| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 符号与缩略语说明 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 第一部分 文献综述部分 拟除虫菊酯类农药污染及其微生物降解研究 | 第16-43页 |
| 1 拟除虫菊酯类农药简介及致毒机理 | 第16-19页 |
| 1.1 拟除虫菊酯类农药简介 | 第16-18页 |
| 1.2 拟除虫菊酯类农药的致毒机理 | 第18-19页 |
| 2 拟除虫菊酯类农药对非靶标生物的危害 | 第19-22页 |
| 2.1 拟除虫菊酯类农药对水生生物的危害 | 第19-21页 |
| 2.2 拟除虫菊酯类农药对哺乳动物和人类健康的危害 | 第21-22页 |
| 3 拟除虫菊酯类农药在环境中的残留 | 第22-23页 |
| 4 拟除虫菊酯类农药在环境中的降解 | 第23-32页 |
| 4.1 光催化降解 | 第23-24页 |
| 4.2 化学降解 | 第24-26页 |
| 4.3 拟除虫菊酯类农药微生物降解研究 | 第26-32页 |
| 5 拟除虫菊酯微生物降解研究和应用存在的问题及发展方向 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-43页 |
| 第二部分 实验部分 | 第43-135页 |
| 第一章 菊酯降解菌JZ-2的分离、鉴定和降解特性研究 | 第43-84页 |
| 第一节 拟除虫菊酯降解菌的分离筛选与生长特性研究 | 第43-54页 |
| 1 材料与方法 | 第43-46页 |
| 1.1 菌株、培养基与试剂 | 第43页 |
| 1.2 降解菌株的筛选分离 | 第43-44页 |
| 1.3 降解菌株的培养特征及生理生化鉴定 | 第44页 |
| 1.4 降解菌株的16s rDNA基因序列的测定 | 第44-46页 |
| 1.5 菌体培养与生长量的测定 | 第46页 |
| 1.6 甲氰菊酯含量的提取与测定方法 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-54页 |
| 2.1 环境样品中甲氰菊酯降解菌株的分离筛选 | 第46-48页 |
| 2.2 降解菌株JZ-2的初步鉴定 | 第48-49页 |
| 2.3 环境条件对菌株JZ-2生长的影响 | 第49-53页 |
| 2.4 菌株JZ-2对抗生素的抗性 | 第53-54页 |
| 第二节 拟除虫菊酯降解菌JZ-2的分类地位研究 | 第54-71页 |
| 1 材料与方法 | 第54-60页 |
| 1.1 菌株、培养基及试剂 | 第54-55页 |
| 1.2 API鉴定步骤 | 第55页 |
| 1.3 Biolog鉴定步骤 | 第55-56页 |
| 1.4 多胺与极性酯组分分析 | 第56-57页 |
| 1.5 醌组分分析 | 第57页 |
| 1.6 细胞脂肪酸分析 | 第57-58页 |
| 1.7 菌株基因型特性分析 | 第58-60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-71页 |
| 2.1 16S rDNA系统发育分析 | 第60-61页 |
| 2.2 生理生化分析 | 第61-64页 |
| 2.3 多胺组分结果分析 | 第64-65页 |
| 2.4 极性酯组分分析结果 | 第65-66页 |
| 2.5 菌株醌组分分析 | 第66-67页 |
| 2.6 细胞脂肪酸分析 | 第67-69页 |
| 2.7 菌株G+C mol%含量测定 | 第69页 |
| 2.8 DNA-DNA同源性分析 | 第69-71页 |
| 第三节 甲氰菊酯降解菌JZ-2的降解特性研究 | 第71-78页 |
| 1 材料与方法 | 第71-73页 |
| 1.1 菌株、培养基与试剂 | 第71页 |
| 1.2 仪器 | 第71页 |
| 1.3 菌体生长量的测定 | 第71页 |
| 1.4 菌株JZ-2对拟除虫菊酯类农药降解特性研究 | 第71-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-78页 |
| 2.1 菌株JZ-2以甲氰菊酯为唯一碳源的生长及降解代谢曲线 | 第73页 |
| 2.2 温度对菌株JZ-2降解甲氰菊酯的影响 | 第73-74页 |
| 2.3 pH值对菌株JZ-2降解甲氰菊酯的影响 | 第74-75页 |
| 2.4 接种量对菌株JZ-2降解甲氰菊酯的影响 | 第75页 |
| 2.5 农药初始浓度对菌株JZ-2降解甲氰菊酯的影响 | 第75-76页 |
| 2.6 添加金属离子对菌株JZ-2降解甲氰菊酯的影响 | 第76页 |
| 2.7 菌株JZ-2对常见拟除虫菊酯的降解 | 第76-78页 |
| 本章讨论 | 第78-79页 |
| 本章小结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 第二章 菊酯水解酶纯化和酶学特性研究 | 第84-116页 |
| 第一节 菊酯降解酶定性检测方法和粗酶液反应体系研究 | 第84-93页 |
