| 摘要 | 第9-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-30页 |
| 1.1 概述 | 第18页 |
| 1.2 植物激素茉莉酸的研究进展 | 第18-25页 |
| 1.2.1 茉莉酸的发现 | 第18-19页 |
| 1.2.2 茉莉酸的生理作用 | 第19页 |
| 1.2.3 茉莉酸的生物合成 | 第19-20页 |
| 1.2.4 茉莉酸的信号转导 | 第20-24页 |
| 1.2.5 茉莉酸与其它植物激素的相互作用 | 第24-25页 |
| 1.3 植物基因的选择性剪切 | 第25-28页 |
| 1.3.1 选择性剪切的类型 | 第25-26页 |
| 1.3.2 选择性剪切的作用 | 第26页 |
| 1.3.3 茉莉酸信号通路中的选择性剪切 | 第26-28页 |
| 1.4 桑树茉莉酸研究进展 | 第28页 |
| 1.4.1 茉莉酸与桑树抗虫的研究 | 第28页 |
| 1.4.2 桑树茉莉酸通路相关基因的研究 | 第28页 |
| 1.5 结语 | 第28-30页 |
| 第二章 引言 | 第30-32页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第30页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第30-31页 |
| 2.3 研究路线 | 第31-32页 |
| 第三章 桑树茉莉酸生物合成与信号转导途径基因的鉴定、克隆及生物信息学分析 | 第32-52页 |
| 3.1 材料与数据 | 第32-34页 |
| 3.1.1 材料 | 第32页 |
| 3.1.2 序列信息的获得 | 第32页 |
| 3.1.3 主要使用软件 | 第32页 |
| 3.1.4 主要使用试剂及溶液配制方法 | 第32-34页 |
| 3.1.5 主要使用仪器 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-39页 |
| 3.2.1 桑树茉莉酸生物合成与信号转导途径基因的鉴定 | 第34页 |
| 3.2.2 基因表达聚类分析 | 第34-35页 |
| 3.2.3 多序列比对与系统发生分析 | 第35页 |
| 3.2.4 RNA提取与质量检测 | 第35页 |
| 3.2.5 cDNA的合成 | 第35-36页 |
| 3.2.6 桑树茉莉酸信号转导途径相关基因的克隆 | 第36-39页 |
| 3.2.7 桑树茉莉酸信号转导途径基因MnJAZ的定量PCR | 第39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-51页 |
| 3.3.1 桑树茉莉酸生物合成与信号转导途径基因的鉴定 | 第39-42页 |
| 3.3.2 桑树茉莉酸生物合成与信号转导途径基因的表达模式分析 | 第42-43页 |
| 3.3.3 桑树 12-氧-植物二烯酸还原酶的鉴定与信息学分析 | 第43-45页 |
| 3.3.4 桑树JAZ家族基因的鉴定、克隆与表达模式分析 | 第45-49页 |
| 3.3.5 桑树NINJA基因及其剪切体的鉴定 | 第49-51页 |
| 3.4 总结与讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 咬食和机械损伤处理下川桑的转录组分析 | 第52-74页 |
| 4.1 材料与方法 | 第52-55页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第52页 |
| 4.1.2 主要使用试剂及溶液配制方法 | 第52-55页 |
| 4.1.3 主要使用仪器 | 第55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-59页 |
| 4.2.1 材料处理方法及取材时间 | 第55页 |
| 4.2.2 RNA 提取及样品检测 | 第55-56页 |
| 4.2.3 MnNINJAs的原核表达、蛋白纯化和抗体制备 | 第56-58页 |
| 4.2.4 桑树蛋白质的提取 | 第58页 |
| 4.2.5 Western Blot | 第58-59页 |
