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水稻黄化转绿突变基因gry79的图位克隆

摘要第4-6页
abstract第6-8页
第一章 文献综述第11-34页
    1 叶色突变的类型和来源第11-12页
        1.1 叶色突变体的类型第11页
        1.2 叶色突变体的来源第11-12页
    2 叶色突变的分子机理第12-17页
        2.1 叶绿素的合成和降解第13-15页
        2.2 血红素-光敏色素生色团生物合成途径的基因突变第15-16页
        2.3 叶绿体分化和发育相关基因的突变第16-17页
        2.4 其他叶绿体蛋白编码基因的突变第17页
        2.5 质核信号传导途径受阻第17页
    3 叶色突变体的应用价值第17-19页
        3.1 叶色突变体作为形态标记在育种中的作用第17-18页
        3.2 应用于生理生化分子机理的研究第18-19页
        3.3 其他方面的应用第19页
    4 水稻叶色突变基因定位和克隆研究进展第19-23页
        4.1 水稻叶色基因的定位第19-20页
        4.2 水稻叶色基因的克隆第20-23页
    5 分子标记第23-26页
        5.1 RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphisms)第23-24页
        5.2 STS(Sequence Tagged Site)第24页
        5.3 CAPS(Cleaved Amplified Polymorphic Sequence)第24页
        5.4 RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)第24页
        5.5 SSR(Simple sequence repeat)第24-25页
        5.6 SNP (Single Nucleotide Polymorphism)第25页
        5.7 EST (Expressed Sequence Tags)第25页
        5.8 InDel (Insertion/Deletion Length Polymorphism)第25-26页
    6 水稻基因的图位克隆第26-27页
    7 金属-β-内酰胺酶和GT-1转录因子的研究进展第27-32页
        7.1 金属-β-内酰胺酶的相关研究第27-29页
        7.2 三螺旋转录因子相关研究第29-32页
    8 本研究的目的和意义第32-34页
第二章 材料与方法第34-48页
    1 实验材料第34-36页
        1.1 植物材料第34页
        1.2 主要试剂第34页
        1.3 菌株与载体第34-35页
        1.4 主要培养基第35-36页
        1.5 主要仪器设备第36页
    2 实验方法第36-48页
        2.1 叶绿素及类胡萝卜素含量的测定第36-37页
        2.2 透射电子显微镜的分析第37页
        2.3 DNA的提取第37-38页
        2.4 gry79突变基因的定位分析第38-39页
            2.4.1 PCR扩增体系及程序第38页
            2.4.2 初步定位第38-39页
            2.4.3 精细定位第39页
            2.4.4 遗传作图第39页
        2.5 精细定位区域ORFs的分析第39-41页
            2.5.1 目的片段的回收第40页
            2.5.2 大肠杆菌感受态细胞的制备第40-41页
            2.5.3 回收片段的连接与转化第41页
        2.6 GRY79基因的CDS的克隆第41-43页
            2.6.1 RNA的提取第41-42页
            2.6.2 RT-PCR第42页
            2.6.3 目的基因CDS的PCR扩增第42-43页
            2.6.4 目的片段的连接与转化第43页
        2.7 转基因互补实验第43-46页
            2.7.1 质粒的提取第43-44页
            2.7.2 农杆菌感受态细胞的制备和转化第44-45页
            2.7.3 互补载体的构建第45页
            2.7.4 遗传转化及转基因后代分子检测第45-46页
        2.8 荧光定量PCR第46页
        2.9 序列分析第46-48页
第三章 结果与分析第48-59页
    1 gry79突变体的表型特征观察及农艺性状和生理特性分析第48-50页
    2 gry79突变基因的遗传分析和精细定位第50-52页
    3 候选基因的遴选和测序验证第52-53页
    4 GRY79基因及编码蛋白的生物信息学分析第53-56页
    5 GRY79基因表达载体构建及转基因功能互补验证第56-57页
    6 GRY79基因在苗期的表达第57-59页
第四章 讨论第59-61页
    1 gry79是一个新的黄化转绿叶色突变体第59页
    2 GRY79编码一个推测的金属-β-内酰胺酶-三螺旋嵌合体蛋白第59-60页
    3 gry79可以作为标记性状应用于杂交育种中第60-61页
参考文献第61-73页
致谢第73-75页
在读期间发表论文及专利获得情况第75页

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