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天然抗肿瘤活性成分的分离纯化及其抗肿瘤作用机制的研究

致谢第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-9页
英文缩略词第14-15页
第一部分:嗜盐真菌F1和F2抗肿瘤活性成分的分离纯化及其抗肿瘤作用机制的研究第15-63页
    引言第15-20页
        一、嗜盐微生物研究进展第15-19页
            1. 嗜盐真菌第16页
            2. 嗜盐机制第16-17页
            3. 嗜盐微生物产生的生物活性物质第17-18页
                3.1. 嗜盐菌素第17页
                3.2. 抗生素第17-18页
                3.3. 抗肿瘤活性物质第18页
            4. 结语第18-19页
        二、本研究的目的和意义第19-20页
    第一章 海盐场嗜盐真菌F1和F2的菌株鉴定及其抗肿瘤活性成分的分离纯化第20-43页
        一、实验材料、仪器与试剂第20-21页
            1. 实验材料第20页
            2. 实验仪器第20-21页
            3. 实验试剂第21页
            4. 实验用细胞株第21页
        二、实验方法第21-28页
            1. 真菌培养与其形态学鉴定第21-22页
            2. 扫描电镜观察第22页
            3. 真菌基因组DNA提取第22页
            4. PCR体外扩增ITS-5.8S r DNA序列第22页
            5. ITS-5.8S r DNA序列系统进化树构建第22-23页
            6. 盐度对真菌次级代谢产物的影响第23页
            7. 真菌大规模发酵第23页
            8. 抗肿瘤活性成分的提取与分离纯化第23-24页
            9. 硅胶柱层析第24-25页
            10. 薄层色谱分析第25页
            11. 葡聚糖凝胶LH-20 柱层析第25页
            12. 细胞培养第25-27页
            13. MTT比色法第27-28页
        三、实验结果第28-40页
            1. 菌株鉴定第28-34页
            2. 盐浓度对真菌产生的次级代谢产物影响第34-35页
            3. 细胞毒活性化合物的分离纯化和结构鉴定第35-40页
            4. 真菌次级代谢产物的细胞毒性第40页
        四、讨论第40-42页
        五、小结第42-43页
    第二章 麦角甾醇衍生物抑制人宫颈癌He La细胞增殖的分子机制研究第43-63页
        一、实验材料、仪器与试剂第45-46页
            1. 实验材料第45页
            2. 实验用细胞株第45页
            3. 实验仪器第45-46页
            4. 实验试剂第46页
        二、实验方法第46-51页
            1. 麦角甾醇衍生物的制备第46页
            2. 麦角甾醇衍生物对细胞增殖的影响第46页
            3. Hoechst 33258 检测麦角甾醇衍生物对宫颈癌He La细胞凋亡的影响第46-47页
            4. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB p65亚细胞定位的影响第47-48页
            5. 麦角甾醇衍生物对He La细胞 α-微管蛋白聚合的影响第48页
            6. Western印迹法检测麦角甾醇衍生物对He La细胞蛋白的影响第48-51页
        三、实验结果第51-60页
            1. 麦角甾醇衍生物的TLC分析第51-52页
            2. 麦角甾醇衍生物对细胞增殖的影响第52-54页
            3. Hoechst 33258 检测麦角甾醇衍生物对宫颈癌He La细胞凋亡的影响第54-55页
            4. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB活化的影响第55-56页
            5. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB抑制因子IκBα 活化的影响第56页
            6. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB p65亚细胞定位的影响第56-57页
            7. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB依赖的蛋白的表达水平的影响第57-58页
            8. 麦角甾醇衍生物对He La细胞的周期阻滞第58-60页
            9. 麦角甾醇衍生物对He La细胞 α-微管蛋白聚合的影响第60页
        四、讨论第60-62页
        五、小结第62-63页
第二部分:小豆蔻明的抗肿瘤作用机制的研究第63-88页
    引言第63-68页
        一、查尔酮的药理作用第63-67页
            1. 查尔酮对炎症的影响第63-64页
            2. 查尔酮对肿瘤细胞存活、增殖和凋亡的影响第64-66页
            3. 查尔酮对肿瘤侵袭、转移和血管生成的影响第66-67页
            4. 结语第67页
        二、本研究的目的和意义第67-68页
    第一章 小豆蔻明抑制人结肠癌RKO细胞增殖的分子机制研究第68-88页
        一、实验材料、仪器与试剂第68-69页
            1. 实验材料第68页
            2. 实验用细胞株第68-69页
            3. 实验仪器第69页
            4. 实验试剂第69页
        二、实验方法第69-74页
            1. 小豆蔻明对细胞增殖的影响第69页
            2. 小豆蔻明诱导结肠癌RKO细胞凋亡的检测第69-71页
            3. 小豆蔻明对结肠癌RKO细胞细胞周期的影响第71页
            4. 小豆蔻明对DNA解旋的影响第71-72页
            5. 小豆蔻明对结肠癌RKO细胞内活性氧水平的影响第72-73页
            6. 小豆蔻明对结肠癌RKO细胞线粒体膜电位的影响第73页
            7. Western印迹检测小豆蔻明对结肠癌RKO细胞蛋白的影响第73-74页
        三、实验结果第74-85页
            1. 小豆蔻明对细胞增殖的影响第74-76页
            2. 小豆蔻明诱导结肠癌RKO细胞凋亡第76-78页
            3. 小豆蔻明引起结肠癌RKO细胞线粒体膜电位降低第78-80页
            4. 小豆蔻明引起结肠癌RKO细胞内ROS水平上升第80-81页
            5. 小豆蔻明引起结肠癌RKO细胞蛋白水平改变第81-82页
            6. 小豆蔻明引起结肠癌RKO细胞周期阻滞第82-84页
            7. 小豆蔻明抑制topo I活性第84-85页
        四、讨论第85-87页
        五、小结第87-88页
结论与创新点第88-90页
参考文献第90-99页
附录:化合物图谱第99-136页
作者简历第136-137页
攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第137-138页

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