摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一章 概述 | 第10-20页 |
1.1 羊痘 | 第10-12页 |
1.1.1 流行特点 | 第10页 |
1.1.2 临床症状 | 第10-11页 |
1.1.3 病理变化 | 第11页 |
1.1.4 实验室诊断方法研究概况 | 第11-12页 |
1.2 羊痘病毒 | 第12-13页 |
1.3 羊痘病毒的分离培养 | 第13-14页 |
1.4 CAPV基因组结构 | 第14-15页 |
1.5 羊痘病毒P32蛋白 | 第15页 |
1.6 羊痘病毒KLP2 | 第15-16页 |
1.7 基因工程亚单位疫苗 | 第16-17页 |
1.8 基因缺失疫苗 | 第17-18页 |
1.9 研究意义 | 第18-20页 |
第二章 胎羊皮肤原代细胞的制备培养与山羊痘病毒的分离培养 | 第20-26页 |
2.1 材料与方法 | 第20-23页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第20-21页 |
2.1.2 方法 | 第21-23页 |
2.2 结果 | 第23-25页 |
2.2.1 倒置显微镜观察正常细胞培养结果 | 第23-24页 |
2.2.2 倒置显微镜观察细胞接毒培养结果 | 第24页 |
2.2.3 病毒培养及检测 | 第24-25页 |
2.3 讨论 | 第25-26页 |
第三章 P32基因的克隆与原核表达 | 第26-39页 |
3.1 材料与方法 | 第26-32页 |
3.1.1 材料与试剂 | 第26-27页 |
3.1.2 方法 | 第27-32页 |
3.2 结果 | 第32-36页 |
3.2.1 目的基因的扩增 | 第32-33页 |
3.2.2 重组质粒的鉴定 | 第33页 |
3.2.3 山羊痘病毒南疆株P32基因序列分析 | 第33-34页 |
3.2.4 推测的山羊痘病毒南疆株P32基因氨基酸序列分析 | 第34-35页 |
3.2.5 目的蛋白表达的SDS-PAGE检测 | 第35-36页 |
3.2.6 目的蛋白表达的WESTERN BLOT检测 | 第36页 |
3.3 讨论 | 第36-39页 |
第四章 KLP2基因缺失表达载体的构建 | 第39-44页 |
4.1 材料与方法 | 第39-41页 |
4.1.1 材料与试剂 | 第39-40页 |
4.1.2 方法 | 第40-41页 |
4.2 KLP2基因缺失表达载体构建结果 | 第41页 |
4.3 KLP2基因缺失表达载体检测结果 | 第41-42页 |
4.4 讨论 | 第42-44页 |
第五章 结论与展望 | 第44-45页 |
附录 | 第45-49页 |
1. 常用溶液配制 | 第45-46页 |
2. SDS-PAGE电泳需要的试剂、缓冲液 | 第46-48页 |
3. 细胞培养相关试剂、缓冲液 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53页 |