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鸭坦布苏病毒E蛋白抗原表位的鉴定及Epitope-ELISA诊断方法的建立

摘要第6-7页
abstract第7页
第一章 引言第13-23页
    1.1 鸭坦布苏病毒病概述第13页
    1.2 鸭坦布苏病毒生物学特性第13-14页
        1.2.1 鸭坦布苏病毒病原学分类第13页
        1.2.2 鸭坦布苏病毒形态结构及理化特性第13-14页
        1.2.3 鸭坦布苏病毒的培养特性第14页
    1.3 鸭坦布苏病毒的基因组结构第14-15页
    1.4 鸭坦布苏病毒基因组编码蛋白第15-16页
        1.4.1 结构蛋白第15-16页
        1.4.2 非结构蛋白第16页
    1.5 鸭坦布苏病毒的流行病学特征第16-17页
    1.6 鸭坦布苏病毒的诊断与防治第17-19页
        1.6.1 临床诊断第17页
        1.6.2 病毒分离鉴定第17页
        1.6.3 血清学诊断方法第17-18页
        1.6.4 分子生物学诊断第18-19页
        1.6.5 鸭坦布苏病毒的防治第19页
    1.7 抗原表位第19-22页
        1.7.1 抗原表位概述第19页
        1.7.2 抗原表位分类第19-20页
        1.7.3 抗原表位的分析方法第20-22页
        1.7.4 鸭坦布苏病毒抗原表位研究进展第22页
    1.8 本文研究目的及意义第22-23页
第二章 鸭坦布苏病毒E蛋白抗原表位的鉴定第23-38页
    2.1 实验材料第23-24页
        2.1.1 质粒、菌株第23页
        2.1.2 主要试剂第23页
        2.1.3 主要仪器第23页
        2.1.4 主要试剂的配置第23-24页
    2.2 实验方法第24-29页
        2.2.1 抗体中和活性测定第24页
        2.2.2 单克隆抗体的纯化第24页
        2.2.3 纯化的单克隆抗体SDS-PAGE分析第24-25页
        2.2.4 单克隆抗体抗原表位的鉴定第25-28页
        2.2.5 抗原表位保守性分析第28页
        2.2.6 DTMUV E蛋白结构预测及其表位定位第28-29页
    2.3 结果第29-36页
        2.3.1 抗体中和活性测定第29页
        2.3.2 单克隆抗体纯化第29页
        2.3.3 抗体浓度测定第29页
        2.3.4 噬菌体滴度测定第29-30页
        2.3.5 噬菌斑阳性克隆筛选结果第30-31页
        2.3.6 阳性噬菌体克隆测序及同源性比较第31-33页
        2.3.7 短肽融合蛋白的Western-Blot分析第33-34页
        2.3.8 表位序列保守性分析第34-35页
        2.3.9 DTMUV E蛋白结构预测及其表位定位第35-36页
    2.4 讨论第36-38页
        2.4.1 噬菌体展示技术方法分析第36页
        2.4.2 表位鉴定结果分析第36-38页
第三章 抗原表位的交叉反应性分析第38-45页
    3.1 实验材料第38页
        3.1.1 质粒、菌株第38页
        3.1.2 主要试剂第38页
        3.1.3 主要仪器第38页
    3.2 实验方法第38-41页
        3.2.1 抗原表位同源性分析第38-39页
        3.2.2 表位氨基酸位点分析及重组质粒构建第39-40页
        3.2.3 质粒诱导表达及表达产物的Western-blot分析第40页
        3.2.4 抗原表位交叉反应性分析第40-41页
    3.3 结果第41-44页
        3.3.1 抗原表位同源性分析第41-42页
        3.3.2 表位关键性氨基酸位点分析第42-43页
        3.3.3 抗原表位交叉反应性分析第43-44页
    3.4 讨论第44-45页
第四章 Epitope-ELISA诊断方法的初步建立第45-52页
    4.1 实验材料第45页
        4.1.1 主要试剂第45页
        4.1.2 主要仪器第45页
    4.2 实验方法第45-47页
        4.2.1 鸭坦布苏病毒抗体ELISA检测方法的操作步骤第45页
        4.2.2 ELISA检测条件的优化第45-46页
        4.2.3 阴阳性临界值的确定第46页
        4.2.4 特异性试验第46页
        4.2.5 重复性试验第46-47页
        4.2.6 敏感性试验第47页
    4.3 结果第47-51页
        4.3.1 ELISA检测条件的优化结果第47-49页
        4.3.2 阴阳性临界值确定第49页
        4.3.3 特异性试验结果第49-50页
        4.3.4 批内、批间重复性试验结果第50页
        4.3.5 敏感性试验结果第50-51页
    4.4 讨论第51-52页
第五章 全文结论第52-53页
参考文献第53-58页
致谢第58-59页
作者简历第59页

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