘤(NHL) | 第21页 |
| 2.3.2 霍奇金淋巴瘤(HL) | 第21-22页 |
| 2.3.3 多发性骨髓瘤(MM) | 第22页 |
| 2.3.4 普通变异型免疫缺陷病(CVID) | 第22页 |
| 2.4 展望 | 第22-24页 |
| 第三章 罗非鱼简介 | 第24-25页 |
| 第二部分 实验部分 | 第25-65页 |
| 第四章 罗非鱼BAFF的克隆表达 | 第26-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 4.1.1 实验动物、宿主菌、质粒 | 第26页 |
| 4.1.2 试剂和耗材 | 第26页 |
| 4.1.3 主要实验仪器 | 第26-27页 |
| 4.1.4 主要试剂配制 | 第27页 |
| 4.2 实验设计 | 第27-28页 |
| 4.3 实验方法 | 第28-39页 |
| 4.3.1 罗非鱼BAFF基因的克隆 | 第28-35页 |
| 4.3.2 Real-time检测tBAFF的组织分布 | 第35页 |
| 4.3.3 生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 4.3.4 重组质粒pET2 8a-tsBAFF/pET28a-GFP-tsBAFF原核表达 | 第36-37页 |
| 4.3.5 tsBAFF/GFP-tsBAFF的分子量鉴定 | 第37-38页 |
| 4.3.6 重组蛋白tsBAFF/GFP-tsBAFF的活性鉴定 | 第38-39页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第39-48页 |
| 4.4.1 罗非鱼BAFF全长cDNA序列及对应的氨基酸序列 | 第39页 |
| 4.4.2 tBAFF氨基酸序列的同源比对分析 | 第39-40页 |
| 4.4.3 tsBAFF蛋白基本性质信息学分析 | 第40-42页 |
| 4.4.4 疏水性分析 | 第42页 |
| 4.4.5 结构功能域分析 | 第42-43页 |
| 4.4.6 蛋白3D结构 | 第43-44页 |
| 4.4.7 系统进化分析 | 第44-45页 |
| 4.4.8 tBAFF在mRNA水平的表达分布 | 第45页 |
| 4.4.9 tsBAFF/ GFP-tsBAFF蛋白的表达、纯化及鉴定 | 第45-47页 |
| 4.4.10 tsBAFF/GFP-tsBAFF蛋白对小鼠B淋巴细胞的促存活作用 | 第47页 |
| 4.4.11 流式细胞分析 | 第47-48页 |
| 4.4.12 GFP-tsBAFF蛋白与小鼠B淋巴细胞的结合 | 第48页 |
| 4.5 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 人TNFRSF13B_2-FC克隆表达、纯化和活性鉴定 | 第50-65页 |
| 5.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第50页 |
| 5.1.2 试剂耗材 | 第50页 |
| 5.1.3 主要实验仪器 | 第50-51页 |
| 5.1.4 主要试剂配制 | 第51页 |
| 5.2 实验方法 | 第51-56页 |
| 5.2.1 全长TNFRSF13B序列克隆 | 第51-54页 |
| 5.2.2 生物信息学分析 | 第54页 |
| 5.2.3 表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 5.2.4 连接产物转化、鉴定分析 | 第55页 |
| 5.2.5 hsTNFRSF13B_2-Fc在BL21(DE3)中的表达、纯化 | 第55-56页 |
| 5.2.6 hTNFRSF13B_2-Fc重组蛋白分子量鉴定 | 第56页 |
| 5.2.7 Elisa检测抗原结合活性 | 第56页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第56-64页 |
| 5.3.1 hsTNFRSF13B_2-Fc氨基酸对应图谱 | 第56-57页 |
| 5.3.2 全长hTNFRSF13B蛋白疏水性分析 | 第57-58页 |
| 5.3.3 hsTNFRSF13B与hsTNFRSF13B_2氨基酸序列对比 | 第58页 |
| 5.3.4 TNFRSF13B蛋白结构功能域分析 | 第58-59页 |
| 5.3.5 hsTNFRSF13B_2蛋白空间结构预测 | 第59页 |
| 5.3.6 hsTNFRSF13B_2蛋白基本性质信息学分析 | 第59-61页 |
| 5.3.7 表达载体的构建 | 第61-62页 |
| 5.3.8 蛋白的表达、纯化 | 第62-63页 |
| 5.3.9 Elisa结果分析 | 第63-64页 |
| 5.4 讨论 | 第64-65页 |
| 全文总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 附录: 硕士期间发表的学术论文及研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
