| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号和单位说明 | 第12-14页 |
| 第一部分：Oct4-EGFP转基因克隆兔的建立及Oct4在胚胎发育过程中的表达研究 | 第14-59页 |
| 1 引言 | 第14-17页 |
| 2 实验材料 | 第17-22页 |
| 2.1 主要试剂 | 第17-21页 |
| 2.2 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.3 实验动物及饲养 | 第22页 |
| 3 实验方法 | 第22-38页 |
| 3.1 pmOG和prOG载体的构建 | 第22-27页 |
| 3.2 小鼠E14细胞的培养及转染 | 第27页 |
| 3.3 兔类ES细胞的培养及转染 | 第27-28页 |
| 3.4 prOG转基因兔成纤维细胞的建立 | 第28-31页 |
| 3.5 体细胞核移植和胚胎移植 | 第31-32页 |
| 3.6 prOG转基因克隆兔的分子生物学分析 | 第32-33页 |
| 3.7 prOG转基因胚胎的荧光观察 | 第33页 |
| 3.8 prOG转基因兔胎儿不同时期组织器官的荧光观察 | 第33-34页 |
| 3.9 prOG-精原干细胞（SSCs）的分离及观察 | 第34-35页 |
| 3.10 prOG-ES细胞的培养与分析 | 第35-38页 |
| 4 实验结果 | 第38-54页 |
| 4.1 pmOG和prOG载体的构建过程 | 第38-40页 |
| 4.2 pmOG和prOG载体在细胞中的表达验证结果 | 第40-42页 |
| 4.3 prOG转基因兔成纤维细胞系的筛选结果 | 第42-43页 |
| 4.4 体细胞核移植及胚胎移植结果 | 第43-44页 |
| 4.5 Oct4在早期胚胎发育过程中的表达模式分析 | 第44-47页 |
| 4.6 prOG转基因兔胎儿不同时期组织器官的荧光观察 | 第47-49页 |
| 4.7 prOG-SSCs的初步培养和观察 | 第49-52页 |
| 4.8 prOG -ES细胞的观察及分析 | 第52-54页 |
| 5 讨论 | 第54-57页 |
| 6 本章小结与展望 | 第57-59页 |
| 第二部分：兔HPRT同源重组基因打靶克隆兔模型的制作 | 第59-100页 |
| 1 引言 | 第59-61页 |
| 2 实验材料 | 第61-63页 |
| 2.1 主要试剂 | 第61-63页 |
| 2.2 主要仪器 | 第63页 |
| 2.3 实验动物及饲养 | 第63页 |
| 3 实验方法 | 第63-79页 |
| 3.1 HPRT同源重组rAAV打靶质粒的构建 | 第63-69页 |
| 3.2 打靶质粒的腺相关病毒（rAAV）包装 | 第69-71页 |
| 3.3 HPRT打靶兔成纤维细胞系的建立 | 第71-72页 |
| 3.4 HPRT打靶兔成纤维细胞的分子生物学分析 | 第72-77页 |
| 3.5 体细胞核移植和胚胎移植 | 第77页 |
| 3.6 HPRT+/-打靶克隆兔的鉴定 | 第77-79页 |
| 3.7 HPRT基因打靶克隆兔后代的繁殖及鉴定 | 第79页 |
| 4 实验结果 | 第79-95页 |
| 4.1 HPRT同源重组打靶质粒的构建过程 | 第79-81页 |
| 4.2 打靶质粒的腺相关病毒（rAAV）包装结果 | 第81-83页 |
| 4.3 HPRT基因打靶成纤维细胞系的筛选结果 | 第83页 |
| 4.4 HPRT基因打靶成纤维细胞的分子生物学分析结果 | 第83-91页 |
| 4.5 HPRT~(+/-)打靶克隆兔的建立及鉴定结果 | 第91-94页 |
| 4.6 HPRT打靶克隆兔种群的建立 | 第94-95页 |
| 5 讨论 | 第95-98页 |
| 6 本章小结与展望 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-107页 |
| 附录 | 第107-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 攻读博士学位期间主要科研成果目录 | 第112页 |
