| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 缩略语 | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-20页 |
| 研究现状、成果 | 第15-18页 |
| 研究目的、方法 | 第18-20页 |
| 一、在COPD患者气道上皮中SPDEF和FOXA2的异常DNA甲基化和表达 | 第20-68页 |
| 1.1 对象和方法 | 第21-53页 |
| 1.1.1 道德声明 | 第21页 |
| 1.1.2 原代人支气管上皮细胞的来源 | 第21-23页 |
| 1.1.3 PBECs的分离和培养 | 第23-27页 |
| 1.1.4 PBECs的ALI培养和分化 | 第27-30页 |
| 1.1.5 Transwell膜上的横切面的细胞形态分析 | 第30-36页 |
| 1.1.6 Transwell膜上的水平面的细胞形态分析 | 第36-40页 |
| 1.1.7 实时定量PCR测mRNA的表达 | 第40-44页 |
| 1.1.8 甲基化分析研究 | 第44-52页 |
| 1.1.9 统计 | 第52-53页 |
| 1.2 结果 | 第53-64页 |
| 1.2.1 在IL-13 的刺激下，上皮细胞分化过程中SPDEF和FOXA2表达谱 | 第53-55页 |
| 1.2.2 杯状细胞分化过程中FOXA2和SPDEF的DNA甲基化的动态变化 | 第55-61页 |
| 1.2.3 在COPD中SPDEF和FOXA2基因的表达和DNA甲基化异常 | 第61-64页 |
| 1.3 讨论 | 第64-67页 |
| 1.4 小结 | 第67-68页 |
| 二、靶向SPDEF的表观遗传编辑降低肺上皮细胞的粘液产生 | 第68-114页 |
| 2.1 对象和方法 | 第69-98页 |
| 2.1.1 细胞培养 | 第69页 |
| 2.1.2 质粒载体构建 | 第69-72页 |
| 2.1.3 慢病毒转导 | 第72-74页 |
| 2.1.4 构建MCF7稳定细胞株 | 第74-75页 |
| 2.1.5 gRNA转染 | 第75页 |
| 2.1.6 通过定量实时PCR（qPCR）检测mRNA表达 | 第75-82页 |
| 2.1.7 甲基化分析研究 | 第82-91页 |
| 2.1.8 通过Ch IP和qPCR进行组蛋白修饰分析 | 第91-92页 |
| 2.1.9 通过蛋白质印迹（western blot）检测蛋白质表达 | 第92-93页 |
| 2.1.10 免疫细胞化学 | 第93-97页 |
| 2.1.11 统计 | 第97-98页 |
| 2.2 结果 | 第98-110页 |
| 2.2.1 ATF引起SPDEF下调并进一步抑制粘液相关基因 | 第98-101页 |
| 2.2.2 表观遗传学编辑沉默SPDEF表达 | 第101-106页 |
| 2.2.3 SPDEF靶向的表观遗传学编辑降低MUC5AC强阳性细胞数 | 第106-108页 |
| 2.2.4 靶向SPDEF的表观遗传学编辑导致稳定的SPDEF沉默 | 第108-110页 |
| 2.3 讨论 | 第110-113页 |
| 2.4 小结 | 第113-114页 |
| 全文结论 | 第114-116页 |
| 论文创新点 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-127页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第127-129页 |
| 综述 探讨靶向重写表观遗传标记作为新的COPD治疗方法的潜力 | 第129-179页 |
| 综述参考文献 | 第149-179页 |
| 致谢 | 第179-180页 |
| 个人简历 | 第180页 |
