摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略语中英文对照 | 第10-11页 |
第一章 综述 | 第11-22页 |
1.1 小菜蛾概述 | 第11页 |
1.2 热休克蛋白概述 | 第11-12页 |
1.3 HSP90基因特征与分类 | 第12-17页 |
1.3.1 HSP90表达的调控机制 | 第13-14页 |
1.3.2 HSP90的生物学功能 | 第14-17页 |
1.3.2.1 细胞周期调控中的作用 | 第14页 |
1.3.2.2 HSP90在类固醇激素中发挥效应的作用 | 第14-15页 |
1.3.2.3 参与免疫和免疫调节作用 | 第15-16页 |
1.3.2.4 具有转运蛋白的功能 | 第16-17页 |
1.4 HSP20基因特征与分类 | 第17-20页 |
1.4.1 HSP20表达调控机制 | 第17-18页 |
1.4.2 HSP20的生物学功能 | 第18-20页 |
1.4.2.1 作为重要的分子伴侣,其参与细胞骨架稳定 | 第18-19页 |
1.4.2.2 与细胞抗凋亡有关 | 第19-20页 |
1.4.2.3 sHSP与多种临床疾病关系密切 | 第20页 |
1.5 昆虫热休克蛋白的研究现状与生物学意义 | 第20-22页 |
第二章 HSP90和HSP20基因克隆 | 第22-44页 |
2.1 材料与方法 | 第22页 |
2.1.1 虫源及温度预处理方法 | 第22页 |
2.1.2 药品试剂仪器 | 第22页 |
2.1.2.1 生化试剂 | 第22页 |
2.1.2.2 主要仪器设备 | 第22页 |
2.2 药品配制 | 第22-23页 |
2.3 克隆HSP90和HSP20基因 | 第23-28页 |
2.3.1 引物设计 | 第23-24页 |
2.3.2 提取总RNA | 第24-25页 |
2.3.3 cDNA第一链合成 | 第25页 |
2.3.4 PCR | 第25-28页 |
2.4 结果与分析 | 第28-44页 |
2.4.1 hsp90和hsp20 ORF的克隆 | 第29-33页 |
2.4.2 hsp90和hsp20基因序列分析 | 第33-38页 |
2.4.2.1 HSP90的氨基酸组成 | 第34-36页 |
2.4.2.2 HSP20的氨基酸组成 | 第36-38页 |
2.4.3 hsp90和hsp20基因多序列比对及进化树分析 | 第38-44页 |
2.4.3.1 hsp90基因多序列比对及进化树分析 | 第38-41页 |
2.4.3.2 hsp20基因多序列比对及进化树分析 | 第41-44页 |
第三章 小菜蛾HSP90和HSP20基因热激表达分析 | 第44-53页 |
3.1 材料与方法 | 第44-48页 |
3.1.1 材料 | 第44页 |
3.1.2 药品、试剂及仪器 | 第44-45页 |
3.1.2.1 生化试剂 | 第44-45页 |
3.1.2.2 主要仪器 | 第45页 |
3.1.3 hsp90和hsp20 mRNA表达量测定 | 第45-48页 |
3.1.3.1 温度处理 | 第45页 |
3.1.3.2 小菜蛾总RNA的提取 | 第45页 |
3.1.3.3 cDNA第一链的合成 | 第45-46页 |
3.1.3.4 荧光定量引物设计 | 第46页 |
3.1.3.5 引物特异性检测 | 第46-47页 |
3.1.3.5.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第46-47页 |
3.1.3.5.2 融解曲线检测 | 第47页 |
3.1.3.6 制作内参基因与目的基因标准曲线 | 第47页 |
3.1.3.7 目的基因表达量的测定 | 第47-48页 |
3.2 结果与分析 | 第48-53页 |
3.2.1 荧光定量PCR引物特异性检测 | 第48-49页 |
3.2.1.1 融解曲线分析 | 第48-49页 |
3.2.2 制作内参基因与目的基因标准曲线 | 第49-50页 |
3.2.3 小菜蛾hsp90基因热激后mRNA表达量分析 | 第50-51页 |
3.2.4 小菜蛾hsp20基因热激后mRNA表达量分析 | 第51-53页 |
第四章 总结 | 第53-55页 |
4.1 HSP90和HSP20基因的克隆 | 第53-54页 |
4.2 HSP90和HSP20热激后MRNA表达量分析 | 第54-55页 |
存在问题与展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61页 |