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切应力在Caveolin-1介导肿瘤细胞粘附与迁移的力学生物学机制研究

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 绪论第12-24页
    1.1 三阴性乳腺癌第12页
    1.2 癌症的转移第12-15页
        1.2.1 癌症转移方式第13页
        1.2.2 原发肿瘤的扩散第13-15页
        1.2.3 癌症转移方式第15页
    1.3 低切应力对癌细胞转移的影响第15-16页
        1.3.1 对细胞膜上蛋白的影响第15-16页
        1.3.2 对细胞骨架的影响第16页
        1.3.3 激活离子通道第16页
    1.4 Caveolae及Caveolin-1第16-20页
        1.4.1 概述第16-17页
        1.4.2 Caveolae及Caveolin-1 的生物学功能第17-18页
        1.4.3 Caveolae的解聚与机械感受第18-19页
        1.4.4 Caveolin-1 与肿瘤的发生、发展第19-20页
    1.5 细胞的迁移第20-23页
        1.5.1 迁移的类型第20页
        1.5.2 细胞骨架重组及应力纤维形成第20-21页
        1.5.3 细胞极性的形成第21-22页
        1.5.4 黏着斑的动态变化第22-23页
    1.6 本课题的研究目的及内容第23-24页
第二章 低切应力介导CAV-1 调控细胞的运动与粘附第24-44页
    2.1 引言第24页
    2.2 实验材料和方法第24-33页
        2.2.1 实验材料和试剂第24-26页
        2.2.2 细胞培养第26-27页
        2.2.3 慢病毒载体构建Cav-1 沉默稳转细胞株第27页
        2.2.4 细胞的瞬时转染第27-29页
        2.2.5 平板流动腔实验第29页
        2.2.6 化学发光法检测细胞增殖第29页
        2.2.7 细胞周期检测第29-30页
        2.2.8 细胞凋亡检测第30页
        2.2.9 细胞外基质黏附实验第30-31页
        2.2.10 细胞划痕实验第31页
        2.2.11 免疫荧光标记第31页
        2.2.12 细胞骨架染色第31-32页
        2.2.13 细胞极性实验第32页
        2.2.14 活细胞工作站第32页
        2.2.15 光漂白实验(Fluorescence recovery after photobleaching, FRAP)第32-33页
        2.2.16 软件及统计分析第33页
    2.3 实验结果第33-42页
        2.3.1 低切应力影响肿瘤细胞的形状、极性和黏着斑形成第33-35页
        2.3.2 Cav-1 能够促进肿瘤细胞的迁移第35-36页
        2.3.3 低切应力通过Cav-1 调控应力纤维的形成第36-38页
        2.3.4 低切应力通过调控Cav-1 来影响细胞的运动和再贴壁第38-40页
        2.3.5 Cav-1 促进细胞黏着斑的动态变化第40-41页
        2.3.6 Cav-1 影响细胞增殖,但不影响细胞的凋亡与周期第41-42页
    2.4 讨论第42-43页
    2.5 本章小结第43-44页
第三章 低切应力在CAV-1 介导细胞粘附与运动的机制研究第44-55页
    3.1 引言第44页
    3.2 实验材料和方法第44-49页
        3.2.1 实验材料和试剂第44-45页
        3.2.2 Real-time PCR第45-48页
        3.2.3 蛋白免疫印迹实验(Western Blot)第48-49页
    3.3 实验结果第49-53页
        3.3.1 低切应力促进细胞运动相关信号通路活化第49-50页
        3.3.2 低切应力促进细胞黏附信号通路活化第50-51页
        3.3.3 低切应力调控 β1-integrin的活化及内化第51-53页
    3.4 讨论第53-54页
    3.5 本章小结第54-55页
第四章 结论与展望第55-58页
    4.1 全文总结第55-56页
    4.2 后续展望第56-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-66页
攻读硕士学位期间取得的成果第66-67页

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