致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略词 | 第14-15页 |
第一部分:嗜盐真菌F1和F2抗肿瘤活性成分的分离纯化及其抗肿瘤作用机制的研究 | 第15-63页 |
引言 | 第15-20页 |
一、嗜盐微生物研究进展 | 第15-19页 |
1. 嗜盐真菌 | 第16页 |
2. 嗜盐机制 | 第16-17页 |
3. 嗜盐微生物产生的生物活性物质 | 第17-18页 |
3.1. 嗜盐菌素 | 第17页 |
3.2. 抗生素 | 第17-18页 |
3.3. 抗肿瘤活性物质 | 第18页 |
4. 结语 | 第18-19页 |
二、本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第一章 海盐场嗜盐真菌F1和F2的菌株鉴定及其抗肿瘤活性成分的分离纯化 | 第20-43页 |
一、实验材料、仪器与试剂 | 第20-21页 |
1. 实验材料 | 第20页 |
2. 实验仪器 | 第20-21页 |
3. 实验试剂 | 第21页 |
4. 实验用细胞株 | 第21页 |
二、实验方法 | 第21-28页 |
1. 真菌培养与其形态学鉴定 | 第21-22页 |
2. 扫描电镜观察 | 第22页 |
3. 真菌基因组DNA提取 | 第22页 |
4. PCR体外扩增ITS-5.8S r DNA序列 | 第22页 |
5. ITS-5.8S r DNA序列系统进化树构建 | 第22-23页 |
6. 盐度对真菌次级代谢产物的影响 | 第23页 |
7. 真菌大规模发酵 | 第23页 |
8. 抗肿瘤活性成分的提取与分离纯化 | 第23-24页 |
9. 硅胶柱层析 | 第24-25页 |
10. 薄层色谱分析 | 第25页 |
11. 葡聚糖凝胶LH-20 柱层析 | 第25页 |
12. 细胞培养 | 第25-27页 |
13. MTT比色法 | 第27-28页 |
三、实验结果 | 第28-40页 |
1. 菌株鉴定 | 第28-34页 |
2. 盐浓度对真菌产生的次级代谢产物影响 | 第34-35页 |
3. 细胞毒活性化合物的分离纯化和结构鉴定 | 第35-40页 |
4. 真菌次级代谢产物的细胞毒性 | 第40页 |
四、讨论 | 第40-42页 |
五、小结 | 第42-43页 |
第二章 麦角甾醇衍生物抑制人宫颈癌He La细胞增殖的分子机制研究 | 第43-63页 |
一、实验材料、仪器与试剂 | 第45-46页 |
1. 实验材料 | 第45页 |
2. 实验用细胞株 | 第45页 |
3. 实验仪器 | 第45-46页 |
4. 实验试剂 | 第46页 |
二、实验方法 | 第46-51页 |
1. 麦角甾醇衍生物的制备 | 第46页 |
2. 麦角甾醇衍生物对细胞增殖的影响 | 第46页 |
3. Hoechst 33258 检测麦角甾醇衍生物对宫颈癌He La细胞凋亡的影响 | 第46-47页 |
4. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB p65亚细胞定位的影响 | 第47-48页 |
5. 麦角甾醇衍生物对He La细胞 α-微管蛋白聚合的影响 | 第48页 |
6. Western印迹法检测麦角甾醇衍生物对He La细胞蛋白的影响 | 第48-51页 |
三、实验结果 | 第51-60页 |
1. 麦角甾醇衍生物的TLC分析 | 第51-52页 |
2. 麦角甾醇衍生物对细胞增殖的影响 | 第52-54页 |
3. Hoechst 33258 检测麦角甾醇衍生物对宫颈癌He La细胞凋亡的影响 | 第54-55页 |
4. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB活化的影响 | 第55-56页 |
5. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB抑制因子IκBα 活化的影响 | 第56页 |
6. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB p65亚细胞定位的影响 | 第56-57页 |
7. 麦角甾醇衍生物对He La细胞NF-κB依赖的蛋白的表达水平的影响 | 第57-58页 |
8. 麦角甾醇衍生物对He La细胞的周期阻滞 | 第58-60页 |
9. 麦角甾醇衍生物对He La细胞 α-微管蛋白聚合的影响 | 第60页 |
四、讨论 | 第60-62页 |
五、小结 | 第62-63页 |
第二部分:小豆蔻明的抗肿瘤作用机制的研究 | 第63-88页 |
引言 | 第63-68页 |
一、查尔酮的药理作用 | 第63-67页 |
1. 查尔酮对炎症的影响 | 第63-64页 |
2. 查尔酮对肿瘤细胞存活、增殖和凋亡的影响 | 第64-66页 |
3. 查尔酮对肿瘤侵袭、转移和血管生成的影响 | 第66-67页 |
4. 结语 | 第67页 |
二、本研究的目的和意义 | 第67-68页 |
第一章 小豆蔻明抑制人结肠癌RKO细胞增殖的分子机制研究 | 第68-88页 |
一、实验材料、仪器与试剂 | 第68-69页 |
1. 实验材料 | 第68页 |
2. 实验用细胞株 | 第68-69页 |
3. 实验仪器 | 第69页 |
4. 实验试剂 | 第69页 |
二、实验方法 | 第69-74页 |
1. 小豆蔻明对细胞增殖的影响 | 第69页 |
2. 小豆蔻明诱导结肠癌RKO细胞凋亡的检测 | 第69-71页 |
3. 小豆蔻明对结肠癌RKO细胞细胞周期的影响 | 第71页 |
4. 小豆蔻明对DNA解旋的影响 | 第71-72页 |
5. 小豆蔻明对结肠癌RKO细胞内活性氧水平的影响 | 第72-73页 |
6. 小豆蔻明对结肠癌RKO细胞线粒体膜电位的影响 | 第73页 |
7. Western印迹检测小豆蔻明对结肠癌RKO细胞蛋白的影响 | 第73-74页 |
三、实验结果 | 第74-85页 |
1. 小豆蔻明对细胞增殖的影响 | 第74-76页 |
2. 小豆蔻明诱导结肠癌RKO细胞凋亡 | 第76-78页 |
3. 小豆蔻明引起结肠癌RKO细胞线粒体膜电位降低 | 第78-80页 |
4. 小豆蔻明引起结肠癌RKO细胞内ROS水平上升 | 第80-81页 |
5. 小豆蔻明引起结肠癌RKO细胞蛋白水平改变 | 第81-82页 |
6. 小豆蔻明引起结肠癌RKO细胞周期阻滞 | 第82-84页 |
7. 小豆蔻明抑制topo I活性 | 第84-85页 |
四、讨论 | 第85-87页 |
五、小结 | 第87-88页 |
结论与创新点 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-99页 |
附录:化合物图谱 | 第99-136页 |
作者简历 | 第136-137页 |
攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第137-138页 |