| 1 材料与方法 | 第84-87页 |
| 1.1 菌种、培养基与试剂 | 第84-85页 |
| 1.2 主要仪器 | 第85页 |
| 1.3 实验方法 | 第85-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-93页 |
| 2.1 粗酶液酶活定性检测方法的建立 | 第87-88页 |
| 2.2 菌株生长曲线和产酶曲线 | 第88页 |
| 2.3 粗酶制备方法提取效率的比较 | 第88-89页 |
| 2.4 菊酯降解酶的诱导情况 | 第89-90页 |
| 2.5 降解酶的定域 | 第90-91页 |
| 2.6 菊酯降解酶催化的反应 | 第91-93页 |
| 第二节 甲氰菊酯水解酶的分离纯化 | 第93-104页 |
| 1 材料与方法 | 第93-97页 |
| 1.1 菌种、培养基、粗酶液制备方法、酶活反应体系 | 第93页 |
| 1.2 试验用溶液、试剂及仪器设备 | 第93页 |
| 1.3 菊酯降解酶性质的确定 | 第93-94页 |
| 1.4 酯酶酶谱分析和水解酶分子量的初步判断 | 第94页 |
| 1.5 菊酯水解酶的分离纯化 | 第94-96页 |
| 1.6 凝胶过滤层析法测定活性水解酶的分子量 | 第96-97页 |
| 2 结果与分析 | 第97-104页 |
| 2.1 酯酶酶谱分析和水解酶分子量的初步判断 | 第97-98页 |
| 2.2 菊酯水解酶的分离纯化 | 第98-103页 |
| 2.3 凝胶过滤层析法测定活性水解酶PytH的分子量 | 第103-104页 |
| 第三节 甲氰菊酯水解酶酶学特性研究 | 第104-112页 |
| 1 材料与方法 | 第104-106页 |
| 1.1 甲氰菊酯水解酶来源 | 第104页 |
| 1.2 试验用试剂、溶液及仪器设备 | 第104页 |
| 1.3 酶的热稳定性与最适温度 | 第104页 |
| 1.4 酶的酸碱稳定性与最适pH | 第104-105页 |
| 1.5 金属离子、表面活性剂和酶抑制剂对酶活性的影响 | 第105页 |
| 1.6 酶的动力学参数与底物特异性测定 | 第105页 |
| 1.7 酶的等电点测定 | 第105页 |
| 1.8 蛋白转膜与NH_2-氨基酸测序 | 第105-106页 |
| 2 结果与分析 | 第106-112页 |
| 2.1 酶的热稳定性与最适温度 | 第106-107页 |
| 2.2 酶的酸碱稳定性与最适pH | 第107-108页 |
| 2.3 金属离子、表面活性剂和酶抑制剂对酶活性的影响 | 第108-109页 |
| 2.4 酶的动力学参数与底物特异性研究 | 第109-110页 |
| 2.5 酶的等电点测定 | 第110-111页 |
| 2.6 蛋白转膜与NH_2-氨基酸测序 | 第111-112页 |
| 本章讨论 | 第112-114页 |
| 本章小结 | 第114页 |
| 参考文献 | 第114-116页 |
| 第三章 甲氰菊酯降解菌JZ-2降解途径研究与水体菊酯污染修复探索 | 第116-135页 |
| 第一节 范氏鞘酯菌JZ-2降解产物分析和代谢途径初步研究 | 第116-125页 |
| 1 材料与方法 | 第116-118页 |
| 1.1 材料 | 第116页 |
| 1.2 甲氰菊酯的降解产物和降解途径分析 | 第116-118页 |
| 2 结果与分析 | 第118-125页 |
| 2.1 气液相代谢产物检测结果与质谱鉴定 | 第118-122页 |
| 2.2 范氏鞘酯菌JZ-2对部分芳香族化合物的降解与粗酶液酶活检测 | 第122-125页 |
| 第二节 范氏鞘酯菌JZ-2对甲氰菊酯污染的水体的生物修复 | 第125-131页 |
| 1 材料与方法 | 第125-127页 |
| 1.1 试剂 | 第125页 |
| 1.2 培养基与培养条件 | 第125页 |
| 1.3 试验水体和污泥 | 第125页 |
| 1.4 甲氰菊酯污染的模拟与范氏鞘酯菌JZ-2接种 | 第125-126页 |
| 1.5 污泥相和水相中甲氰菊酯的提取与测定 | 第126-127页 |
| 2 结果与分析 | 第127-131页 |
| 2.1 范氏鞘酯菌JZ-2对灭菌和未灭菌污泥中甲氰菊酯的降解 | 第127-128页 |
| 2.2 范氏鞘酯菌JZ-2对灭菌和未灭菌水体甲氰菊酯的降解 | 第128页 |
| 2.3 甲氰菊酯在泥-水混合相中的分配和生物降解 | 第128-131页 |
| 本章讨论 | 第131页 |
| 本章小结 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-135页 |
| 全文总结 | 第135-137页 |
| 论文创新点总结 | 第137-139页 |
| 附录1 培养基及试剂配方 | 第139-142页 |
| 附录2 16s rDNA序列 | 第142-143页 |
| 附录3 范氏鞘酯菌JZ-2的菊酯水解酶基因序列 | 第143-145页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第145-147页 |
| 致谢 | 第147页 |
