摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-23页 |
1.1 油菜黑胫病研究概述 | 第12-14页 |
1.1.1 油菜简介 | 第12页 |
1.1.2 油菜主要病害 | 第12-14页 |
1.1.4 油菜黑胫病的防治 | 第14页 |
1.2 病毒介导的基因沉默(VIGS)技术简介 | 第14-18页 |
1.2.1 VIGS载体 | 第16-17页 |
1.2.2 烟草脆裂病毒TRV载体 | 第17-18页 |
1.2.3 VIGS技术的发展 | 第18页 |
1.3 WRKY转录因子的研究进展 | 第18-20页 |
1.3.1 WRKY转录因子的特点与分类 | 第18-19页 |
1.3.2 WRKY转录因子的作用 | 第19-20页 |
1.4 LRR型基因研究进展 | 第20-22页 |
1.4.1 LRR型基因特点与分类 | 第20-21页 |
1.4.2 LRR-RLK基因的作用 | 第21-22页 |
1.5 本文研究目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-34页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 主要菌株和载体 | 第23页 |
2.1.3 目标基因的筛选及生物信息学分析 | 第23页 |
2.1.4 主要酶类和试剂 | 第23-24页 |
2.1.5 试验仪器 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-34页 |
2.2.1 甘蓝型油菜青杂5号的培养 | 第24-25页 |
2.2.2 黑胫病病原菌NM-1孢子悬浮液的制备 | 第25页 |
2.2.3 VIGS载体的构建 | 第25-31页 |
2.2.4 农杆菌介导沉默载体浸染植株 | 第31-32页 |
2.2.5 荧光定量PCR检测目的基因沉默效率 | 第32-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-46页 |
3.1 WRKY70和LRR-RLK基因生物信息学分析 | 第34-35页 |
3.1.1 WRKY70生物信息学分析 | 第34页 |
3.1.2 LRR-RLK生物信息学分析 | 第34-35页 |
3.2 目的基因部分CDS序列的克隆 | 第35-36页 |
3.3 VIGS载体pTRV2-WRKY70和pTRV2-LRR-RLK的构建 | 第36-41页 |
3.4 qPCR检测目的基因的沉默效率 | 第41-42页 |
3.5 VIGS沉默植株接种NM-1的表型观察 | 第42-46页 |
第四章 讨论与结论 | 第46-51页 |
4.1 影响VIGS沉默效率原因 | 第46-48页 |
4.1.1 VIGS技术应用的宿主 | 第46-47页 |
4.1.2 VIGS技术实施的接种方法 | 第47页 |
4.1.3 VIGS载体的选择 | 第47-48页 |
4.1.4 VIGS沉默目的片段 | 第48页 |
4.2 WRKY70/LRR-RLK参与了油菜抗病功能研究 | 第48-50页 |
4.3 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
附录1 WRKY70和LRR-RLK基因CDS序列及氨基酸序列 | 第55-59页 |
附录2 WRKY70基因部分CDS序列的测序结果 | 第59-63页 |
附录3 LRR-RLK基因部分CDS序列的测序结果 | 第63-67页 |
致谢 | 第67页 |