内容摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 自身免疫性疾病 | 第12-13页 |
1.1.1 自身免疫 | 第12页 |
1.1.2 多发性硬化症MS和实验性自身免疫性脑脊髓炎EAE概述 | 第12-13页 |
1.2 T细胞 | 第13-21页 |
1.2.1 T细胞分化 | 第13-14页 |
1.2.2 T细胞与自身免疫性疾病 | 第14-16页 |
1.2.3 T细胞与树突状细胞 | 第16-17页 |
1.2.4 树突状细胞 | 第17-18页 |
1.2.5 树突状细胞生长,发育和分化 | 第18-20页 |
1.2.6 树突状细胞与免疫耐受 | 第20-21页 |
1.3 长链多不饱和脂肪酸和DHA | 第21-23页 |
1.3.1 PUFA:Long chain n-3 polyunsaturated fatty acids | 第21-22页 |
1.3.2 DHA的来源 | 第22-23页 |
1.4 GPR120 | 第23-24页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
第二章 实验材料与方法 | 第25-48页 |
2.1 实验材料 | 第25页 |
2.1.1 实验小鼠 | 第25页 |
2.2 实验仪器与设备 | 第25-26页 |
2.3 主要仪器设备和耗材 | 第26-28页 |
2.4 实验试剂 | 第28-35页 |
2.4.1 抗体 | 第28-29页 |
2.4.2 细胞因子及刺激因子 | 第29-30页 |
2.4.3 细胞培养试剂(完全培养基)配方 | 第30页 |
2.4.4 Western-Blot试剂配制 | 第30-32页 |
2.4.5 细胞处理相关试剂 | 第32页 |
2.4.6 ELISA试剂配制 | 第32页 |
2.4.7 DNA电泳试剂 | 第32-33页 |
2.4.8 RT-PCR引物及小鼠鉴定引物 | 第33-35页 |
2.5 实验方法 | 第35-48页 |
2.5.1 小鼠EAE模型的构建 | 第35页 |
2.5.2 小鼠脊髓组织染色 | 第35-37页 |
2.5.3 细胞的分离纯化 | 第37-40页 |
2.5.4 树突状细胞的体外分化 | 第40-41页 |
2.5.5 CFSE label | 第41页 |
2.5.6 CD4~+T细胞和树突状细胞共培养实验 | 第41-42页 |
2.5.7 不同浓度MOG刺激T细胞增殖 | 第42页 |
2.5.8 FACS细胞染色 | 第42-44页 |
2.5.9 提细胞mRNA | 第44-45页 |
2.5.10 小鼠基因型鉴定试剂 | 第45页 |
2.5.11 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第45-47页 |
2.5.12 数据统计分析 | 第47-48页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第48-60页 |
3.1 WT小鼠喂食DHA后减轻了EAE的发病 | 第48-50页 |
3.1.1 WT小鼠喂食DHA诱导EAE后,临床发病情况 | 第48页 |
3.1.2 脾脏细胞分泌的前炎症因子检测 | 第48-50页 |
3.2 DHA-treaded WT小鼠的树突状细胞对T细胞的活化刺激能力减弱 | 第50-53页 |
3.2.1 DHA-treaded WT树突状细胞共刺激分子表达下降 | 第50页 |
3.2.2 DHA-treaded WT小鼠T细胞对MOG特异性刺激活化 | 第50-52页 |
3.2.3 DHA-treaded WT树突状细胞对T细胞的共培养 | 第52-53页 |
3.3 喂食DHA的小鼠树突状细胞免疫耐受性加强 | 第53-55页 |
3.3.1 DHA刺激后树突状细胞的膜共刺激分子表达 | 第53-55页 |
3.3.2 树突状细胞与BALB/C CD4+T细胞的共培养 | 第55页 |
3.4 DHA刺激的树突状细胞诱导T细胞耐受和抑制自身免疫炎症的发生 | 第55-58页 |
3.4.1 DHA-BMDC WT小鼠EAE临床发病和脊髓病理切片 | 第56页 |
3.4.2 DHA-BMDC WT小鼠免疫后,MOG特异性的T细胞增殖 | 第56-57页 |
3.4.3 DHA-BMDC WT脾脏细胞炎症因子表达 | 第57页 |
3.4.4 DHA-BMDC WT小鼠免疫后T细胞亚群分化 | 第57-58页 |
3.5 DHA介导GPR120信号通路诱导树突状细胞的耐受 | 第58-60页 |
3.5.1 GPR120在树突状细胞分化不同时期的蛋白表达 | 第59-60页 |
第四章 总结与讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
致谢 | 第67-68页 |