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猪Bic基因中Foxp3结合位点突变对miR-155表达影响探究

摘要第7-8页
ABSTRACT第8页
缩略词表(ABBREVIATIONS)第9-10页
1 前言第10-18页
    1.1 研究问题的由来第10-11页
    1.2 miRNA在免疫系统中的作用第11-13页
        1.2.1 动物细胞miRNA简介第11-12页
        1.2.2 miRNA影响免疫细胞的发育第12-13页
        1.2.3 miRNA对免疫应答的调控作用第13页
    1.3 miR-155 对免疫系统的作用第13-15页
        1.3.1 miR-155 在免疫反应中的作用第13-14页
        1.3.2 miR-155 靶基因研究进展第14-15页
    1.4 转录因子Foxp3 研究进展第15-17页
        1.4.1 调节性T细胞的免疫功能第15-16页
        1.4.2 Foxp3 在调节性T细胞中的功能第16页
        1.4.3 Foxp3 直接靶向调控miR-155 对调节性T细胞的作用第16-17页
    1.5 研究的目的与意义第17-18页
2 技术路线、材料与方法第18-37页
    2.1 技术路线第18页
    2.2 材料第18-23页
        2.2.1 猪组织样品第18-19页
        2.2.2 细胞系、载体、菌株第19-20页
        2.2.3 主要试验试剂第20-21页
        2.2.4 主要生化试剂的配置第21-22页
        2.2.5 主要数据库和生物学软件第22-23页
    2.3 方法第23-37页
        2.3.1 SNP分析第23-24页
        2.3.2 细胞培养第24-25页
        2.3.3 细胞转染试验第25页
        2.3.4 基因表达量分析第25-28页
        2.3.5 载体的构建及相关试验方法第28-32页
        2.3.6 蛋白表达量分析第32-33页
        2.3.7 染色质免疫共沉淀实验第33-37页
3 结果第37-47页
    3.1 与转录因子Foxp3 结合情况的研究第37-41页
        3.1.1 大白及梅山Bic基因片段SNP分析第37-38页
        3.1.2 Flag-Foxp3-pcDNA3.1 载体构建及超表达检测第38-39页
        3.1.3 ChIP实验检测Foxp3 结合位点第39-40页
        3.1.4 双荧光实验检测A/C型片段与Foxp3 的结合效率第40-41页
    3.2 miR-155 表达差异及靶基因研究第41-47页
        3.2.1 杜二F2 群体中检测miR-155 全血白细胞中表达水平第41-42页
        3.2.2 Ssc-miR-155 候选靶基因预测第42-43页
        3.2.3 Ssc-miR-155 候选靶基因初步筛选第43-45页
        3.2.4 miR155pEGFP-C1 载体构建及超表达检测第45-46页
        3.2.5 ssc-miR-155 候选靶基因双荧光检测第46-47页
4 讨论第47-52页
    4.1 关于Foxp3 蛋白在Bic基因上结合位点研究的讨论第47-48页
        4.1.1 猪Bic基因Foxp3 结合位点分析第47-48页
        4.1.2 猪Bic基因突变对Foxp3 结合差异的影响第48页
    4.2 关于miR-155 及靶基因研究的讨论第48-50页
        4.2.1 全血白细胞中AA型和CC型miR-155 差异表达第48-49页
        4.2.2 ssc-miR-155 候选靶基因的预测和筛选第49-50页
        4.2.3 ssc-miR-155 候选靶基因研究分析第50页
    4.3 关于下一步工作的计划第50-52页
5 小结第52-54页
    5.1 本研究的主要结果第52页
    5.2 本研究的创新点与特色第52-53页
    5.3 本研究的不足之处以及有待解决的问题第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61页

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