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两种捕鸟蛛多肽毒素的分子多样性及其机制研究

中文摘要第5-9页
ABSTRACT第9-13页
第一章 蜘蛛毒腺转录组的研究进展第18-37页
    1.1 转录组与转录组学第18页
    1.2 测序技术的发展第18-25页
        1.2.1 传统测序方法:第一代DNA测序技术第18-20页
        1.2.2 高通量测序技术第20-25页
    1.3 蜘蛛毒腺转录组的研究现状第25-32页
        1.3.1 特异性cDNA测序获取蜘蛛毒素全长序列第26-27页
        1.3.2 EST测序获取蜘蛛毒素序列第27-28页
        1.3.3 454测序获取蜘蛛毒素序列第28-32页
        1.3.4 Illumina测序获取蜘蛛毒素序列第32页
    1.4 蜘蛛毒腺转录组中其它成分第32-33页
    1.5 蜘蛛毒腺转录组与其它方法整合第33-37页
第二章 虎纹捕鸟蛛毒素组学及功能多样性分析第37-64页
    2.1 前言第37-38页
    2.2 材料、试剂和仪器第38-39页
        2.2.1 实验材料与试剂第38页
        2.2.2 实验仪器第38-39页
    2.3 实验方法第39-43页
        2.3.1 分离蜘蛛的毒腺和总RNA的提取第39页
        2.3.2 m RNA的纯化第39-40页
        2.3.3 454转录组文库的构建与测序第40-42页
        2.3.4 数据处理第42-43页
    2.4 结果第43-58页
        2.4.1 高质量RNA的提取和454转录组文库的高效构建第43页
        2.4.2 454 测序和序列拼接第43-44页
        2.4.3 序列分类第44-45页
        2.4.4 功能注释第45-47页
        2.4.5 蜘蛛毒素转录子分析第47-50页
        2.4.6 毒素前体分类第50-57页
        2.4.7 毒素I、II、XVIII超家族不同的进化策略第57-58页
    2.5 讨论第58-64页
第三章 海南捕鸟蛛毒素组学研究第64-91页
    3.1 前言第64-65页
    3.2 材料与方法第65-66页
        3.2.1 实验材料第65页
        3.2.2 实验仪器第65-66页
    3.3 实验方法第66-69页
        3.3.1 分离蜘蛛的毒腺和总RNA的提取第66页
        3.3.2 m RNA纯化第66页
        3.3.3 454转录组文库的构建与测序第66页
        3.3.4 数据处理第66页
        3.3.5 海南捕鸟蛛毒素的分离纯化第66-67页
        3.3.6 MALDI-TOF质谱分析第67页
        3.3.7 生理活性和药理特征测定第67-69页
    3.4 结果第69-85页
        3.4.1 高质量RNA的提取和454转录组文库的高效构建第69页
        3.4.2 454 测序和序列拼接第69-70页
        3.4.3 序列分类第70-71页
        3.4.4 功能注释第71-73页
        3.4.5 蜘蛛毒素转录子的分类第73-79页
        3.4.6 不同Class中毒素的丰度第79-81页
        3.4.7 毒素前体突变体第81-82页
        3.4.8 多肽毒素的修饰和加工第82-83页
        3.4.9 蜘蛛毒素功能多样性分析第83-85页
    3.5 讨论第85-91页
第四章 两种捕鸟蛛粗毒对心肌细胞电生理影响第91-109页
    4.1 前言第91页
    4.2 材料第91-93页
        4.2.1 动物第91-92页
        4.2.2 溶液的配制第92页
        4.2.3 实验仪器第92-93页
    4.3 方法第93-96页
        4.3.1 乳鼠心肌细胞的提取第93-94页
        4.3.2 膜片钳检测第94-96页
        4.3.3 数据处理第96页
    4.4 结果第96-107页
        4.4.1 两种蜘蛛粗毒对乳鼠心肌细胞动作电位时程的影响第96-97页
        4.4.2 蜘蛛粗毒对INa的影响第97-99页
        4.4.3 蜘蛛粗毒对心肌钾电流的影响第99-106页
        4.4.4 蜘蛛粗毒对心肌钙离子通道的影响第106-107页
    4.5 讨论第107-109页
第五章 海南捕鸟蛛和虎纹捕鸟蛛毒素序列比较分析第109-123页
    5.1 前言第109-110页
    5.2 海南捕鸟蛛和虎纹捕鸟蛛毒素序列的比较第110-121页
        5.2.1 海南捕鸟蛛和虎纹捕鸟蛛毒素序列分析第110-116页
        5.2.2 海南捕鸟蛛和虎纹捕鸟蛛毒素半胱氨酸框架分析第116-121页
        5.2.3 海南捕鸟蛛和虎纹捕鸟蛛毒素进化分析第121页
    5.3 讨论第121-123页
进一步研究设想第123-124页
参考文献第124-135页
攻读博士学位期间发表的论文目录第135-137页
缩写表第137-138页
致谢第138页

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