摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
引言 | 第10-13页 |
1 多种重金属联合毒性拮抗药物筛选 | 第13-23页 |
1.1 前言 | 第13页 |
1.2 材料与设备 | 第13-16页 |
1.2.1 主要试剂 | 第13-14页 |
1.2.2 实验耗材 | 第14页 |
1.2.3 自配溶液 | 第14-15页 |
1.2.4 实验细胞 | 第15页 |
1.2.5 实验仪器 | 第15-16页 |
1.3 实验方法 | 第16-19页 |
1.3.1 HL7702细胞复苏 | 第16页 |
1.3.2 HL7702细胞传代 | 第16-17页 |
1.3.3 重金属混合物储备液(257.303mg/L)配制 | 第17-18页 |
1.3.4 MTT检测重金属混合物细胞毒性 | 第18页 |
1.3.5 MTT法筛选有效拮抗药物 | 第18-19页 |
1.4 实验结果 | 第19-22页 |
1.4.1 重金属混合物对HL7702细胞生存活力的影响 | 第19页 |
1.4.2 多种重金属联合毒性拮抗药物的筛选 | 第19-21页 |
1.4.3 EGCG和毛地黄黄酮自身对HL7702细胞生存活力的影响 | 第21-22页 |
1.5 讨论 | 第22页 |
1.6 小结 | 第22-23页 |
2 毛地黄黄酮拮抗多种重金属联合毒性的分子机制 | 第23-45页 |
2.1 前言 | 第23页 |
2.2 材料与设备 | 第23-25页 |
2.2.1 主要试剂 | 第23-24页 |
2.2.2 主要试剂盒 | 第24页 |
2.2.3 实验耗材 | 第24页 |
2.2.4 自配溶液 | 第24-25页 |
2.2.5 实验仪器 | 第25页 |
2.3 实验方法 | 第25-35页 |
2.3.1 HL7702细胞培养 | 第25页 |
2.3.2 细胞活力检测 | 第25-27页 |
2.3.3 脂质氧化测定 | 第27-29页 |
2.3.4 氧化应激检测 | 第29页 |
2.3.5 细胞ATP水平检测 | 第29-30页 |
2.3.6 线粒体膜电位检测 | 第30页 |
2.3.7 细胞凋亡检测 | 第30-31页 |
2.3.8 蛋白免疫印迹实验 | 第31-34页 |
2.3.9 细胞免疫荧光染色(Cleaved Caspase-3) | 第34-35页 |
2.3.10 统计分析 | 第35页 |
2.4 实验结果 | 第35-42页 |
2.4.1 HL7702细胞生存活力和细胞形态的变化 | 第35-36页 |
2.4.2 HL7702细胞氧化应激、脂质过氧化和ATP水平变化 | 第36-38页 |
2.4.3 HL7702细胞线粒体跨膜电位的变化 | 第38页 |
2.4.4 HL7702细胞凋亡情况 | 第38-39页 |
2.4.5 HL7702细胞蛋白表达情况 | 第39-41页 |
2.4.6 HL7702细胞Cleaved Caspase-3 表达情况(细胞免疫荧光法) | 第41-42页 |
2.5 讨论 | 第42-44页 |
2.6 小结 | 第44-45页 |
3 EGCG拮抗多种重金属联合毒性的分子机制 | 第45-51页 |
3.1 前言 | 第45页 |
3.2 材料与设备 | 第45页 |
3.3 实验方法 | 第45-46页 |
3.3.1 HL7702细胞培养 | 第45页 |
3.3.2 细胞活力检测 | 第45-46页 |
3.3.3 氧化应激水平检测 | 第46页 |
3.3.4 细胞凋亡检测 | 第46页 |
3.3.5 蛋白免疫印迹实验 | 第46页 |
3.4 实验结果 | 第46-49页 |
3.4.1 EGCG提高重金属混合物染毒后的细胞生存活力 | 第46-47页 |
3.4.2 EGCG降低重金属混合物染毒后的氧化应激水平 | 第47-48页 |
3.4.3 EGCG抑制重金属混合物染毒后的细胞凋亡 | 第48页 |
3.4.4 EGCG抑制重金属混合物诱导的MAPK蛋白信号通路活化 | 第48-49页 |
3.5 讨论 | 第49-50页 |
3.6 小结 | 第50-51页 |
4 总结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录A 综述 | 第60-69页 |
参考文献 | 第65-69页 |
附录B 英中文缩略词 | 第69-70页 |
附录C 统计数据 | 第70-71页 |
在学研究成果 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |