| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第7-12页 |
| 一、文献综述 | 第12-21页 |
| 1.1 苹果遗传转化研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 苹果遗传转化的主要方法 | 第12-13页 |
| 1.1.2 提高植物农杆菌转化效率的新策略 | 第13-14页 |
| 1.1.3 存在问题 | 第14页 |
| 1.2 植物MYB转录因子在非生物胁迫方面研究进展 | 第14-19页 |
| 1.2.1 MYB类转录因子结构特性 | 第14-15页 |
| 1.2.2 MYB类转录因子在非生物胁迫中的作用 | 第15-19页 |
| 1.3 苹果酸研究进展 | 第19页 |
| 1.4 研究目的意义 | 第19-21页 |
| 二、材料与方法 | 第21-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 表达载体与菌株 | 第21页 |
| 2.1.3 试剂盒、内切酶及各类化学药品 | 第21页 |
| 2.1.4 试验仪器 | 第21页 |
| 2.1.5 常规激素、抗生素母液和培养基配制 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 苹果离体高效再生体系的建立 | 第22页 |
| 2.2.2 苹果高效遗传转化体系建立 | 第22-23页 |
| 2.2.3 植物总RNA提取、产物纯化与反转录 | 第23-24页 |
| 2.2.4 基因克隆与载体构建 | 第24-25页 |
| 2.2.5 洋葱表皮细胞中的定位 | 第25-26页 |
| 2.2.6 酵母杂交试验 | 第26-27页 |
| 2.2.7 组织特异性表达分析及对非生物胁迫的响应 | 第27-28页 |
| 2.2.8 农杆菌介导转化苹果愈伤 | 第28-30页 |
| 三、结果与分析 | 第30-53页 |
| 3.1 新疆野苹果31离体再生体系的建立 | 第30-33页 |
| 3.1.1 三份苹果材料初代组培无性系的建立 | 第30页 |
| 3.1.2 三份苹果材料再生能力比较 | 第30页 |
| 3.1.3 新疆野苹果31再生体系的建立与优化 | 第30-33页 |
| 3.2 新疆野苹果31遗传转化体系的建立与优化 | 第33-36页 |
| 3.2.1 抗生素敏感度试验 | 第33页 |
| 3.2.2 新疆野苹果31遗传转化影响因素摸索及条件确立 | 第33-36页 |
| 3.3 苹果MDMYB4基因克隆与功能验证 | 第36-44页 |
| 3.3.1 13个MdR2R3 MYB基因在非生物胁迫下的表达分析 | 第36-37页 |
| 3.3.2 苹果MdMYB4基因的克隆与生物信息学分析 | 第37-38页 |
| 3.3.3 MdMYB4的亚细胞定位分析 | 第38-39页 |
| 3.3.4 MdMYB4转录因子酵母激活验证 | 第39-40页 |
| 3.3.5 MdMYB4基因启动子顺式作用元件分析 | 第40-41页 |
| 3.3.6 MdMYB4基因组织特异性表达分析及对非生物逆境胁迫相应 | 第41-42页 |
| 3.3.7 MdMYB4基因过表达载体构建与转基因苹果愈伤检测 | 第42-44页 |
| 3.4 MDMYB44转录因子基因克隆与功能研究 | 第44-53页 |
| 3.4.1 MdMYB44基因的克隆、测序与生物信息学分析 | 第44-45页 |
| 3.4.2 MdMYB44的亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 3.4.3 MdMYB44的自激活验证 | 第46-47页 |
| 3.4.4 MdMYB44基因启动子克隆及顺式作用元件分析 | 第47-48页 |
| 3.4.5 MdMYB44基因组织特异性表达及在不同胁迫处理下的表达分析 | 第48-49页 |
| 3.4.6 MdMYB44基因转化苹果愈伤 | 第49-51页 |
| 3.4.7 MdMYB4/44转基因愈伤苹果酸含量与苹果酸代谢相关基因表达分析 | 第51-53页 |
| 四、讨论 | 第53-59页 |
| 4.1 新疆野苹果31再生影响因素摸索及离体高效再生体系建立 | 第53-54页 |
| 4.2 苹果MDMYB4基因功能与特性研究 | 第54-55页 |
| 4.3 苹果MDMYB44基因功能与特性研究 | 第55-56页 |
| 4.4 苹果MDMYB4/44基因在苹果酸代谢中的功能研究 | 第56-59页 |
| 五、结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-92页 |
| 个人简历 | 第92页 |
