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铜绿假单胞菌PAO1的酰基转移酶编码基因PA3242的功能研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略语对照表第12-13页
第一章 绪论第13-23页
    1.1 类脂A的合成与转运第14-15页
    1.2 革兰氏阴性菌中类脂A的修饰系统第15-19页
        1.2.1 类脂A分子的磷酸基团上的修饰第16-17页
        1.2.2 类脂A分子的酰基化修饰相关基因及其功能第17-19页
    1.3 铜绿假单胞菌的研究现状第19页
    1.4 铜绿假单胞菌的耐药机制第19-20页
    1.5 研究内容与意义第20-23页
第二章 实验材料和方法第23-37页
    2.1 实验材料第23-26页
        2.1.1 引物、菌株与质粒第23-24页
        2.1.2 培养基的配制第24-26页
        2.1.3 实验仪器第26页
    2.2 实验方法第26-37页
        2.2.1 质粒提取第26页
        2.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备第26-27页
        2.2.3 PAO1感受态细胞的制备第27-28页
        2.2.4 聚合酶链式反应(PCR)第28页
        2.2.5 酶切与连接反应第28-29页
        2.2.6 电转化实验第29页
        2.2.7 基因敲除第29-30页
        2.2.8 基因互补第30-31页
        2.2.9 抗生素敏感性检测第31页
        2.2.10 PA3242基因报道子构建第31-32页
        2.2.11 细菌生长检测(CFU)第32页
        2.2.12 细胞毒性的测定第32-33页
        2.2.13 白菜感染模型检测侵染能力第33-34页
        2.2.14 果蝇生物模型检测致病性第34页
        2.2.15 运动能力检测第34-35页
        2.2.16 透射电子显微镜法观测菌体形态第35页
        2.2.17 外膜稳定性的测定第35页
        2.2.18 基因转录水平的检测第35-37页
第三章 实验结果第37-51页
    3.1 PA3242基因的信息学分析与敲除第37-38页
        3.1.1 PA3242基因的信息学分析第37页
        3.1.2 PA3242基因的敲除第37-38页
    3.2 PA3242基因功能的探究第38-51页
        3.2.1 PA3242影响PAO1在不同温度下的生长第38-39页
        3.2.2 PA3242基因的表达水平受温度的调控第39-40页
        3.2.3 PA3242的缺失导致PAO1敏感性增强第40-42页
        3.2.4 PAO1(△PA3242)外膜稳定性与完整性受损第42-43页
        3.2.5 PA3242基因参与调控PAO1的细胞毒性第43-44页
        3.2.6 PA3242影响PAO1的侵染力和致病性第44-45页
        3.2.7 PAO1(△PA3242)丧失运动能力第45-47页
        3.2.8 PA3242的缺失导致菌体形态畸变和菌毛脱落第47-48页
        3.2.9 PA4997 (MsbA)可互补突变体PAO1(△PA3242)第48-51页
第四章 结果与讨论第51-57页
参考文献第57-65页
致谢第65-67页
个人成果第67页

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