摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第15-23页 |
1.1 GTPase超家族概述 | 第15-16页 |
1.1.1 GTPase超家族的分类 | 第15页 |
1.1.2 GTPase超家族的特征 | 第15-16页 |
1.1.3 GTPase超家族的功能简介 | 第16页 |
1.2 GTPase四类家族的研究进展 | 第16-19页 |
1.2.1 免疫相关GTP酶(Irgs,也称p47 GTP酶) | 第16-17页 |
1.2.2 干扰素诱导的鸟苷酸结合蛋白(GBPs,也称p65 GTP酶) | 第17-18页 |
1.2.3 Mx蛋白家族 | 第18页 |
1.2.4 超大GTP酶家族(VLIG) | 第18-19页 |
1.3 家蚕对BmNPV病毒抗性研究进展 | 第19-23页 |
1.3.1 家蚕核型多角体病毒BmNPV的概述 | 第19-20页 |
1.3.2 家蚕核型多角体病毒的防治 | 第20-23页 |
第二章 引言 | 第23-25页 |
2.1 研究背景 | 第23页 |
2.2 研究内容 | 第23-24页 |
2.3 研究路线 | 第24-25页 |
第三章 家蚕BmGBP基因的克隆与序列分析 | 第25-43页 |
3.1 实验材料和试剂 | 第25-29页 |
3.1.1 实验材料 | 第25页 |
3.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
3.1.4 主要溶液配置 | 第26-29页 |
3.2 试验方法 | 第29-35页 |
3.2.1 RNA的抽提 | 第30页 |
3.2.2 反转录及cDNA的合成及检测 | 第30-32页 |
3.2.3 目的基因BmGBP的PCR扩增 | 第32页 |
3.2.4 目的片段的回收 | 第32-33页 |
3.2.5 目的片段与载体的连接及转化 | 第33页 |
3.2.6 阳性克隆的筛选和验证 | 第33-34页 |
3.2.7 质粒的提取与保存 | 第34页 |
3.2.8 家蚕BmGBP基因的序列分析 | 第34-35页 |
3.2.9 家蚕BmGBP基因的表达模式分析 | 第35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-42页 |
3.3.1 家蚕BmGBP基因的克隆 | 第35-36页 |
3.3.2 家蚕BmGBP基因的序列特征及功能域预测 | 第36-40页 |
3.3.3 家蚕BmGBP基因的系统发育分析 | 第40-42页 |
3.3.4 家蚕BmGBP基因的时空表达分析 | 第42页 |
3.4 讨论 | 第42-43页 |
第四章 家蚕BmGBP基因的原核表达与抗体制备 | 第43-63页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第43-54页 |
4.1.1 实验材料 | 第43页 |
4.1.2 实验试剂 | 第43页 |
4.1.3 主要溶液配置 | 第43-47页 |
4.1.4 方法与步骤 | 第47-54页 |
4.2 结果与分析 | 第54-62页 |
4.2.1 家蚕BmGBP基因的原核表达 | 第54-56页 |
4.2.2 家蚕BmGBP基因的原核表达与条件优化 | 第56-59页 |
4.2.3 家蚕BmGBP基因原核表达蛋白的纯化与鉴定 | 第59-60页 |
4.2.4 家蚕BmGBP蛋白抗体的制备与效价测定 | 第60-61页 |
4.2.5 家蚕BmGBP基因在BmN-SWU1、BmN-SWU2两个细胞系中表达情况的检测 | 第61-62页 |
4.3 讨论 | 第62-63页 |
第五章 家蚕BmGBP基因功能的初步研究 | 第63-79页 |
5.1 实验材料与试剂 | 第63-67页 |
5.1.1 实验材料 | 第63页 |
5.1.2 实验试剂 | 第63页 |
5.1.3 主要溶液配置 | 第63-64页 |
5.1.4 方法与步骤 | 第64-67页 |
5.2 结果与分析 | 第67-77页 |
5.2.1 家蚕BmGBP基因真核表达重组质粒的构建 | 第67-69页 |
5.2.2 家蚕BmGBP蛋白在两个细胞系中的定位 | 第69-70页 |
5.2.3 细胞过表达BmGBP基因对BmNPV复制的影响 | 第70-73页 |
5.2.4 家蚕BmGBP基因功能域的鉴定 | 第73-76页 |
5.2.5 家蚕BmGBP基因在家蚕871、871C两个品系感染BmNPV前后不同时期中肠组织中的鉴定 | 第76-77页 |
5.3 讨论 | 第77-79页 |
第六章 结论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-89页 |
致谢 | 第89-90页 |