摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
1.1 三阴性乳腺癌 | 第12页 |
1.2 癌症的转移 | 第12-15页 |
1.2.1 癌症转移方式 | 第13页 |
1.2.2 原发肿瘤的扩散 | 第13-15页 |
1.2.3 癌症转移方式 | 第15页 |
1.3 低切应力对癌细胞转移的影响 | 第15-16页 |
1.3.1 对细胞膜上蛋白的影响 | 第15-16页 |
1.3.2 对细胞骨架的影响 | 第16页 |
1.3.3 激活离子通道 | 第16页 |
1.4 Caveolae及Caveolin-1 | 第16-20页 |
1.4.1 概述 | 第16-17页 |
1.4.2 Caveolae及Caveolin-1 的生物学功能 | 第17-18页 |
1.4.3 Caveolae的解聚与机械感受 | 第18-19页 |
1.4.4 Caveolin-1 与肿瘤的发生、发展 | 第19-20页 |
1.5 细胞的迁移 | 第20-23页 |
1.5.1 迁移的类型 | 第20页 |
1.5.2 细胞骨架重组及应力纤维形成 | 第20-21页 |
1.5.3 细胞极性的形成 | 第21-22页 |
1.5.4 黏着斑的动态变化 | 第22-23页 |
1.6 本课题的研究目的及内容 | 第23-24页 |
第二章 低切应力介导CAV-1 调控细胞的运动与粘附 | 第24-44页 |
2.1 引言 | 第24页 |
2.2 实验材料和方法 | 第24-33页 |
2.2.1 实验材料和试剂 | 第24-26页 |
2.2.2 细胞培养 | 第26-27页 |
2.2.3 慢病毒载体构建Cav-1 沉默稳转细胞株 | 第27页 |
2.2.4 细胞的瞬时转染 | 第27-29页 |
2.2.5 平板流动腔实验 | 第29页 |
2.2.6 化学发光法检测细胞增殖 | 第29页 |
2.2.7 细胞周期检测 | 第29-30页 |
2.2.8 细胞凋亡检测 | 第30页 |
2.2.9 细胞外基质黏附实验 | 第30-31页 |
2.2.10 细胞划痕实验 | 第31页 |
2.2.11 免疫荧光标记 | 第31页 |
2.2.12 细胞骨架染色 | 第31-32页 |
2.2.13 细胞极性实验 | 第32页 |
2.2.14 活细胞工作站 | 第32页 |
2.2.15 光漂白实验(Fluorescence recovery after photobleaching, FRAP) | 第32-33页 |
2.2.16 软件及统计分析 | 第33页 |
2.3 实验结果 | 第33-42页 |
2.3.1 低切应力影响肿瘤细胞的形状、极性和黏着斑形成 | 第33-35页 |
2.3.2 Cav-1 能够促进肿瘤细胞的迁移 | 第35-36页 |
2.3.3 低切应力通过Cav-1 调控应力纤维的形成 | 第36-38页 |
2.3.4 低切应力通过调控Cav-1 来影响细胞的运动和再贴壁 | 第38-40页 |
2.3.5 Cav-1 促进细胞黏着斑的动态变化 | 第40-41页 |
2.3.6 Cav-1 影响细胞增殖,但不影响细胞的凋亡与周期 | 第41-42页 |
2.4 讨论 | 第42-43页 |
2.5 本章小结 | 第43-44页 |
第三章 低切应力在CAV-1 介导细胞粘附与运动的机制研究 | 第44-55页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 实验材料和方法 | 第44-49页 |
3.2.1 实验材料和试剂 | 第44-45页 |
3.2.2 Real-time PCR | 第45-48页 |
3.2.3 蛋白免疫印迹实验(Western Blot) | 第48-49页 |
3.3 实验结果 | 第49-53页 |
3.3.1 低切应力促进细胞运动相关信号通路活化 | 第49-50页 |
3.3.2 低切应力促进细胞黏附信号通路活化 | 第50-51页 |
3.3.3 低切应力调控 β1-integrin的活化及内化 | 第51-53页 |
3.4 讨论 | 第53-54页 |
3.5 本章小结 | 第54-55页 |
第四章 结论与展望 | 第55-58页 |
4.1 全文总结 | 第55-56页 |
4.2 后续展望 | 第56-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
攻读硕士学位期间取得的成果 | 第66-67页 |