摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 前言 | 第12-22页 |
1.1 柘树概述 | 第12-14页 |
1.2 异黄酮类化合物抗肿瘤作用机制研究 | 第14-18页 |
1.2.1 雌激素作用 | 第15-16页 |
1.2.2 抗氧化作用 | 第16页 |
1.2.3 诱导肿瘤细胞凋亡 | 第16-17页 |
1.2.4 细胞周期阻滞作用 | 第17页 |
1.2.5 抑制肿瘤血管生成 | 第17-18页 |
1.2.6 提高免疫作用 | 第18页 |
1.3 异黄酮类物质抗宫颈癌细胞信号转导通路研究 | 第18-21页 |
1.3.1 线粒体内源途径(intrinsic pathway)诱导宫颈癌细胞凋亡 | 第18-20页 |
1.3.2 ERK/MAPK和PI3K/Akt信号分子的改变 | 第20页 |
1.3.3 细胞周期G2/M期阻滞 | 第20-21页 |
1.4 立题依据 | 第21页 |
1.5 创新之处 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-35页 |
2.1 实验材料 | 第22-26页 |
2.1.1 样品原材料 | 第22页 |
2.1.2 细胞株 | 第22页 |
2.1.3 主要实验试剂与材料 | 第22-24页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第24页 |
2.1.5 主要溶液的配制 | 第24-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-35页 |
2.2.1 柘果活性成分Warangalone的提取分离提取及纯化 | 第26-27页 |
2.2.1.1 提取分离 | 第26页 |
2.2.1.2 分离纯化 | 第26-27页 |
2.2.2 异黄酮Warangalone抗颈癌细胞HeLa的分子机制研究 | 第27-35页 |
2.2.2.1 细胞培养 | 第27-28页 |
2.2.2.3 MTT法检测细胞存活率 | 第28页 |
2.2.2.4 显微镜观察Warangalone对HeLa细胞形态的影响 | 第28-29页 |
2.2.2.5 Hoechst 3342 染色检测Warangalone对HeLa细胞核的影响 | 第29页 |
2.2.2.6 细胞划痕实验观察Warangalone对HeLa细胞迁移的影响 | 第29-30页 |
2.2.2.7 Transwell实验观察Warangalone对HeLa细胞侵袭的影响 | 第30页 |
2.2.2.8 PI单染检测Warangalone对HeLa细胞周期的影响 | 第30-31页 |
2.2.2.9 Annexin V-FITC双染法检测HeLa细胞凋亡 | 第31-32页 |
2.2.2.10 JC-1 染色检测HeLa细胞线粒体膜电位 | 第32页 |
2.2.2.11 细胞内活性氧ROS含量的测定 | 第32-33页 |
2.2.2.12 caspase-3, -8 和-9 的活性检测 | 第33页 |
2.2.2.13 Western blotting检测蛋白表达 | 第33-35页 |
2.2.2.14 统计分析 | 第35页 |
3 实验结果 | 第35-54页 |
3.1 化合物晶体结构解析 | 第35-40页 |
3.1.1 Warangalone晶体数据 | 第35-37页 |
3.1.2 FMT-1 晶体数据 | 第37-38页 |
3.1.3 FMT-2 晶体数据 | 第38-40页 |
3.2 Warangalone抗宫颈癌细胞HeLa的分子机制研究 | 第40-54页 |
3.2.1 Warangalone体外抗肿瘤活性 | 第40-41页 |
3.2.2 Warangalone对HeLa细胞增殖抑制作用时效和量效的筛选 | 第41-42页 |
3.2.3 Warangalone对HeLa细胞形态的改变 | 第42-43页 |
3.2.4 Warangalone对HeLa细胞核形态的影响 | 第43-44页 |
3.2.5 Warangalone对HeLa细胞侵袭和迁移能力的抑制作用 | 第44-45页 |
3.2.6 Warangalone对HeLa细胞周期的影响 | 第45-46页 |
3.2.7 流式细胞术分析Warangalone对HeLa细胞凋亡的影响 | 第46-47页 |
3.2.8 Warangalone诱导HeLa细胞线粒体膜电位下降 | 第47-48页 |
3.2.9 Warangalone促进HeLa细胞内ROS的产生 | 第48-49页 |
3.2.10 Warangalone通过调节Bcl-2 家族蛋白诱导HeLa细胞凋亡 | 第49-50页 |
3.2.12 Warangalone通过激活caspase家族蛋白表达诱导HeLa细胞凋亡 | 第50-52页 |
3.2.13 Warangalone诱导HeLa细胞p53的磷酸化,激活了MAPK信号通路 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-58页 |
4.1 柘果活性成分Warangalone提取分离与纯化 | 第54-55页 |
4.2 Warangalone选择性抑制肿瘤细胞增殖 | 第55页 |
4.3 Warangalone抑制HeLa细胞迁移和侵袭能力 | 第55-56页 |
4.4 Warangalone诱导HeLa细胞凋亡 | 第56-57页 |
4.5 Warangalone诱导HeLa细胞内ROS的积累,促进p53的磷酸化,激活了MAPK信号通路 | 第57-58页 |
5 结论与展望 | 第58-61页 |
5.1 结论 | 第58-59页 |
5.2 展望 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
缩略词表 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |