| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1 短短芽胞杆菌的生物学特性 | 第10页 |
| 1.1 形态学特性 | 第10页 |
| 1.2 分类 | 第10页 |
| 2 短短芽胞杆菌功能基因的研究 | 第10-13页 |
| 2.1 全基因组研究 | 第10页 |
| 2.2 巯基-二硫化物氧化还原酶基因bdb | 第10-11页 |
| 2.3 α-乙酰乳酸脱羧酶基因aldB | 第11页 |
| 2.4 耐碱性木聚糖酶基因xylB | 第11页 |
| 2.5 短杆菌酪肽生物合成相关基因 | 第11-12页 |
| 2.6 细胞壁基因 | 第12-13页 |
| 2.7 dnaK基因 | 第13页 |
| 2.8 hps和phi基因 | 第13页 |
| 3 短短芽胞杆菌的应用 | 第13-15页 |
| 3.1 作为分泌表达外源蛋白的宿主 | 第13-14页 |
| 3.2 生物防治 | 第14页 |
| 3.3 微生物降解 | 第14页 |
| 3.4 其它方面的应用 | 第14-15页 |
| 4 短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX研究现状 | 第15页 |
| 5 SOD酶基因研究进展 | 第15页 |
| 6 研究意义 | 第15-17页 |
| 第二章 短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX胞内物质提取条件的响应面法优化 | 第17-26页 |
| 1 材料与方法 | 第17-18页 |
| 1.1 材料 | 第17页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第17页 |
| 1.1.2 试剂与仪器 | 第17页 |
| 1.2 方法 | 第17-18页 |
| 1.2.1 单因素条件摸索 | 第18页 |
| 1.2.2 细胞破碎情况测定 | 第18页 |
| 1.2.3 响应面试验设计 | 第18页 |
| 2 结果与分析 | 第18-24页 |
| 2.1 不同超声条件对其吸光值的影响 | 第18-20页 |
| 2.2 不同超声波条件下所得物质质量的显著差异分析 | 第20-21页 |
| 2.2.1 超声时间 | 第20页 |
| 2.2.2 超声功率 | 第20-21页 |
| 2.2.3 料液比对 | 第21页 |
| 2.3 响应面法优化超声波破碎条件及结果 | 第21-24页 |
| 2.3.1 响应面试验设计 | 第21-22页 |
| 2.3.2 二次回归模型的建立 | 第22页 |
| 2.3.3 回归模型方差分析 | 第22-23页 |
| 2.3.4 响应面的分析 | 第23-24页 |
| 3 讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX胞内物质分离及鉴定 | 第26-39页 |
| 1 材料与方法 | 第26页 |
| 1.1 材料 | 第26页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第26页 |
| 1.1.2 试剂与仪器 | 第26页 |
| 1.2 方法 | 第26页 |
| 1.2.1 菌体收集 | 第26页 |
| 1.2.2 菌体破碎及胞内物质提取 | 第26页 |
| 1.2.3 GC-MS分析 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-37页 |
| 2.1 不同超声时间所得物质的成分分析 | 第26-30页 |
| 2.2 不同超声功率所得物质的成分分析 | 第30-33页 |
| 2.3 不同料液比所得物质的成分分析 | 第33-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX中SOD基因克隆及表达 | 第39-58页 |
| 1 材料与方法 | 第39-46页 |
| 1.1 材料 | 第39-42页 |
| 1.1.1 供试菌株与质粒 | 第39-40页 |
| 1.1.2 试剂 | 第40-42页 |
| 1.1.3 试验器材 | 第42页 |
| 1.2 方法 | 第42-46页 |
| 1.2.1 SOD基因克隆 | 第42-44页 |
| 1.2.2 短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX中SOD基因一级结构预测及分析 | 第44页 |
| 1.2.3 pET-28a/SOD重组质粒载体构建 | 第44-45页 |
| 1.2.4 pET-28a/SOD重组质粒载体在大肠杆菌BL-21中表达及检测 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-57页 |
| 2.1 SOD基因克隆 | 第46-51页 |
| 2.1.1 CTAB法提取基因组DNA | 第46页 |
| 2.1.2 SOD开放阅读框的获得 | 第46-47页 |
| 2.1.3 SOD基因产物回收 | 第47-48页 |
| 2.1.4 SOD基因克隆及阳性克隆子的验证 | 第48-49页 |
| 2.1.5 阳性克隆子测序结果及在线比对 | 第49-51页 |
| 2.2 SOD蛋白一级结构预测及分析 | 第51-54页 |
| 2.2.1 SOD酶蛋白一级结构在线比对 | 第51-52页 |
| 2.2.2 短短芽胞杆菌中SOD酶在线比对 | 第52页 |
| 2.2.3 SOD酶理化性质和一级结构分析 | 第52-53页 |
| 2.2.4 SOD蛋白质结构域分析 | 第53-54页 |
| 2.3 pET-28a/SOD重组质粒构建 | 第54-55页 |
| 2.3.1 pET-28a/SOD重组质粒连接及转化 | 第54-55页 |
| 2.3.2 pET-28a/SOD重组质粒验证 | 第55页 |
| 2.4 SOD在大肠杆菌BL-21中的表达 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 MnSOD原核表达条件优化 | 第58-71页 |
| 1 材料与方法 | 第58-61页 |
| 1.1 材料 | 第58页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第58页 |
| 1.1.2 试剂与仪器 | 第58页 |
| 1.2 方法 | 第58-61页 |
| 1.2.1 蛋白质标准曲线的绘制 | 第58-59页 |
| 1.2.2 蛋白浓度的测定 | 第59页 |
| 1.2.3 氮蓝四唑法测SOD酶活性 | 第59-60页 |
| 1.2.4 重组蛋白表达单因素条件优化 | 第60页 |
| 1.2.5 最陡爬坡试验 | 第60-61页 |
| 1.2.6 响应面试验 | 第61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-70页 |
| 2.1 蛋白质标准曲线绘制 | 第61-62页 |
| 2.2 重组蛋白表达单因素条件优化 | 第62-66页 |
| 2.2.1 诱导温度对SOD蛋白表达的影响 | 第62-63页 |
| 2.2.2 IPTG浓度对SOD蛋白表达的影响 | 第63-64页 |
| 2.2.3 诱导前菌体浓度对SOD蛋白表达的影响 | 第64页 |
| 2.2.4 亚铁离子浓度对SOD蛋白表达影响 | 第64-65页 |
| 2.2.5 Mn离子浓度对SOD蛋白表达影响 | 第65页 |
| 2.2.6 诱导时间对SOD蛋白表达影响 | 第65-66页 |
| 2.3 重组蛋白表达的最陡爬坡实验 | 第66-67页 |
| 2.4 中心组合试验 | 第67-70页 |
| 2.4.1 二次回归模型的建立 | 第67-68页 |
| 2.4.2 回归模型方差分析 | 第68-69页 |
| 2.4.3 响应面的分析 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-71页 |
| 第六章 结论与展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 个人简历 | 第77-79页 |
