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柑橘采后生防菌柠檬形克勒克酵母基因组学分析及青绿霉病原菌特异性检测与防治

摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略词表第15-17页
第一章 文献综述第17-38页
    1 基因组学第17-22页
        1.1 基因组测序第17-19页
            1.1.1 基因组测序的发展第17-18页
            1.1.2 高通量测序第18页
            1.1.3 高通量测序平台第18-19页
        1.2 微生物基因组学第19-22页
            1.2.1 我国微生物基因组的发展第20-21页
            1.2.2 研究方法与应用第21-22页
    2 谱系特有基因第22-27页
        2.1 谱系特有基因研究进展第22-27页
            2.1.1 鉴定方法第23-24页
            2.1.2 基因结构特征第24-25页
            2.1.3 基因功能分析第25页
            2.1.4 基因进化起源分析第25-26页
            2.1.5 基因表达分析第26-27页
    3 柠檬形克勒克酵母第27-31页
        3.1 生物防治第27-31页
            3.1.1 柠檬形克勒克酵母的生防作用第30页
            3.1.2 柠檬形克勒克酵母的生防机理第30-31页
    4 柑橘采后真菌病害第31-34页
        4.1 柑橘青绿霉病第31-32页
        4.2 真菌病原物的鉴定方法第32-34页
            4.2.1 基于保守基因开发特异引物第33-34页
    5 生防细菌第34-37页
        5.1 生防细菌在农业领域的应用第35页
        5.2 生防细菌的抑菌机理第35-37页
    6 本研究的目的和意义第37-38页
第二章 柠檬形克勒克酵母全基因组测序和基因组特征分析第38-67页
    1 引言第38页
    2 材料与方法第38-46页
        2.1 实验材料第38-40页
            2.1.1 菌株和培养基第38-39页
            2.1.2 软件与数据库第39-40页
        2.2 实验方法第40-46页
            2.2.1 柠檬形克勒克酵母基因组准备第40页
            2.2.2 柠檬形克勒克酵母全基因组测序第40-42页
            2.2.3 基因组基本特征分析第42-43页
            2.2.4 柠檬形克勒克酵母的比较基因组学第43-45页
            2.2.5 基因组上传第45-46页
    3 实验结果第46-64页
        3.1 34-9总DNA质量第46页
        3.2 文库构建和基因组组装第46-47页
        3.3 基因组注释、分类以及特征分析第47-57页
        3.4 KA比较基因组学第57-63页
            3.4.1 线粒体基因组第58-59页
            3.4.2 基因组共线性分析第59-61页
            3.4.3 Hanseniaspora spp.共有特有基因分析第61-63页
        3.5 KA基因组数据共享第63-64页
    4 讨论第64-67页
第三章 柠檬形克勒克酵母谱系特有基因第67-81页
    1 引言第67页
    2 材料与方法第67-73页
        2.1 实验材料第67-70页
            2.1.1 供试菌株第67-70页
            2.1.2 分析软件第70页
        2.2 实验方法第70-73页
            2.2.1 数据收集第70-71页
            2.2.2 同源序列搜索第71-72页
            2.2.3 HSGs、orphan genes和ECs的基因特点分析第72页
            2.2.4 LSGs功能分类第72页
            2.2.5 LSGs基因起源初探第72页
            2.2.6 LSGs基因表达情况分析第72-73页
    3 实验结果第73-78页
        3.1 LSGs的鉴定第73页
        3.2 LSGs的特征第73-74页
        3.3 LSGs的功能推断第74-76页
        3.4 LSGs基因起源分析第76页
        3.5 LSGs的非生物胁迫响应情况第76-78页
    4 讨论第78-81页
第四章 柑橘采后青绿霉病原菌特异性分子标记的开发第81-105页
    1 引言第81页
    2 材料与方法第81-92页
        2.1 实验材料第81-85页
            2.1.1 供试菌株第81-84页
            2.1.2 培养基第84页
            2.1.3 供试柑橘第84页
            2.1.4 分析软件和数据库第84-85页
        2.2 实验方法第85-92页
            2.2.1 查找青霉属物种基因组测序情况第85页
            2.2.2 真菌保守基因的收集第85页
            2.2.3 保守基因的同源比对第85页
            2.2.4 特异引物设计第85-87页
            2.2.5 引物特异性反向同源搜索验证第87-89页
            2.2.6 引物特异性检测第89-90页
            2.2.7 PCR产物测序验证第90-91页
            2.2.8 候选引物的验证第91页
            2.2.9 待定青霉菌株的形态学鉴定进一步验证引物第91-92页
            2.2.10 待定青霉菌株的分子鉴定进一步验证引物第92页
    3 实验结果第92-102页
        3.1 青霉属物种基因组统计第92页
        3.2 保守基因的收集和同源比对第92页
        3.3 特异引物设计第92-93页
        3.4 候选特异性引物的获得第93-95页
        3.5 候选引物的应用性验证第95-97页
        3.6 形态学鉴定验证引物的特异性第97-101页
        3.7 分子扩增验证引物的特异性第101-102页
    4 讨论第102-105页
第五章 生防细菌DH-4对绿霉病的防治及机理的研究第105-125页
    1 引言第105页
    2 材料与方法第105-111页
        2.1 实验材料第105-107页
            2.1.1 供试菌株第105-106页
            2.1.2 试验柑橘第106页
            2.1.3 培养基第106-107页
        2.2 实验方法第107-111页
            2.2.1 绿霉病拮抗菌的筛选第107页
            2.2.2 菌株DH-4的鉴定第107-108页
            2.2.3 Ba DH-4抑菌条件的优化第108-109页
            2.2.4 Ba DH-4的抗真菌谱实验第109页
            2.2.5 Ba DH-4在柑橘果实上的抑菌作用第109页
            2.2.6 Ba DH-4抗菌滤液的稳定性检测第109-110页
            2.2.7 Ba DH-4抗菌物质的鉴定第110页
            2.2.8 UPLC各抗菌组分的抑菌效果第110页
            2.2.9 UPLC各抗菌组分热致死实验第110页
            2.2.10 Ba DH-4的抑菌模式第110-111页
            2.2.11 SEM观察活体抑菌作用第111页
    3 实验结果第111-122页
        3.1 DH-4的鉴定第111-112页
        3.2 Ba DH-4抑菌条件筛选第112-114页
        3.3 抗真菌谱实验第114页
        3.4 活体抑菌作用第114-115页
        3.5 抗菌滤液的稳定性第115-116页
        3.6 抗菌物质的鉴定第116-118页
        3.7 UPLC各抗菌组分的抑菌效果第118-119页
        3.8 抗菌组分热致死实验第119-120页
        3.9 TEM观察抗菌滤液的作用位点第120-121页
        3.10 SEM观察活体抑菌第121-122页
    4 讨论第122-125页
小结第125-127页
展望第127-129页
参考文献第129-154页
图版和说明第154-156页
附录1 谱系特有基因qRT-PCR实验所设计的引物第156-157页
攻博期间论文发表情况第157-158页
致谢第158-160页

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