| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 组织工程简介 | 第11-12页 |
| 1.2 种子细胞 | 第12-13页 |
| 1.2.1 成体细胞在组织工程中的应用 | 第12页 |
| 1.2.2 胚胎干细胞 | 第12-13页 |
| 1.2.3 成体干细胞 | 第13页 |
| 1.3 生物支架材料 | 第13-15页 |
| 1.4 生物材料理化性质对细胞行为的影响 | 第15-21页 |
| 1.4.1 干细胞微环境的概念 | 第15-16页 |
| 1.4.2 支架材料化学性质调控细胞行为 | 第16-18页 |
| 1.4.2.1 简单化学基团 | 第16-17页 |
| 1.4.2.2 生物活性大分子 | 第17页 |
| 1.4.2.3 材料化学性质调控细胞行为的机理 | 第17-18页 |
| 1.4.3 支架材料力学性质对细胞行为的影响 | 第18-19页 |
| 1.4.4 支架材料拓扑结构对细胞行为的影响 | 第19-21页 |
| 1.4.5 多因素协同影响细胞行为的研究 | 第21页 |
| 1.5 课题的提出、目的和意义 | 第21-23页 |
| 第2章 PCL膜材料的化学修饰及其对hMSCs贴附和生长的影响 | 第23-38页 |
| 2.1 概述 | 第23-24页 |
| 2.2 材料与方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 PCL膜的制备 | 第24页 |
| 2.2.2 PCL膜的水解处理 | 第24页 |
| 2.2.3 PCL膜的氨解处理 | 第24页 |
| 2.2.4 接触角测定 | 第24页 |
| 2.2.5 SEM | 第24页 |
| 2.2.6 茚三酮染色及氨基浓度测定 | 第24-25页 |
| 2.2.7 FITC染色 | 第25页 |
| 2.2.8 X射线光电子能谱 | 第25页 |
| 2.2.9 hMSCs的分离 | 第25页 |
| 2.2.10 细胞的冻存与复苏 | 第25-26页 |
| 2.2.11 薄膜的预处理 | 第26页 |
| 2.2.12 薄膜材料表面细胞培养 | 第26页 |
| 2.2.13 蛋白吸附测定 | 第26页 |
| 2.2.14 CCK-8 检测 | 第26-27页 |
| 2.2.15 细胞骨架染色 | 第27页 |
| 2.2.16 细胞面积计算 | 第27页 |
| 2.2.17 统计学分析 | 第27页 |
| 2.3 结果与材论 | 第27-36页 |
| 2.3.1 PCL薄膜的制备 | 第27-28页 |
| 2.3.2 水解条件对PCL薄膜的影响 | 第28-30页 |
| 2.3.3 氨解条件对PCL膜的影响 | 第30-32页 |
| 2.3.4 化学修饰对hMSCs在膜上贴附和生长的影响 | 第32-36页 |
| 2.3.4.1 应用于细胞培养的PCL薄膜的表征 | 第32-33页 |
| 2.3.4.2 化学修饰P化薄膜对hMSCs贴附的影响 | 第33-35页 |
| 2.3.4.3 化学修饰PCL薄膜对hMSCs生长的影响 | 第35-36页 |
| 2.4 本章小结 | 第36-38页 |
| 第3章 PCL多孔支架表面化学和孔径协同影响hMSCs生长分化的研究 | 第38-54页 |
| 3.1 概述 | 第38-39页 |
| 3.2 材料与方法 | 第39-43页 |
| 3.2.1 石蜡微球的制备 | 第39页 |
| 3.2.2 PCL支架的制备 | 第39-40页 |
| 3.2.3 支架孔隙率的测定 | 第40页 |
| 3.2.4 PCL支架的水解处理 | 第40页 |
| 3.2.5 PCL支架的碱解处理 | 第40页 |
| 3.2.6 接触角测定 | 第40页 |
| 3.2.7 SEM观察 | 第40-41页 |
| 3.2.8 茚三酮染色 | 第41页 |
| 3.2.9 FITC 染色 | 第41页 |
| 3.2.10 支架预处理 | 第41页 |
| 3.2.11 细胞接种与培养 | 第41页 |
| 3.2.12 蛋白吸附测定 | 第41页 |
| 3.2.13 CCK-8 检测 | 第41页 |
| 3.2.14 细胞骨架染色 | 第41-42页 |
| 3.2.15 细胞死活染色 | 第42页 |
| 3.2.16 Ca~(2+)含量的测定 | 第42页 |
| 3.2.17 茜素红染色 | 第42页 |
| 3.2.18 DNA 和 GAG 测定 | 第42-43页 |
| 3.2.19 番红O染色 | 第43页 |
| 3.2.20 阿利新蓝染色 | 第43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-53页 |
| 3.3.1 不同浓度分散剂对制孔剂石蜡微球的影响 | 第43-45页 |
| 3.3.2 PCL支架的表征 | 第45-48页 |
| 3.3.3 hMSCs在支架上生长情况 | 第48-51页 |
| 3.3.4 hMSCs在支架上成软骨分化 | 第51-53页 |
| 3.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 第4章 软骨细胞接种密度和多孔支架孔径对软骨细胞表型的影响 | 第54-66页 |
| 4.1 概述 | 第54页 |
| 4.2 材料与方法 | 第54-56页 |
| 4.2.1 兔软骨细胞的分离 | 第55页 |
| 4.2.2 软骨细胞传代 | 第55页 |
| 4.2.3 三维多孔支架的预处理 | 第55页 |
| 4.2.4 细胞接种 | 第55页 |
| 4.2.5 CCK-8检测 | 第55页 |
| 4.2.6 细胞死活染色 | 第55页 |
| 4.2.7 SEM观察 | 第55页 |
| 4.2.8 DNA和GAG测定 | 第55-56页 |
| 4.2.9 冷冻切片 | 第56页 |
| 4.2.10 H&E染色 | 第56页 |
| 4.2.11 番红O染色 | 第56页 |
| 4.2.12 阿利新蓝染色 | 第56页 |
| 4.2.13 天狼猩红染色 | 第56页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第56-64页 |
| 4.3.1 P_1rACs在PCL支架上的生长 | 第56-59页 |
| 4.3.2 DNA、GAG及GAG/DNA含量 | 第59-60页 |
| 4.3.3 SEM观察 | 第60-62页 |
| 4.3.4 组织学分析 | 第62-64页 |
| 4.4 本章小结 | 第64-66页 |
| 第5章 全文总结与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
