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柘树果实活性成分Warangalone诱导宫颈癌细胞凋亡的分子机制研究

摘要第3-6页
Abstract第6-8页
1 前言第12-22页
    1.1 柘树概述第12-14页
    1.2 异黄酮类化合物抗肿瘤作用机制研究第14-18页
        1.2.1 雌激素作用第15-16页
        1.2.2 抗氧化作用第16页
        1.2.3 诱导肿瘤细胞凋亡第16-17页
        1.2.4 细胞周期阻滞作用第17页
        1.2.5 抑制肿瘤血管生成第17-18页
        1.2.6 提高免疫作用第18页
    1.3 异黄酮类物质抗宫颈癌细胞信号转导通路研究第18-21页
        1.3.1 线粒体内源途径(intrinsic pathway)诱导宫颈癌细胞凋亡第18-20页
        1.3.2 ERK/MAPK和PI3K/Akt信号分子的改变第20页
        1.3.3 细胞周期G2/M期阻滞第20-21页
    1.4 立题依据第21页
    1.5 创新之处第21-22页
2 材料与方法第22-35页
    2.1 实验材料第22-26页
        2.1.1 样品原材料第22页
        2.1.2 细胞株第22页
        2.1.3 主要实验试剂与材料第22-24页
        2.1.4 主要实验仪器第24页
        2.1.5 主要溶液的配制第24-26页
    2.2 实验方法第26-35页
        2.2.1 柘果活性成分Warangalone的提取分离提取及纯化第26-27页
            2.2.1.1 提取分离第26页
            2.2.1.2 分离纯化第26-27页
        2.2.2 异黄酮Warangalone抗颈癌细胞HeLa的分子机制研究第27-35页
            2.2.2.1 细胞培养第27-28页
            2.2.2.3 MTT法检测细胞存活率第28页
            2.2.2.4 显微镜观察Warangalone对HeLa细胞形态的影响第28-29页
            2.2.2.5 Hoechst 3342 染色检测Warangalone对HeLa细胞核的影响第29页
            2.2.2.6 细胞划痕实验观察Warangalone对HeLa细胞迁移的影响第29-30页
            2.2.2.7 Transwell实验观察Warangalone对HeLa细胞侵袭的影响第30页
            2.2.2.8 PI单染检测Warangalone对HeLa细胞周期的影响第30-31页
            2.2.2.9 Annexin V-FITC双染法检测HeLa细胞凋亡第31-32页
            2.2.2.10 JC-1 染色检测HeLa细胞线粒体膜电位第32页
            2.2.2.11 细胞内活性氧ROS含量的测定第32-33页
            2.2.2.12 caspase-3, -8 和-9 的活性检测第33页
            2.2.2.13 Western blotting检测蛋白表达第33-35页
            2.2.2.14 统计分析第35页
3 实验结果第35-54页
    3.1 化合物晶体结构解析第35-40页
        3.1.1 Warangalone晶体数据第35-37页
        3.1.2 FMT-1 晶体数据第37-38页
        3.1.3 FMT-2 晶体数据第38-40页
    3.2 Warangalone抗宫颈癌细胞HeLa的分子机制研究第40-54页
        3.2.1 Warangalone体外抗肿瘤活性第40-41页
        3.2.2 Warangalone对HeLa细胞增殖抑制作用时效和量效的筛选第41-42页
        3.2.3 Warangalone对HeLa细胞形态的改变第42-43页
        3.2.4 Warangalone对HeLa细胞核形态的影响第43-44页
        3.2.5 Warangalone对HeLa细胞侵袭和迁移能力的抑制作用第44-45页
        3.2.6 Warangalone对HeLa细胞周期的影响第45-46页
        3.2.7 流式细胞术分析Warangalone对HeLa细胞凋亡的影响第46-47页
        3.2.8 Warangalone诱导HeLa细胞线粒体膜电位下降第47-48页
        3.2.9 Warangalone促进HeLa细胞内ROS的产生第48-49页
        3.2.10 Warangalone通过调节Bcl-2 家族蛋白诱导HeLa细胞凋亡第49-50页
        3.2.12 Warangalone通过激活caspase家族蛋白表达诱导HeLa细胞凋亡第50-52页
        3.2.13 Warangalone诱导HeLa细胞p53的磷酸化,激活了MAPK信号通路第52-54页
4 讨论第54-58页
    4.1 柘果活性成分Warangalone提取分离与纯化第54-55页
    4.2 Warangalone选择性抑制肿瘤细胞增殖第55页
    4.3 Warangalone抑制HeLa细胞迁移和侵袭能力第55-56页
    4.4 Warangalone诱导HeLa细胞凋亡第56-57页
    4.5 Warangalone诱导HeLa细胞内ROS的积累,促进p53的磷酸化,激活了MAPK信号通路第57-58页
5 结论与展望第58-61页
    5.1 结论第58-59页
    5.2 展望第59-61页
参考文献第61-68页
缩略词表第68-69页
攻读学位期间发表的学术论文目录第69-70页
致谢第70页

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