| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 乳腺生物反应器 | 第11-12页 |
| 1.1.1 乳腺生物反应器的概念 | 第11页 |
| 1.1.2 乳腺生物反应器的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 动物的转基因技术 | 第12-17页 |
| 1.2.1 原核显微注射 | 第14-15页 |
| 1.2.2 病毒载体转移基因 | 第15-16页 |
| 1.2.3 精子介导的基因转移 | 第16页 |
| 1.2.4 ES介导的基因转移 | 第16页 |
| 1.2.5 体细胞克隆的DNA转移 | 第16-17页 |
| 1.3 启动子的研究 | 第17-18页 |
| 1.3.1 真核生物启动子 | 第17页 |
| 1.3.2 乳腺特异性启动子 | 第17-18页 |
| 1.4 内含子对基因表达的作用 | 第18-19页 |
| 1.5 展望 | 第19-20页 |
| 第二章 奶山羊BLG基因调控序列指导的乳腺特异性表达载体的构建和优化 | 第20-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-24页 |
| 2.1.1 实验材料与仪器设备 | 第21-24页 |
| 2.2 技术路线 | 第24页 |
| 2.3 山羊乳腺上皮细胞的培养 | 第24页 |
| 2.4 载体的构建 | 第24-32页 |
| 2.4.1 奶山羊BLG基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建 | 第24-30页 |
| 2.4.2 乳腺特异性表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.5 细胞转染 | 第32页 |
| 2.6 双荧光素酶报告基因检测 | 第32-33页 |
| 2.7 实时定量PCR反应 | 第33-35页 |
| 2.7.1 细胞RNA提取及反转录 | 第33-34页 |
| 2.7.2 定量PCR引物 | 第34页 |
| 2.7.3 定量PCR反应 | 第34-35页 |
| 2.8 蛋白免疫印迹检测 | 第35-37页 |
| 2.8.1 GMECs细胞总蛋白的提取和BCA定量 | 第35-36页 |
| 2.8.2 蛋白免疫印迹（Western blot） | 第36-37页 |
| 2.9 实验结果 | 第37-42页 |
| 2.9.1 奶山羊β-lactoglobulin基因启动子 5＇和 3＇调控序列的PCR扩增结果 | 第37-38页 |
| 2.9.2 双荧光素酶报告基因检测分析启动子活性 | 第38-39页 |
| 2.9.3 重组载体pE-BLGU1~13在GMECs中的表达 | 第39-40页 |
| 2.9.4 内含子对启动子活性的影响 | 第40-42页 |
| 2.10 讨论与总结 | 第42-45页 |
| 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 缩略 词 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 个人简介 | 第57页 |
