摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
符号与缩略语说明 | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
一、土壤酶研究进展 | 第12-13页 |
1 土壤酶的来源、存在状态 | 第12页 |
2 影响土壤酶活性的因素 | 第12-13页 |
·土壤理化性质对土壤酶的影响 | 第12-13页 |
二、元蛋白质组学:研究土壤微生物生态功能的一种新方法 | 第13-24页 |
1 元蛋白质组学的产生背景 | 第14页 |
2 元蛋白质组学的研究现状 | 第14-16页 |
3 元蛋白质组学的研究策略 | 第16-21页 |
4 存在的问题及展望 | 第21-24页 |
参考文献 | 第24-28页 |
第二章 土壤酶活性的测定 | 第28-36页 |
1 材料与方法 | 第28-30页 |
·研究区域概况 | 第28页 |
·土壤样品采集 | 第28页 |
·土壤理化性质测定 | 第28-29页 |
·常规稀释涂布平板法计数测定微生物数量 | 第29页 |
·脲酶活性测定方法(urease,水解酶) | 第29页 |
·蛋白酶活性测定方法(protease,水解酶) | 第29页 |
·蔗糖酶活性测定(invertase,水解酶) | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-33页 |
·土壤微生物计数 | 第30页 |
·土样样品的理化性质 | 第30页 |
·土壤酶活性测定 | 第30-33页 |
3 小结 | 第33-35页 |
参考文献 | 第35-36页 |
第三章 土壤微生物总蛋白的提取及纯化 | 第36-46页 |
1 材料与方法 | 第36-40页 |
·研究区域概况及土壤样品采集 | 第36页 |
·土壤理化性质测定 | 第36-37页 |
·主要仪器和试剂 | 第37页 |
·利用密度梯度离心法提取土壤中的菌体 | 第37页 |
·常规稀释涂布平板法计数测定微生物数量 | 第37页 |
·DAPI荧光计数测定微生物数量 | 第37-38页 |
·土壤微生物总蛋白提取及纯化 | 第38页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第38-40页 |
2 结果与分析 | 第40-43页 |
·GFP标记大肠杆菌荧光显微镜计数标准曲线 | 第40-41页 |
·土壤微生物及提取菌体的计数 | 第41-42页 |
·土壤微生物总蛋白提取及纯化 | 第42-43页 |
·SDS-PAGE | 第43页 |
3 本章小结 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-46页 |
第四章 2D-PAGE及质谱鉴定 | 第46-62页 |
1 仪器与试剂 | 第46-47页 |
·仪器 | 第46-47页 |
·试剂 | 第47页 |
·溶液配制 | 第47页 |
2 材料与方法 | 第47-50页 |
·微生物总蛋白提取及纯化 | 第47页 |
·蛋白质双向凝胶电泳 | 第47-49页 |
·质谱分析 | 第49-50页 |
·数据库查询 | 第50页 |
3 结果与分析 | 第50-58页 |
·Bradford法蛋白定量 | 第50-51页 |
·2D-PAGE | 第51-52页 |
·凝胶图像扫描及软件分析比较 | 第52-54页 |
·蛋白质肽质量指纹图谱 | 第54-58页 |
4 本章小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
全文总结 | 第62-64页 |
创新之处 | 第64-66页 |
附录 文中所用的培养基和试剂配方 | 第66-70页 |
致谢 | 第70页 |