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戊型肝炎病毒(HEV)组成和结构的分析及其ORF2蛋白在昆虫细胞中表达的研究

中文摘要第4-8页
Abstract第8-11页
缩略词第15-17页
第1章 前言第17-39页
    1.1 戊型肝炎病毒的分子生物学特征第17-18页
    1.2 HEV 的结构蛋白第18-20页
    1.3 戊肝病毒结构第20-28页
    1.4 HEV 疫苗第28-35页
    1.5 论文设计第35-39页
第2章 戊型肝炎病毒(HEV)组成和结构的分析第39-61页
    2.1 实验材料第39-41页
        2.1.1 细胞系第39页
        2.1.2 细胞培养所需溶液第39页
        2.1.3 HEV 病毒第39页
        2.1.4 主要材料,试剂和溶液配制第39-41页
    2.2 实验方法第41-47页
        2.2.1 细胞培养第41页
        2.2.2 细胞培养上清中的病毒液的超滤浓缩第41页
        2.2.3 HEV 病毒的纯化第41-42页
        2.2.4 病毒的裂解变性第42页
        2.2.5 变性后 ORF2 蛋白的检测第42-43页
        2.2.6 病毒 RNA 含量的检测第43页
        2.2.7 检测各个超离层的感染性第43-44页
        2.2.8 病毒表面脂膜和 ORF3 蛋白的去除第44页
        2.2.9 不同病毒样品与 PLC/PRF/5 细胞的结合性实验第44页
        2.2.10 亲和层析提取 ORF2 蛋白和 HEV 病毒第44-45页
        2.2.11 用 ORF3 单抗进行的免疫捕获第45页
        2.2.12 提取 ORF2 蛋白的检测第45-46页
        2.2.13 ORF2 蛋白和 HEV RNA 的自组装第46页
        2.2.14 、自组装样品的透射电镜检测第46-47页
    2.3 实验结果第47-54页
    2.4 讨论第54-59页
    2.5 小结第59-61页
第3章 ORF2 蛋白在昆虫细胞中的表达第61-89页
    3.1 实验材料第61-63页
        3.1.1 细胞系第61页
        3.1.2 细胞培养所需溶液第61页
        3.1.3 主要材料,试剂和溶液配制第61-63页
    3.2 实验方法第63-69页
        3.2.1 细胞培养第63页
        3.2.2 杆状病毒 pfu 检测第63-64页
        3.2.3 VLP 表达参数的优化第64-65页
        3.2.4 蔗糖密度梯度层的制备及 HEV VLP 的初步提取第65页
        3.2.5 HEV VLP 的柱层析纯化第65-66页
        3.2.6 样品分子量检测第66页
        3.2.7 样品的糖染色第66页
        3.2.8 等电点的检测第66-67页
        3.2.9 肽图检测第67页
        3.2.10 样品纯度检测第67页
        3.2.11 样品颗粒性的检测第67-68页
        3.2.12 铝结合率检测第68页
        3.2.13 免疫原性检测第68-69页
    3.3 实验结果第69-85页
        3.3.1 HEV VLPs 表达参数的优化第69-74页
        3.3.2 HEV VLPs 分离纯化工艺摸索第74-76页
        3.3.3 HEV VLPs 评价体系的初步建立第76-85页
    3.4 讨论第85-88页
    3.5 小结第88-89页
结论第89-91页
参考文献第91-101页
个人简历第101-103页
后记和致谢第103页

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