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隐孢子虫rP23间接ELISA诊断方法及体内瞬时转染系统的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-17页
第一章 隐孢子虫病研究概况第17-47页
   ·隐孢子虫病原学与分类学研究进展第17-26页
   ·隐孢子虫病的分子流行病学研究进展第26-32页
   ·隐孢子虫检测方法的研究进展第32-36页
   ·隐孢子虫体外培养研究进展第36-43页
   ·隐孢子虫转基因技术研究进展第43页
   ·隐孢子虫病的治疗与预防第43-44页
   ·展望第44-47页
第二章 隐孢子虫P23 基因的原核表达第47-67页
   ·实验材料第47-51页
     ·质粒与菌株第47页
     ·主要试剂第47-48页
     ·血清第48页
     ·主要溶液的配制第48-50页
     ·主要仪器第50-51页
   ·实验方法第51-62页
     ·重组质粒pMD18-T-P23 的鉴定第51-54页
     ·原核表达质粒pGEX-P23 的构建与鉴定第54-57页
     ·重组质粒pGEX-P23 的表达与表达产物的纯化第57-61页
     ·rP23 的Western blot分析第61-62页
   ·结果第62-66页
     ·重组质粒pMD18-T-P23 的鉴定第62-63页
     ·原核表达质粒pGEX-P23 的鉴定第63-64页
     ·重组质粒 pGEX-P23 转化菌的表达及表达产物的纯化第64-65页
     ·rP23 的 Western blot 分析结果第65-66页
   ·讨论第66-67页
第三章 隐孢子虫抗体间接ELISA检测方法的建立第67-83页
   ·材料与方法第67-69页
     ·质粒与菌株第67页
     ·主要试剂第67页
     ·血清及粪便样品第67-68页
     ·主要溶液的配制第68页
     ·主要仪器第68-69页
   ·实验方法第69-73页
     ·rP23-ELISA间接诊断方法的建立第69-70页
     ·田间样品检测第70-73页
   ·结果第73-80页
     ·间接ELISA检测方法的建立第73-78页
     ·田间样品检测及敏感性、特异性试验第78-80页
   ·讨论第80-83页
第四章 微小隐孢子虫在HCT-8 细胞上的培养研究第83-99页
   ·实验材料第83-85页
     ·细胞与菌株第83页
     ·主要试剂第83-84页
     ·主要溶液的配制第84页
     ·主要仪器第84-85页
   ·实验方法第85-89页
     ·HCT-8 细胞的培养第85页
     ·HCT-8 细胞培养方法的优化第85-86页
     ·微小隐孢子虫卵囊收集与纯化第86-87页
     ·微小隐孢子虫的体外培养第87页
     ·微小隐孢子虫体外培养各阶段形态的免疫荧光观察第87-89页
   ·实验结果第89-95页
     ·HCT-8 细胞培养方法的优化第89-92页
     ·微小隐孢子虫收集与纯化第92-93页
     ·微小隐孢子虫卵囊活力检测第93页
     ·微小隐孢子虫体外培养各阶段形态的免疫荧光观察第93-95页
   ·讨论第95-99页
第五章 微小隐孢子虫体内瞬时转染系统的初步研究第99-123页
   ·实验材料第99-101页
     ·细胞与菌株第99-100页
     ·主要试剂第100页
     ·主要溶液的配制第100-101页
     ·主要仪器第101页
   ·实验方法第101-115页
     ·启动子序列的克隆第101-106页
     ·EGFP表达盒转染质粒(含有TUB-3'UTR)的构建第106-109页
     ·EGFP表达盒转染载体(除TUB-3'UTR)的构建第109-111页
     ·电穿孔转染第111-113页
     ·转染隐孢子虫EGFP表达检测第113-115页
   ·结果第115-120页
     ·启动子序列的克隆第115-117页
     ·EGFP表达盒转染载体的构建第117页
     ·转染隐孢子虫EGFP表达检测第117-120页
   ·讨论第120-123页
第六章 全文结论第123-125页
 1.隐孢子虫 P23 基因的原核表达第123页
 2.隐孢子虫抗体间接 ELISA 诊断方法的建立第123页
 3.微小隐孢子虫在 HCT-8 细胞上的培养研究第123页
 4.微小隐孢子虫体内瞬时转染系统的初步研究第123-125页
参考文献第125-139页
致谢第139-140页
作者简历第140页

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