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日本血吸虫体被表膜蛋白分析及表膜蛋白SjNPP-5的初步研究

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 文献综述第15-27页
   ·前言第15-16页
   ·血吸虫体被结构与功能第16-18页
     ·血吸虫体被的结构第16-17页
     ·血吸虫体被的功能第17-18页
   ·重要的日本血吸虫体被表膜蛋白第18-21页
     ·四跨膜蛋白第18-19页
     ·Sj22.6第19页
     ·Sj29第19-20页
     ·SjTGR第20-21页
   ·蛋白质组学第21-24页
     ·蛋白质组学概述第21-22页
     ·蛋白质组学研究技术第22-24页
   ·血吸虫体被蛋白质组研究第24-27页
     ·曼氏血吸虫体被蛋白质组研究进展第24-25页
     ·日本血吸虫体被蛋白质组研究进展第25页
     ·日本血吸虫体被蛋白质组研究展望第25-27页
第二章 日本血吸虫体被表膜蛋白初步分析第27-43页
   ·引言第27页
   ·实验材料第27-29页
     ·实验动物第27页
     ·主要仪器第27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·试剂配制第28-29页
   ·实验方法第29-34页
     ·日本血吸虫童虫和成虫的收集第29-30页
     ·日本血吸虫体被表膜蛋白的生物素标记第30页
     ·共聚焦显微镜观察体被表膜蛋白生物素标记情况第30页
     ·日本血吸虫体被表膜蛋白的纯化第30-31页
     ·体被表膜蛋白的浓度测定第31-32页
     ·体被表膜蛋白的SDS-PAGE 电泳分离第32页
     ·胶内酶解第32-33页
     ·体被表膜蛋白的shotgun LC-MS/MS 分析第33-34页
     ·蛋白信息的初步分析第34页
   ·结果第34-40页
     ·共聚焦显微镜观察生物素标记体被表膜蛋白情况第34-36页
     ·体被表膜蛋白的定量结果第36页
     ·体被表膜蛋白的SDS-PAGE 电泳分离第36-38页
     ·体被表膜蛋白的shotgun LC-MS/MS 分析第38-40页
   ·讨论第40-43页
第三章 日本血吸虫体被表膜蛋白磷酸二酯酶-5(NPP-5)基因的研究第43-62页
   ·引言第43页
   ·实验材料第43-46页
     ·cDNA 文库、质粒、菌种、血清、寄生虫和实验动物第43页
     ·主要试剂和酶第43-44页
     ·主要试剂配制第44-45页
     ·实验仪器第45-46页
   ·实验方法第46-48页
     ·SjNPP-5 基因的克隆及其生物信息学分析第46页
     ·荧光实时定量分析SjNPP-5 在不同发育阶段血吸虫的转录水平第46页
     ·重组质粒pET32a(+)-SjNPP-5 的构建及鉴定第46-47页
     ·重组质粒pET32a(+)-SjNPP-5 在大肠杆菌中的表达及重组蛋白的纯化第47页
     ·Western blotting 检测重组蛋白的抗原性第47页
     ·免疫荧光染色实验观察SjNPP-5 在虫体的组织定位第47页
     ·重组蛋白SjNPP-5 在小鼠体内诱导的免疫保护效果第47-48页
   ·结果第48-60页
     ·SjNPP-5 基因的克隆及其生物信息学分析第48-51页
     ·SjNPP-5 基因在不同时期虫体内的转录水平分析第51-52页
     ·重组质粒pET32a(+)-SjNPP-5 的构建及鉴定第52-53页
     ·SjNPP-5 在大肠杆菌中的表达及其重组蛋白的纯化第53页
     ·表达产物的抗原性分析第53-54页
     ·SjNPP-5 蛋白在虫体的组织定位第54-57页
     ·rSjNPP-5 在小鼠体内诱导的免疫保护效果第57页
     ·免疫小鼠血清抗SjNPP-5-pET32a(+) 特异性抗体的检测第57-59页
     ·免疫小鼠血清IFN-γ和IL-4 水平检测第59-60页
   ·讨论第60-62页
第四章 全文总结第62-63页
 1. 日本血吸虫体被表膜蛋白分离与初步分析第62页
 2. 日本血吸虫体被表膜蛋白磷酸二酯酶-5(SjNPP-5)的研究第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

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