| 4.3 结果与分析 | 第59-72页 |
| 4.3.1 RNA提取质量检测 | 第59页 |
| 4.3.2 差异基因分析 | 第59-63页 |
| 4.3.3 茉莉酸途径相关基因分析 | 第63-65页 |
| 4.3.4 植物激素相关基因的表达 | 第65-67页 |
| 4.3.5 咬食和激素处理下MnNINJAl的表达 | 第67-69页 |
| 4.3.6 MnNINJAs的原核表达、蛋白纯化和抗体制备 | 第69-71页 |
| 4.3.7 MnNINJAl和MnNINJAs的Western Blot | 第71-72页 |
| 4.4 总结与讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 MnNINJAl及其剪切体MnNINJAs的功能研究 | 第74-112页 |
| 5.1 材料与方法 | 第74-78页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第74页 |
| 5.1.2 主要实验试剂及溶液配制方法 | 第74-78页 |
| 5.2 实验方法 | 第78-93页 |
| 5.2.1 均一化酵母双杂交文库的构建 | 第78-81页 |
| 5.2.2 酵母双杂交诱饵载体的构建 | 第81-83页 |
| 5.2.3 酵母感受态细胞的转化 | 第83页 |
| 5.2.4 酵母总蛋白的提取和Western Blot检测 | 第83-84页 |
| 5.2.5 诱饵蛋白的毒性和自激活检测 | 第84-85页 |
| 5.2.6 酵母感受态细胞的制备及大规模文库转化 | 第85-86页 |
| 5.2.7 文库宿主菌与诱饵菌株的融合 | 第86-87页 |
| 5.2.8 酵母双杂交阳性克隆的PCR检测 | 第87-88页 |
| 5.2.9 阳性克隆的分离与质粒提取 | 第88-89页 |
| 5.2.10 阳性克隆全长猎物表达载体的构建 | 第89-90页 |
| 5.2.11 阳性克隆的荧光定量PCR | 第90页 |
| 5.2.12 转基因过表达载体的构建 | 第90页 |
| 5.2.13 农杆菌感受态细胞的转化 | 第90-91页 |
| 5.2.14 拟南芥的浸花法转化 | 第91页 |
| 5.2.15 转基因拟南芥的验证 | 第91-92页 |
| 5.2.16 转基因拟南芥中茉莉酸响应基因的表达 | 第92-93页 |
| 5.3 结果与分析 | 第93-107页 |
| 5.3.1 川桑均一化酵母双杂交文库的构建 | 第93-94页 |
| 5.3.2 pGBKT7-MnNINJAl和pGBKT7-MnNINJAs诱饵载体的构建 | 第94-95页 |
| 5.3.3 Western Blot检测诱饵重组蛋白在酵母细胞内的表达 | 第95页 |
| 5.3.4 诱饵蛋白的毒性和自激活检测 | 第95-97页 |
| 5.3.5 酵母双杂交筛选MnNINJAl和MnNINJAs的互作蛋白 | 第97-103页 |
| 5.3.6 MnSCE1和MnOPCL1在川桑各组织的表达水平 | 第103页 |
| 5.3.7 MnSCE1和MnOPCL1在咬食和激素处理下的表达水平 | 第103-104页 |
| 5.3.8 MnNINJAl和MnNINJAs转基因过表达载体的构建 | 第104-105页 |
| 5.3.9 转基因拟南芥的获得及验证 | 第105-106页 |
| 5.3.10 转基因拟南芥中激素下游基因的表达 | 第106-107页 |
| 5.4 总结与讨论 | 第107-112页 |
| 第六章 综合与讨论 | 第112-116页 |
| 1、川桑茉莉酸生物合成与信号转导途径基因的鉴定及生物信息学分析 | 第112-113页 |
| 2、咬食和损伤处理下川桑的转录组分析 | 第113-114页 |
| 3、MnNINJAl和MnNINJAs的功能研究 | 第114-116页 |
| 论文创新点 | 第116-118页 |
| 参考文献 | 第118-126页 |
| 附录 | 第126-140页 |
| 在读期间发表文章及参研课题 | 第140-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
