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大肠杆菌和沙门氏菌定量检测方法的建立和试剂盒的研制

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
符号与缩略语说明第10-11页
前言第11-13页
综述第13-31页
 一、土壤中病原微生物的来源第13-15页
  1、禽畜粪便第13-14页
  2、污水灌溉第14-15页
 二、本研究所涉及的病原菌简介第15-19页
  1、大肠杆菌第15-17页
  2、沙门氏菌第17-19页
 三、病原微生物检测方法研究进展第19-26页
  1、传统的检测方法第19-20页
  2、免疫学上的方法第20-21页
  3、分子生物学上的方法第21-24页
  4、联合检测方法第24-26页
 参考文献第26-31页
第一章 病原微生物定量检测方法的建立第31-47页
 1. 材料与方法第32-36页
   ·材料第32-33页
   ·MPN计数法与平板菌落计数法计数结果相关性研究第33页
   ·大肠杆菌和沙门氏菌定量检测方法的建立第33-35页
   ·该方法的评价第35-36页
 2. 结果与分析第36-44页
   ·大肠杆菌稀释涂布平板计数法和MPN计数法相关性实验结果第36-38页
   ·沙门氏菌稀释涂布平板计数法和MPN计数法相关性实验结果第38-39页
   ·PCR反应模板的制备第39-42页
   ·引物特异性检测第42-43页
   ·灵敏度和检测限检测第43-44页
 3、讨论第44-46页
 参考文献第46-47页
第二章 、病原微生物定量检测试剂盒的研制第47-55页
 1、材料与方法第47-49页
   ·试剂盒的组成第47页
   ·定量检测试剂盒使用说明第47-48页
   ·试剂盒灵敏度和保存期检验第48-49页
 2、结果与分析第49-51页
   ·试剂盒灵敏度和保存期检验第49-51页
 3、讨论第51-53页
 参考文献第53-55页
第三章 病原微生物定量检测试剂盒的应用第55-69页
 1. 材料与方法第55-59页
   ·样品的采集及相关信息第55-56页
   ·土壤理化性质的测定及微生物计数第56页
   ·PCR方法定性检测土壤中大肠杆菌第56-59页
   ·试剂盒法定量检测土壤中病原微生物第59页
 2. 结果与分析第59-66页
   ·理化性质的测定第59-60页
   ·细菌真菌放线菌的计数第60页
   ·土壤总DNA的提取与纯化究第60-61页
   ·大肠杆菌和沙门氏菌特异性引物扩增第61-62页
   ·PCR产物的纯化回收第62页
   ·扩增产物的TA克隆第62-63页
   ·克隆转化子的测序第63页
   ·实际土壤样品的MPN-PCR定量检测第63-66页
 3. 讨论第66-67页
 参考文献第67-69页
全文总结第69-71页
创新之处第71-73页
附录:文中所用的培养基和试剂配方第73-75页
致谢第75页

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