摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略语对照表 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-23页 |
1.1 类脂A的合成与转运 | 第14-15页 |
1.2 革兰氏阴性菌中类脂A的修饰系统 | 第15-19页 |
1.2.1 类脂A分子的磷酸基团上的修饰 | 第16-17页 |
1.2.2 类脂A分子的酰基化修饰相关基因及其功能 | 第17-19页 |
1.3 铜绿假单胞菌的研究现状 | 第19页 |
1.4 铜绿假单胞菌的耐药机制 | 第19-20页 |
1.5 研究内容与意义 | 第20-23页 |
第二章 实验材料和方法 | 第23-37页 |
2.1 实验材料 | 第23-26页 |
2.1.1 引物、菌株与质粒 | 第23-24页 |
2.1.2 培养基的配制 | 第24-26页 |
2.1.3 实验仪器 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-37页 |
2.2.1 质粒提取 | 第26页 |
2.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
2.2.3 PAO1感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
2.2.4 聚合酶链式反应(PCR) | 第28页 |
2.2.5 酶切与连接反应 | 第28-29页 |
2.2.6 电转化实验 | 第29页 |
2.2.7 基因敲除 | 第29-30页 |
2.2.8 基因互补 | 第30-31页 |
2.2.9 抗生素敏感性检测 | 第31页 |
2.2.10 PA3242基因报道子构建 | 第31-32页 |
2.2.11 细菌生长检测(CFU) | 第32页 |
2.2.12 细胞毒性的测定 | 第32-33页 |
2.2.13 白菜感染模型检测侵染能力 | 第33-34页 |
2.2.14 果蝇生物模型检测致病性 | 第34页 |
2.2.15 运动能力检测 | 第34-35页 |
2.2.16 透射电子显微镜法观测菌体形态 | 第35页 |
2.2.17 外膜稳定性的测定 | 第35页 |
2.2.18 基因转录水平的检测 | 第35-37页 |
第三章 实验结果 | 第37-51页 |
3.1 PA3242基因的信息学分析与敲除 | 第37-38页 |
3.1.1 PA3242基因的信息学分析 | 第37页 |
3.1.2 PA3242基因的敲除 | 第37-38页 |
3.2 PA3242基因功能的探究 | 第38-51页 |
3.2.1 PA3242影响PAO1在不同温度下的生长 | 第38-39页 |
3.2.2 PA3242基因的表达水平受温度的调控 | 第39-40页 |
3.2.3 PA3242的缺失导致PAO1敏感性增强 | 第40-42页 |
3.2.4 PAO1(△PA3242)外膜稳定性与完整性受损 | 第42-43页 |
3.2.5 PA3242基因参与调控PAO1的细胞毒性 | 第43-44页 |
3.2.6 PA3242影响PAO1的侵染力和致病性 | 第44-45页 |
3.2.7 PAO1(△PA3242)丧失运动能力 | 第45-47页 |
3.2.8 PA3242的缺失导致菌体形态畸变和菌毛脱落 | 第47-48页 |
3.2.9 PA4997 (MsbA)可互补突变体PAO1(△PA3242) | 第48-51页 |
第四章 结果与讨论 | 第51-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
个人成果 | 第67页 |