| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-18页 |
| 1.1 甘蓝型油菜产量的研究价值及现状 | 第9-11页 |
| 1.1.1 产量的形成 | 第9页 |
| 1.1.2 我国油菜生产的现状 | 第9-10页 |
| 1.1.3 甘蓝型油菜产量的研究进展 | 第10页 |
| 1.1.4 甘蓝型油菜产量的研究价值 | 第10-11页 |
| 1.2 种子大小是重要的产量性状 | 第11-12页 |
| 1.2.1 构成油菜产量的重要三要素 | 第11页 |
| 1.2.2 种子大小与产量呈显著正相关 | 第11-12页 |
| 1.3 调控种子大小基因的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3.1 通过影响细胞数目调控种子大小的基因的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3.2 通过影响细胞大小调控种子大小的基因的研究进展 | 第13页 |
| 1.3.3 甘蓝型油菜中调控种子大小基因的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4 调控种子大小的分子途径 | 第14-16页 |
| 1.4.1 蛋白酶体降解途径 | 第14页 |
| 1.4.2 植物激素途径 | 第14-15页 |
| 1.4.2.1 植物生长素 | 第14-15页 |
| 1.4.2.2 细胞分裂素 | 第15页 |
| 1.4.2.3 油菜素内酯 | 第15页 |
| 1.4.3 G蛋白信号途径 | 第15-16页 |
| 1.5 本研究的背景、内容、目的及意义 | 第16-18页 |
| 1.5.1 研究背景 | 第16页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第16页 |
| 1.5.3 研究目的及意义 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.2 菌株与质粒 | 第18页 |
| 2.3 试剂与仪器 | 第18-19页 |
| 2.4 实验方法 | 第19-37页 |
| 2.4.1 ZmWS1和ZmWS2序列的获得 | 第19-20页 |
| 2.4.2 过量表达载体的构建 | 第20-25页 |
| 2.4.2.1 目的片段克隆 | 第20-22页 |
| 2.4.2.2 过表达载体构建 | 第22-24页 |
| 2.4.2.3 过表达载体转化农杆菌 | 第24-25页 |
| 2.4.3 甘蓝型油菜的遗传转化 | 第25-27页 |
| 2.4.3.1 ZmWS1和ZmWS2过表达载体转化甘蓝型油菜的步骤 | 第25-26页 |
| 2.4.3.2 BnWS1和BnWS2过表达载体转化甘蓝型油菜的步骤 | 第26-27页 |
| 2.4.4 转基因植株的分子鉴定 | 第27-31页 |
| 2.4.4.1 T_0代过表达ZmWS1和ZmWS2转基因植株PCR阳性鉴定及RT-PCR检测 | 第27-30页 |
| 2.4.4.2 T_1代过表达ZmWS1和ZmWS2转基因植株PCR阳性鉴定 | 第30页 |
| 2.4.4.3 T_0代过表达BnWS1和BnWS2转基因植株PCR阳性鉴定以及qPCR检测 | 第30-31页 |
| 2.4.5 转基因植株农艺性状考察 | 第31-32页 |
| 2.4.5.1 T_0代过表达ZmWS1和ZmWS2转基因植株农艺性状考察 | 第31-32页 |
| 2.4.5.2 T_1代过表达ZmWS1和ZmWS2转基因植株农艺性状考察 | 第32页 |
| 2.4.6 转基因植株组织学分析 | 第32-33页 |
| 2.4.7 候选基因编码蛋白的亚细胞定位分析 | 第33-34页 |
| 2.4.7.1 烟草瞬时表达载体的构建 | 第33页 |
| 2.4.7.2 烟草表皮细胞的转化和荧光显微镜观察 | 第33-34页 |
| 2.4.8 酵母双杂交筛库 | 第34-36页 |
| 2.4.8.1 诱饵蛋白载体的构建 | 第34页 |
| 2.4.8.2 重组载体转化酵母 | 第34-35页 |
| 2.4.8.3 自激活活性检测 | 第35页 |
| 2.4.8.4 酵母双杂交文库筛选 | 第35-36页 |
| 2.4.8.5 阳性菌落中pGADT7插入片段的扩增和测序 | 第36页 |
| 2.4.9 生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-62页 |
| 3.1 不同物种WS1和WS2的系统发生关系 | 第37-38页 |
| 3.2 过表达ZmWS1和ZmWS2转基因甘蓝型油菜的获得 | 第38-42页 |
| 3.2.1 过表达ZmWS1和ZmWS2转基因甘蓝型油菜的分子鉴定 | 第39-42页 |
| 3.3 过表达ZmWS1和ZmWS2转基因植株的农艺性状考察 | 第42-46页 |
| 3.4 过表达ZmWS1和ZmWS2转基因植株的组织学分析 | 第46-48页 |
| 3.5 ZmWS1和ZmWS2蛋白的亚细胞定位 | 第48-49页 |
| 3.6 酵母双杂交筛选ZmWS1和ZmWS2的互作蛋白 | 第49-53页 |
| 3.7 BnWS1和BnWS2目的片段克隆 | 第53页 |
| 3.8 过表达BnWS1和BnWS2转基因甘蓝型油菜的获得 | 第53-56页 |
| 3.8.1 pMDC83-BnWS1和pMDC83-BnWS2过表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 3.8.2 T_0代过表达BnWS1和BnWS2转基因植株PCR阳性鉴定及qPCR检测 | 第55-56页 |
| 3.9 BnWS1/BnWS2蛋白的亚细胞定位 | 第56-57页 |
| 3.10 酵母双杂筛选BnWS1和BnWS2互作蛋白 | 第57-60页 |
| 3.11 WS1/WS2参与调控种子大小的可能途径分析 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| 4.1 甘蓝型油菜两种遗传转化方法的比较 | 第62-63页 |
| 4.2 ZmWS1/ZmWS2通过增加细胞大小来增加种子大小 | 第63-64页 |
| 4.3 WS1/WS2基因可能通过蛋白酶体降解途径参与种子大小的调控 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 硕士期间参与发表论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
