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利用VIGS技术进行油菜抗病相关WRKY70和LRR-RLK基因的功能验证

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略词表第11-12页
第一章 绪论第12-23页
    1.1 油菜黑胫病研究概述第12-14页
        1.1.1 油菜简介第12页
        1.1.2 油菜主要病害第12-14页
        1.1.4 油菜黑胫病的防治第14页
    1.2 病毒介导的基因沉默(VIGS)技术简介第14-18页
        1.2.1 VIGS载体第16-17页
        1.2.2 烟草脆裂病毒TRV载体第17-18页
        1.2.3 VIGS技术的发展第18页
    1.3 WRKY转录因子的研究进展第18-20页
        1.3.1 WRKY转录因子的特点与分类第18-19页
        1.3.2 WRKY转录因子的作用第19-20页
    1.4 LRR型基因研究进展第20-22页
        1.4.1 LRR型基因特点与分类第20-21页
        1.4.2 LRR-RLK基因的作用第21-22页
    1.5 本文研究目的与意义第22-23页
第二章 材料与方法第23-34页
    2.1 实验材料第23-24页
        2.1.1 植物材料第23页
        2.1.2 主要菌株和载体第23页
        2.1.3 目标基因的筛选及生物信息学分析第23页
        2.1.4 主要酶类和试剂第23-24页
        2.1.5 试验仪器第24页
    2.2 实验方法第24-34页
        2.2.1 甘蓝型油菜青杂5号的培养第24-25页
        2.2.2 黑胫病病原菌NM-1孢子悬浮液的制备第25页
        2.2.3 VIGS载体的构建第25-31页
        2.2.4 农杆菌介导沉默载体浸染植株第31-32页
        2.2.5 荧光定量PCR检测目的基因沉默效率第32-34页
第三章 结果与分析第34-46页
    3.1 WRKY70和LRR-RLK基因生物信息学分析第34-35页
        3.1.1 WRKY70生物信息学分析第34页
        3.1.2 LRR-RLK生物信息学分析第34-35页
    3.2 目的基因部分CDS序列的克隆第35-36页
    3.3 VIGS载体pTRV2-WRKY70和pTRV2-LRR-RLK的构建第36-41页
    3.4 qPCR检测目的基因的沉默效率第41-42页
    3.5 VIGS沉默植株接种NM-1的表型观察第42-46页
第四章 讨论与结论第46-51页
    4.1 影响VIGS沉默效率原因第46-48页
        4.1.1 VIGS技术应用的宿主第46-47页
        4.1.2 VIGS技术实施的接种方法第47页
        4.1.3 VIGS载体的选择第47-48页
        4.1.4 VIGS沉默目的片段第48页
    4.2 WRKY70/LRR-RLK参与了油菜抗病功能研究第48-50页
    4.3 结论第50-51页
参考文献第51-55页
附录1 WRKY70和LRR-RLK基因CDS序列及氨基酸序列第55-59页
附录2 WRKY70基因部分CDS序列的测序结果第59-63页
附录3 LRR-RLK基因部分CDS序列的测序结果第63-67页
致谢第67页

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