| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 精原干细胞 | 第11-14页 |
| 1.1.1 精原干细胞生物学特点 | 第11页 |
| 1.1.2 精原干细胞一般研究内容 | 第11-13页 |
| 1.1.3 精原干细胞的自我更新调控信号通路 | 第13-14页 |
| 1.2 miRNA与Kmt5a基因 | 第14-20页 |
| 1.2.1 miRNA的生物学特征 | 第14页 |
| 1.2.2 miRNA的生成 | 第14-15页 |
| 1.2.3 miRNA -mRNA互作机制 | 第15-16页 |
| 1.2.4 miRNAs与精子发生 | 第16-17页 |
| 1.2.5 miR-382 简介 | 第17-18页 |
| 1.2.6 Kmt5a基因功能简介 | 第18-20页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 miR-382 靶向Kmt5a影响GC-1 spg的增殖 | 第21-40页 |
| 2.1 材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 基因工程菌株 | 第21页 |
| 2.1.3 质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.4 细胞系 | 第22页 |
| 2.1.5 工具酶及DNA Marker | 第22页 |
| 2.1.6 主要试剂盒 | 第22页 |
| 2.1.7 主要化学试剂 | 第22页 |
| 2.1.8 序列分析及引物设计 | 第22-23页 |
| 2.1.9 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 免疫组织化学（SP法） | 第24页 |
| 2.2.2 蛋白提取 | 第24页 |
| 2.2.3 Western-blot | 第24-25页 |
| 2.2.4 DNA提取 | 第25页 |
| 2.2.5 RNA提取 | 第25页 |
| 2.2.6 RT-qPCR检测mRNA/miRNA表达 | 第25-26页 |
| 2.2.7 RT-qPCR反应 | 第26-27页 |
| 2.2.8 分子克隆与质粒构建 | 第27-32页 |
| 2.2.9 双荧光素酶报告基因检测 | 第32页 |
| 2.2.10 细胞及细胞培养 | 第32页 |
| 2.2.11 转染 | 第32-33页 |
| 2.2.12 CCK8试验 | 第33页 |
| 2.2.13 EdU试验 | 第33页 |
| 2.2.14 统计分析 | 第33页 |
| 2.3 结果 | 第33-39页 |
| 2.3.1 KMT5A表达及miR-382 靶基因鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.2 miR-382 靶基因鉴定 | 第34-38页 |
| 2.3.3 miR-382 影响GC-1 spg细胞的增殖 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39页 |
| 2.5 小结 | 第39-40页 |
| 第三章 Kmt5a在猪睾丸的表达模式及剪接变体结构研究 | 第40-47页 |
| 3.1 材料 | 第40页 |
| 3.2 方法 | 第40-42页 |
| 3.2.1 睾丸组织采集 | 第40页 |
| 3.2.2 细胞分离 | 第40-41页 |
| 3.2.3 细胞分离RNA提取与cDNA文库建立 | 第41页 |
| 3.2.4 构建Kmt5a的真核表达载体 | 第41页 |
| 3.2.5 Kmt5a的RT-qPCR检测 | 第41-42页 |
| 3.2.6 数据处理方法 | 第42页 |
| 3.3 结果 | 第42-45页 |
| 3.3.1 Kmt5a在各细胞类型及不同年龄段的mRNA表达分布 | 第42-43页 |
| 3.3.2 Kmt5a基因克隆 | 第43-44页 |
| 3.3.3 Kmt5a- X2 DNA序列分析 | 第44页 |
| 3.3.4 Kmt5a剪接变体蛋白结构分析 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-46页 |
| 3.5 小结 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47页 |
| 本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
