| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第14-20页 |
| 1.1 纳米材料及纳米二氧化硅概述 | 第14页 |
| 1.2 纳米材料与纳米二氧化硅毒性及流行病学研究现状 | 第14-17页 |
| 1.3 Nrf2/ARE信号通路概述 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第18页 |
| 1.5 本研究的实验方案和技术路线 | 第18-20页 |
| 第二章 纳米二氧化硅暴露致A549细胞毒性及Nrf2/ARE信号通路转运激活分析 | 第20-55页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 受试细胞 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21页 |
| 2.1.5 试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-33页 |
| 2.2.1 纳米二氧化硅（10-20nm）和微米二氧化硅（1-5μm）的表征 | 第22-23页 |
| 2.2.2 A549细胞培养及处理 | 第23页 |
| 2.2.3 A549细胞活力分析 | 第23-24页 |
| 2.2.4 A549细胞周期检测 | 第24-25页 |
| 2.2.5 A549细胞凋亡检测 | 第25-26页 |
| 2.2.6 超氧化物歧化酶（SOD）活性检测 | 第26-27页 |
| 2.2.7 活性氧（ROS）检测 | 第27-28页 |
| 2.2.8 细胞膜电位检测 | 第28-29页 |
| 2.2.9 PERK、Nrf2蛋白表达检测 | 第29-32页 |
| 2.2.10 HO-1 蛋白表达检测 | 第32-33页 |
| 2.3 统计分析 | 第33页 |
| 2.4 结果 | 第33-52页 |
| 2.4.1 纳米二氧化硅（10-20nm）和微米二氧化硅（1-5μm）的表征 | 第33-36页 |
| 2.4.2 纳米二氧化硅暴露对A549细胞生物学性状分析 | 第36-39页 |
| 2.4.3 纳米二氧化硅暴露对A549细胞周期的影响 | 第39-41页 |
| 2.4.4 纳米二氧化硅暴露对A549细胞凋亡的影响 | 第41-42页 |
| 2.4.5 纳米二氧化硅暴露对A549细胞SOD活性的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.6 纳米二氧化硅暴露对A549细胞ROS的影响 | 第43-45页 |
| 2.4.7 纳米二氧化硅暴露对A549细胞膜电位的影响 | 第45-48页 |
| 2.4.8 纳米二氧化硅暴露对A549细胞Nrf2/ARE信号通路相关蛋白表达的影响 | 第48-52页 |
| 2.5 讨论 | 第52-54页 |
| 2.6 本章小结 | 第54-55页 |
| 第三章 纳米二氧化硅暴露致A549-shNrf2细胞生物学性状变化研究 | 第55-80页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第55-59页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第55页 |
| 3.1.2 受试细胞 | 第55页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第55-56页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第56-57页 |
| 3.1.5 试剂配制 | 第57-59页 |
| 3.2 实验方法 | 第59-65页 |
| 3.2.1 A549-shNrf2细胞系的建立 | 第59-65页 |
| 3.2.2 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞活力检测 | 第65页 |
| 3.2.3 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性检测 | 第65页 |
| 3.2.4 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞活性氧(ROS)检测 | 第65页 |
| 3.2.5 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞T-AOC检测 | 第65页 |
| 3.2.6 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞PERK、Nrf2蛋白检测 | 第65页 |
| 3.2.7 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞HO-1 蛋白含量检测 | 第65页 |
| 3.3 统计分析 | 第65-66页 |
| 3.4 结果 | 第66-79页 |
| 3.4.1 A549 Nrf2低表达细胞系构建及鉴定 | 第66-68页 |
| 3.4.2 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞活力检测 | 第68-70页 |
| 3.4.3 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性检测 | 第70-71页 |
| 3.4.4 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞活性氧(ROS)检测 | 第71-73页 |
| 3.4.5 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞T-AOC检测 | 第73-75页 |
| 3.4.6 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细PERK、Nrf2蛋白检测 | 第75-77页 |
| 3.4.7 纳米二氧化硅暴露对A549-shNrf2细胞HO-1 蛋白含量检测 | 第77-79页 |
| 3.5 讨论 | 第79页 |
| 3.6 本章小结 | 第79-80页 |
| 第四章 纳米二氧化硅暴露于Nrf2-/-小鼠氧化损伤及Nrf2/ARE信号通路表达分析 | 第80-96页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第80-82页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第80页 |
| 4.1.2 受试动物 | 第80页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第80-81页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第81页 |
| 4.1.5 试剂配制 | 第81-82页 |
| 4.2 实验方法 | 第82-85页 |
| 4.2.1 Nrf2基因敲除小鼠的鉴定 | 第82页 |
| 4.2.2 纳米二氧化硅暴露处理 | 第82页 |
| 4.2.3 肺系数、肝系数、肾系数的测定 | 第82页 |
| 4.2.4 肺组织石蜡切片病理学观察 | 第82-83页 |
| 4.2.5 肺部纳米二氧化硅粒子的亚细胞定位检测 | 第83-84页 |
| 4.2.6 小鼠肺组织ROS含量分析 | 第84页 |
| 4.2.7 小鼠肺组织T-AOC测定 | 第84-85页 |
| 4.2.8 小鼠肺组织 8-OHdG测定 | 第85页 |
| 4.2.9 小鼠肺组织PERK、Nrf2、HO-1 蛋白表达的变化分析 | 第85页 |
| 4.3 统计分析 | 第85-86页 |
| 4.4 结果 | 第86-94页 |
| 4.4.1 Nrf2基因敲除小鼠的鉴定 | 第86页 |
| 4.4.2 肺部纳米二氧化硅粒子的亚细胞定位检测 | 第86-87页 |
| 4.4.3 小鼠体重及肺系数、肝系数、肾系数的测定 | 第87-89页 |
| 4.4.4 肺组织石蜡切片病理学观察 | 第89页 |
| 4.4.5 小鼠肺组织ROS含量分析 | 第89-90页 |
| 4.4.6 小鼠肺组织T-AOC测定 | 第90-91页 |
| 4.4.7 小鼠肺组织 8-OHdG测定 | 第91-92页 |
| 4.4.8 肺组织PERK、Nrf2、HO-1 蛋白表达的变化分析 | 第92-94页 |
| 4.5 讨论 | 第94-95页 |
| 4.6 本章小结 | 第95-96页 |
| 第五章 课题结论及展望 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-107页 |
| 综述 | 第107-115页 |
| 参考文献 | 第111-115页 |
| 附录Ⅰ 缩略词注释表 | 第115-116页 |
| 附录Ⅱ 攻读硕士学位期间取得的成果 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
